Identificación fúngica y pruebas de sensibilidad a antifúngicos

La identificación fúngica y las pruebas de sensibilidad a antifúngicos son los métodos de laboratorio que detectan e identifican las levaduras y mohos causantes de infecciones humanas y miden su susceptibilidad a los agentes antifúngicos. La micología diagnóstica combina la microscopía y el cultivo con la detección de antígenos y anticuerpos, métodos moleculares y la identificación proteómica, y añade pruebas de sensibilidad in vitro para agentes antifúngicos.

Definition

La identificación fúngica es la determinación en laboratorio de la especie de una levadura o moho a partir de una muestra clínica, mediante métodos microscópicos, de cultivo, serológicos, moleculares o proteómicos; las pruebas de sensibilidad a antifúngicos son la medición in vitro de la susceptibilidad de un aislado fúngico a los agentes antifúngicos.

Scope

La entrada abarca la microscopía directa y el cultivo, la detección de antígenos y anticuerpos (serológica), la identificación de hongos por ácidos nucleicos y proteómica, y las pruebas de sensibilidad a antifúngicos con sus puntos de corte interpretativos. Se abordan estos aspectos como métodos de laboratorio y no se proporciona información sobre la selección o dosificación de antifúngicos para pacientes.

Core questions

• ¿Está presente un hongo en esta muestra y de qué especie se trata?
• ¿Qué métodos —microscopía, cultivo, detección de antígenos o anticuerpos, ensayos moleculares o espectrometría de masas— lo detectan e identifican mejor?
• ¿Es el aislado susceptible a los agentes antifúngicos relevantes, y cómo se mide e interpreta eso?
• ¿Cuáles son los límites de los diagnósticos fúngicos en cuanto a sensibilidad, velocidad y estandarización?

Key concepts

• Microscopía directa (KOH, calcofluor, histopatología)
• Cultivo y morfología fúngica
• Detección de antígenos (p. ej., galactomanano, antígeno criptocócico, beta-D-glucano)
• Pruebas de anticuerpos (serológicas)
• Identificación molecular y proteómica
• Espectrometría de masas MALDI-TOF de hongos
• Pruebas de sensibilidad a antifúngicos y puntos de corte
• Levaduras versus mohos

Mechanisms

La micología diagnóstica detecta hongos visualizándolos en muestras con tinciones y microscopía, cultivándolos y leyendo la morfología de la colonia y microscópica, y mediante métodos independientes del cultivo. Los ensayos de antígenos detectan componentes circulantes de la pared celular o capsulares fúngicos, mientras que las pruebas de anticuerpos detectan la respuesta del huésped; junto con los ensayos moleculares y la identificación proteómica, estos extienden la detección a organismos de crecimiento lento o difíciles de cultivar (Kozel & Wickes, 2014). La identificación a nivel de especie utiliza cada vez más la espectrometría de masas MALDI-TOF, que compara el espectro proteico de un aislado fúngico con una base de datos de referencia (Clark et al., 2013). Las pruebas de sensibilidad a antifúngicos miden entonces la actividad inhibitoria de los agentes antifúngicos contra un aislado y la interpretan en función de los puntos de corte; la estandarización de estas pruebas y su relación con los resultados ha sido un esfuerzo en evolución (Rex & Pfaller, 2002). Las guías profesionales sitúan estos métodos de laboratorio dentro de la evaluación diagnóstica más amplia de las enfermedades fúngicas (Pappas et al., 2016).

Clinical relevance

Los resultados de la identificación fúngica y la sensibilidad contribuyen al razonamiento clínico sobre las infecciones fúngicas invasivas y superficiales e informan la gestión de los agentes antifúngicos. Esta entrada describe cómo se producen e interpretan esos resultados de laboratorio; es material de referencia y no constituye una base para seleccionar o dosificar la terapia antifúngica para un individuo, lo cual es abordado por las guías clínicas y el equipo tratante.

Epidemiology

La micología diagnóstica apoya la vigilancia de patógenos fúngicos y la resistencia emergente a antifúngicos, incluyendo cambios en las especies responsables de infecciones como la candidiasis. Los documentos de guías reflejan cómo los diagnósticos de laboratorio y los datos de sensibilidad informan el manejo a nivel poblacional e individual (Pappas et al., 2016).

History

El diagnóstico micológico dependió durante mucho tiempo de la microscopía y el cultivo lento con identificación morfológica. Los ensayos de antígenos y anticuerpos, y luego los métodos moleculares y proteómicos, ampliaron y aceleraron la detección (Kozel & Wickes, 2014), mientras que las pruebas de sensibilidad a antifúngicos maduraron de ser una herramienta de investigación a un ensayo clínico estandarizado a lo largo de finales del siglo XX y principios del XXI (Rex & Pfaller, 2002).

Seminal works

• kozel-2014
• rex-2002
• pappas-2016

Frequently asked questions

¿Cómo se detectan los hongos cuando el cultivo es lento o negativo?

Los laboratorios utilizan métodos independientes del cultivo —ensayos de antígenos (como el antígeno criptocócico, galactomanano o beta-D-glucano), pruebas de anticuerpos y ensayos moleculares— para detectar hongos que crecen lentamente o no pueden cultivarse a partir de una muestra determinada (Kozel & Wickes, 2014).

¿Qué son las pruebas de sensibilidad a antifúngicos?

Es la medición in vitro de si un agente antifúngico inhibe un aislado fúngico, interpretada en función de los puntos de corte. La estandarización de estas pruebas y su vinculación con los resultados clínicos ha sido un proceso gradual (Rex & Pfaller, 2002).