Direkter und indirekter Antiglobulintest (Coombs-Test)

Der Antiglobulintest, allgemein als Coombs-Test bezeichnet, verwendet ein Antihuman-Globulin-Reagenz, um Immunglobuline oder Komplement nachzuweisen, die an rote Blutkörperchen gebunden sind. Seine direkte Form weist Antikörper nach, die bereits in vivo die roten Blutkörperchen eines Patienten bedecken, während seine indirekte Form Antikörper im Plasma nachweist, die in vitro Reagenzzellen binden; zusammen sind sie zentrale Werkzeuge der Immunhämatologie.

Definition

Der Antiglobulintest (Coombs-Test) weist humane Immunglobuline oder Komplementkomponenten auf roten Blutkörperchen mittels eines Antihuman-Globulin-Reagenzes nach, das beschichtete Zellen zu sichtbaren Agglutinaten vernetzt; der direkte Test untersucht die eigenen roten Blutkörperchen des Patienten, und der indirekte Test untersucht Reagenz-rote Blutkörperchen nach Inkubation mit dem Plasma des Patienten.

Scope

Dieses Thema erläutert das Prinzip der Antiglobulinreaktion und die Unterscheidung zwischen dem direkten Antiglobulintest (DAT) und dem indirekten Antiglobulintest (IAT) sowie deren jeweilige Rolle in der serologischen Aufarbeitung. Es beschreibt die Testmethode und Interpretation konzeptionell und ist kein Protokoll zur Diagnose oder Behandlung spezifischer Patienten.

Core questions

• Wie bewirkt das Antihuman-Globulin-Reagenz, dass Antikörper-beschichtete Zellen agglutinieren?
• Was unterscheidet den direkten vom indirekten Antiglobulintest?
• Was zeigt ein positiver direkter Antiglobulintest an?
• Wie wird der indirekte Antiglobulintest bei der Antikörperdetektion und Kreuzprobe eingesetzt?

Key concepts

• Antihuman-Globulin (AHG)-Reagenz
• Inkomplette (IgG) Antikörper
• Direkter Antiglobulintest (DAT)
• Indirekter Antiglobulintest (IAT)
• In-vivo- versus In-vitro-Sensibilisierung
• Polyspezifische und monospezifische Reagenzien (IgG, C3)
• Agglutination als Ablesewert

Mechanisms

Viele klinisch wichtige Antikörper gegen rote Blutkörperchen sind IgG und agglutinieren Antigen-positive Zellen in Kochsalzlösung nicht direkt, da die Moleküle zu klein sind, um Zellen zu überbrücken, die durch ihre Oberflächenladung abgestoßen werden. Antihuman-Globulin-Reagenz, das gegen humanes IgG und Komplement gerichtet ist, bindet diese Beschichtungsmoleküle und überbrückt benachbarte sensibilisierte Zellen, wodurch eine sichtbare Agglutination entsteht. Im direkten Test werden gewaschene rote Blutkörperchen des Patienten mit Reagenz gemischt, um Antikörper oder Komplement nachzuweisen, die bereits in vivo gebunden sind, wie es bei hämolytischen Transfusionsreaktionen, der hämolytischen Erkrankung des Neugeborenen und der autoimmunhämolytischen Anämie der Fall ist. Im indirekten Test wird Plasma zunächst mit Reagenz-roten Blutkörperchen inkubiert, sodass etwaige Antikörper in vitro binden, dann wird Antiglobulin-Reagenz hinzugefügt; dies ist die Grundlage für Antikörperscreening, -identifizierung und die Antiglobulin-Kreuzprobe.

Clinical relevance

Antiglobulin-Tests unterstützen die Laboruntersuchung von Hämolyse und die sichere Auswahl von Blutkomponenten. Dieser Eintrag beschreibt, wie der Test funktioniert und was positive und negative Ergebnisse prinzipiell anzeigen; die Interpretation jedes einzelnen Ergebnisses gehört in den klinischen und Labor-Kontext und wird hier nicht als Leitlinie behandelt.

Evidence & guidelines

Die Antiglobulin-Technik und ihre Varianten sind in Standardwerken der Immunhämatologie wie dem AABB Technical Manual und Mollison's Blood Transfusion in Clinical Medicine beschrieben, die Methode und Interpretation konsensual festlegen.

History

Coombs, Mourant und Race führten den Antiglobulintest 1945 ein, um schwache und inkomplette Rh-Antikörper nachzuweisen, die bei der gewöhnlichen Kochsalz-Agglutination übersehen wurden. Die Technik revolutionierte die Immunhämatologie, indem sie die IgG-Sensibilisierung sichtbar machte, und sie bildet weiterhin die Grundlage für Antikörperscreening, -identifizierung, Kreuzproben und die Untersuchung von Immunhämolyse.

Key figures

• Robert Coombs
• Arthur Mourant
• Robert Race

Seminal works

• coombs-1945
• mollison-2014
• daniels-2013

Frequently asked questions

Was ist der Unterschied zwischen dem direkten und indirekten Coombs-Test?

Der direkte Test weist Antikörper oder Komplement nach, die bereits im Körper an die roten Blutkörperchen eines Patienten gebunden sind; der indirekte Test weist Antikörper im Plasma nach, indem er sie im Reagenzglas an Reagenz-rote Blutkörperchen bindet, bevor Antiglobulin-Reagenz hinzugefügt wird.

Was kann einen positiven direkten Antiglobulintest verursachen?

Ein positiver direkter Antiglobulintest zeigt an, dass rote Blutkörperchen mit Immunglobulin oder Komplement beschichtet sind, was unter anderem bei autoimmunhämolytischer Anämie, hämolytischer Erkrankung des Neugeborenen und hämolytischen Transfusionsreaktionen auftreten kann.