检测验证与性能评估

检测验证与性能评估是一项工作体系，旨在证明分子检测能够重现性地测量其声称的目标，并支持其预期的临床用途。它将分析验证（检测方法是否正确测量分析物？）与临床验证（结果是否反映临床状态？）区分开来，并通过准确性、精密度、灵敏度、特异性以及检测限等指标量化其性能。

Definition

检测验证是通过系统实验证明实验室检测准确、可重现且适用于其预期临床目的的记录过程；性能评估是对这些特征进行持续测量和验证。

Scope

本条目涵盖了在临床使用前建立和记录分子检测性能以及之后进行验证所使用的概念和指标：分析有效性与临床有效性、标准性能特征，以及针对高复杂性检测及其生物信息学流程的特殊考量。这是一个方法学主题，不提供诊断或治疗患者的指导。

Core questions

• 分析有效性与临床有效性之间有何区别？
• 分子检测必须建立哪些性能特征？
• 如何确定检测限和定量限？
• 测序和生物信息学流程如何验证，而不仅仅是湿实验检测？

Key concepts

• 分析有效性
• 临床有效性
• 准确度和真实性
• 精密度（重复性和再现性）
• 分析灵敏度和检测限
• 分析特异性
• 可报告和可测量范围
• 生物信息学流程验证
• 预期用途适用性

Mechanisms

验证通过使用已表征样本的精心设计实验进行。准确性通过与参考方法或已知样本进行比较来评估；精密度通过在重复性和再现性条件下重复测量来评估；分析灵敏度通过确定检测限来评估；分析特异性通过测试干扰和交叉反应性来评估（Jennings et al., 2009）。定量分子检测可以使用与其他测量物相同的临床化学框架进行验证，如液滴数字PCR液体活检检测所示（Milosevic et al., 2018）。对于下一代测序，调用和过滤变异的计算流程必须与实验室步骤一起进行验证（Roy et al., 2018）。临床有效性与这些不同，它关注结果对临床状况的分类效果。

Clinical relevance

分子检测结果在患者护理中是否值得信赖，取决于其背后的验证和性能工作；未经记录或性能特征薄弱会损害解释。本条目解释了实验室如何建立这种信任，而不是特定检测的订购或操作指南。

Evidence & guidelines

验证实践已在专业指南中编纂，包括AMP/CAP分子病理学检测和测序流程验证原则（Jennings et al., 2009; Roy et al., 2018）以及CLSI共识文件（CLSI EP28）。这些指南提供了实验室在认证下遵循的实验设计和接受标准。

History

随着临床分子检测的扩展，专业组织将已建立的临床化学和实验室医学验证原则应用于分子检测，然后将其扩展到大规模并行测序及其生物信息学，从而产生了当今使用的分层验证标准（Jennings et al., 2009; Roy et al., 2018）。

Debates

验证应如何扩展到高复杂性、多靶点检测？

为广泛测序面板可检测的每个可能变异建立性能是不切实际的，因此指南依赖于代表性验证和流程验证；多少才足够仍然是一个活跃的讨论。

Seminal works

• jennings-2009
• roy-2018

Frequently asked questions

分析有效性与临床有效性有何区别？

分析有效性是指检测方法是否准确且可重现地测量分析物；临床有效性是指结果是否实际对应于该检测旨在检测的临床状况。

为什么下一代测序需要流程验证？

因为报告的变异取决于比对读段和调用变异的软件，生物信息学流程可能会引入错误，因此必须与实验室程序一起进行验证。