Técnicas Auxiliares y Métodos Moleculares en Citopatología
Las técnicas auxiliares son los métodos de laboratorio aplicados al material citológico después de que se hayan examinado los frotis teñidos rutinariamente con Papanicolaou y Romanowsky, con el fin de refinar una impresión morfológica, clasificar un tumor o detectar una alteración clínicamente relevante. Estas extienden el alcance de la citología más allá de la morfología por sí sola, permitiendo que muestras pequeñas como aspirados con aguja fina, derrames y preparaciones exfoliativas proporcionen información inmunofenotípica, citogenética y molecular.
Definition
Las técnicas auxiliares en citopatología son estudios de laboratorio complementarios realizados en preparaciones citológicas o material celular residual para suplementar el diagnóstico morfológico, que comprenden métodos inmunofenotípicos, citogenéticos, moleculares y computacionales.
Scope
Esta área orienta al lector sobre los principales métodos complementarios utilizados en muestras citológicas: inmunocitoquímica para marcadores proteicos, hibridación in situ con fluorescencia para cambios cromosómicos y a nivel genético, citometría de flujo para la inmunofenotipificación de suspensiones celulares, pruebas moleculares y de virus del papiloma humano en material citológico, y patología digital con análisis automatizado de imágenes. Es una visión general estructural; cada técnica se trata en detalle en su propio nodo temático.
Sub-topics
Core questions
- ¿Qué método auxiliar es apropiado para una muestra citológica y una pregunta diagnóstica dadas?
- ¿Cómo afectan la preparación y la fijación de la muestra a la validez de los resultados inmunocitoquímicos, de FISH y moleculares?
- ¿Cómo se puede priorizar (triage) el material citológico limitado para que se conserven tanto los estudios morfológicos como los auxiliares?
Key concepts
- Adecuación de la muestra y priorización (triage)
- Preparación de bloques celulares (cell blocks)
- Inmunofenotipificación
- Validación y factores preanalíticos
- Pruebas reflejas y complementarias
- Flujos de trabajo que conservan la muestra
Mechanisms
Las muestras citológicas pueden procesarse como frotis directos, preparaciones de base líquida, citocentrifugados (cytospins) o bloques celulares (cell blocks); la preparación elegida determina qué métodos auxiliares son factibles. La inmunocitoquímica localiza antígenos proteicos con anticuerpos marcados, la hibridación in situ con fluorescencia visualiza secuencias específicas de ADN con sondas fluorescentes, la citometría de flujo mide la expresión de antígenos en células en suspensión, y los ensayos moleculares extraen e interrogan ácidos nucleicos. Dado que el material citológico suele ser escaso, un tema recurrente es la priorización (triage) de la muestra para que puedan realizarse tanto la morfología como uno o más estudios complementarios.
Clinical relevance
Las técnicas auxiliares amplían lo que una muestra citológica puede responder, apoyando la clasificación tumoral, la asignación de linaje y la detección de biomarcadores que se informan junto con la morfología. Como material de referencia, esta área describe cómo se genera dicha información; la selección e interpretación de pruebas específicas son decisiones de laboratorio clínico y no constituyen asesoramiento individualizado aquí.
Evidence & guidelines
Organismos profesionales han emitido marcos de validación y notificación relevantes para estos métodos, incluyendo la guía del Colegio Americano de Patólogos sobre la validación de la imagen de portaobjetos completos (whole slide imaging) para uso diagnóstico (Pantanowitz et al., 2013). La evidencia específica del método, como la secuenciación de próxima generación (next-generation sequencing) realizada directamente en material de aspirado con aguja fina (Qiu et al., 2015), se resume dentro de los nodos temáticos correspondientes.
History
La citopatología comenzó como una disciplina puramente morfológica basada en la tinción de Papanicolaou. Durante las décadas posteriores, la inmunocitoquímica, luego la hibridación in situ y la citometría de flujo, y más recientemente las pruebas moleculares basadas en ácidos nucleicos y el análisis digital de imágenes, se adaptaron de la histopatología y la medicina de laboratorio a las muestras más pequeñas y preparadas de manera diferente que se encuentran en citología.
Related topics
Seminal works
- fetsch-abati-2001
- pantanowitz-2013
Frequently asked questions
- ¿Por qué son especialmente importantes las técnicas auxiliares en citología?
- Las muestras citológicas suelen ser pequeñas y carecen de arquitectura, por lo que los métodos complementarios que añaden información inmunofenotípica o molecular a menudo permiten una clasificación definitiva que la morfología por sí sola no puede proporcionar.
- ¿Qué es un bloque celular (cell block) y por qué es importante para las pruebas auxiliares?
- Un bloque celular (cell block) es una preparación incluida en parafina hecha a partir de material citológico residual; proporciona cortes adecuados para inmunocitoquímica, hibridación in situ y extracción molecular, lo que lo convierte en un facilitador clave de los estudios auxiliares en muestras citológicas.