Ergänzende Techniken und molekulare Methoden in der Zytopathologie
Ergänzende Techniken sind Labormethoden, die auf zytologisches Material angewendet werden, nachdem die routinemäßigen Papanicolaou- und Romanowsky-gefärbten Ausstriche untersucht wurden, um einen morphologischen Eindruck zu verfeinern, einen Tumor zu klassifizieren oder eine klinisch relevante Veränderung zu erkennen. Sie erweitern die Reichweite der Zytologie über die reine Morphologie hinaus und ermöglichen es, aus kleinen Proben wie Feinnadelaspiraten, Ergüssen und exfoliativen Präparaten immunphänotypische, zytogenetische und molekulare Informationen zu gewinnen.
Definition
Ergänzende Techniken in der Zytopathologie sind zusätzliche Laboruntersuchungen, die an zytologischen Präparaten oder Restzellmaterial durchgeführt werden, um die morphologische Diagnose zu ergänzen, und umfassen immunphänotypische, zytogenetische, molekulare und computergestützte Methoden.
Scope
Dieser Bereich führt den Leser in die wichtigsten ergänzenden Methoden ein, die bei zytologischen Proben angewendet werden: Immunzytochemie für Proteinmarker, Fluoreszenz-in-situ-Hybridisierung für chromosomale und genbezogene Veränderungen, Durchflusszytometrie zur Immunphänotypisierung von Zellsuspensionen, molekulare und humane Papillomvirus-Tests an zytologischem Material sowie digitale Pathologie mit automatischer Bildanalyse. Es handelt sich um eine strukturelle Übersicht; jede Technik wird in einem eigenen Themenknoten detailliert behandelt.
Sub-topics
Core questions
- Welche ergänzende Methode ist für eine gegebene zytologische Probe und diagnostische Fragestellung geeignet?
- Wie beeinflussen Probenpräparation und Fixierung die Validität immunzytochemischer, FISH- und molekularer Ergebnisse?
- Wie kann begrenztes zytologisches Material triagiert werden, sodass morphologische und ergänzende Studien gleichermaßen erhalten bleiben?
Key concepts
- Probenadäquanz und Triage
- Zellblockpräparation
- Immunphänotypisierung
- Validierung und präanalytische Faktoren
- Reflex- und ergänzende Tests
- Proben-sparende Arbeitsabläufe
Mechanisms
Zytologische Proben können als Direktausstrich, Flüssigpräparat, Zytozentrifugenpräparat oder Zellblock verarbeitet werden; die gewählte Präparation bestimmt, welche ergänzenden Methoden durchführbar sind. Die Immunzytochemie lokalisiert Proteinantigene mit markierten Antikörpern, die Fluoreszenz-in-situ-Hybridisierung visualisiert spezifische DNA-Sequenzen mit fluoreszierenden Sonden, die Durchflusszytometrie misst die Antigenexpression auf Zellen in Suspension, und molekulare Assays extrahieren und untersuchen Nukleinsäuren. Da zytologisches Material oft knapp ist, ist ein wiederkehrendes Thema die Triage der Probe, sodass Morphologie und eine oder mehrere ergänzende Studien durchgeführt werden können.
Clinical relevance
Ergänzende Techniken erweitern die Aussagekraft einer zytologischen Probe und unterstützen die Tumorklassifikation, die Linienzuordnung und den Nachweis von Biomarkern, die zusammen mit der Morphologie berichtet werden. Als Referenzmaterial beschreibt dieser Bereich, wie solche Informationen generiert werden; die spezifische Testauswahl und -interpretation sind Entscheidungen des klinischen Labors und stellen hier keine individuelle Beratung dar.
Evidence & guidelines
Fachgesellschaften haben Validierungs- und Berichtsrahmen für diese Methoden herausgegeben, einschließlich der Leitlinie des College of American Pathologists zur Validierung der Ganzgläschen-Bildgebung für diagnostische Zwecke (Pantanowitz et al., 2013). Methodenspezifische Evidenz, wie die direkt an Feinnadelaspiratmaterial durchgeführte Next-Generation-Sequenzierung (Qiu et al., 2015), wird in den entsprechenden Themenknoten zusammengefasst.
History
Die Zytopathologie begann als rein morphologische Disziplin, die auf der Papanicolaou-Färbung basierte. In den folgenden Jahrzehnten wurden Immunzytochemie, dann In-situ-Hybridisierung und Durchflusszytometrie und zuletzt nukleinsäurebasierte molekulare Tests und digitale Bildanalyse aus der Histopathologie und Labormedizin an die kleineren, anders präparierten Proben der Zytologie angepasst.
Related topics
Seminal works
- fetsch-abati-2001
- pantanowitz-2013
Frequently asked questions
- Warum sind ergänzende Techniken in der Zytologie besonders wichtig?
- Zytologische Proben sind häufig klein und weisen keine Architektur auf, sodass ergänzende Methoden, die immunphänotypische oder molekulare Informationen hinzufügen, oft eine definitive Klassifikation ermöglichen, die die Morphologie allein nicht bieten kann.
- Was ist ein Zellblock und warum ist er für ergänzende Tests wichtig?
- Ein Zellblock ist ein in Paraffin eingebettetes Präparat, das aus restlichem zytologischem Material hergestellt wird; er liefert Schnitte, die für Immunzytochemie, In-situ-Hybridisierung und molekulare Extraktion geeignet sind, was ihn zu einem wichtigen Ermöglicher ergänzender Studien an zytologischen Proben macht.