抗菌药物敏感性试验方法

抗菌药物敏感性试验（AST）是一套标准化的实验室方法，用于确定微生物是否被抗菌药物抑制或杀死，以及所需的浓度。其结果，通常是最小抑菌浓度（MIC）或抑菌圈直径，会根据已发布的折点进行解读，以将微生物分类为敏感、中介或耐药。

Definition

抗菌药物敏感性试验是对微生物体外（in vitro）对抗菌药物反应的标准化测量，以MIC或抑菌圈直径表示，并根据折点进行解读，以确定敏感、中介或耐药类别。

Scope

本条目涵盖了主要的AST方法、它们测量的量以及结果的解读方式。它涉及稀释法（微量肉汤稀释法、琼脂稀释法）、扩散法（纸片扩散法、梯度扩散法）和自动化系统，以及CLSI和EUCAST的折点系统。本文侧重于方法学，不提供剂量或治疗建议。

Core questions

• 何种浓度的抗菌药物能抑制该微生物的生长？
• 稀释法和扩散法在测量内容和读取方式上有何不同？
• 测得的MIC或抑菌圈直径如何转化为临床类别？

Key concepts

• 最小抑菌浓度（MIC）
• 微量肉汤稀释法（参考方法）
• 琼脂稀释法
• 纸片扩散法（Kirby-Bauer）
• 梯度扩散法（MIC梯度扩散条）
• 抑菌圈直径
• 临床折点（CLSI, EUCAST）
• 敏感-中介-耐药类别
• 质量控制菌株和标准化接种物

Mechanisms

AST方法遵循共同的逻辑：在受控条件下，将标准化的微生物接种物暴露于确定浓度的抗菌药物中，并读取生长抑制情况。稀释法（微量肉汤稀释法，被视为参考方法，以及琼脂稀释法）确定抑制可见生长的最低浓度，即MIC。扩散法将药物置于琼脂中，使其扩散形成浓度梯度：纸片扩散法读取抑菌圈的直径，而梯度扩散法通过抑菌椭圆与校准刻度线的交点读取MIC。自动化商业系统通过微型肉汤稀释和光学或浊度生长检测生成MIC。结果根据CLSI或EUCAST的折点进行解读，专家规则会交叉检查结果，以确保与已知耐药表型的一致性（jorgensen-2009; leclercq-2013; clsi-m100; eucast-breakpoints）。

Clinical relevance

敏感性结果为感染性疾病管理、抗菌药物管理和监测提供信息，并用于实验室报告的累积药敏谱。本条目解释了这些结果是如何产生和解读的，作为参考资料；它不是个体诊断或处方决策的来源。

Epidemiology

由于AST是标准化的，结果在不同实验室和不同时间之间具有可比性，从而能够汇总到地方药敏谱以及国家和国际耐药性监测中。方法选择、折点版本和质量控制都会影响这些数据的可比性（clsi-m100; eucast-breakpoints）。

History

敏感性试验是在抗生素引入后的几十年中发展起来的。纸片扩散法于20世纪60年代标准化，并因其简便性而得到广泛应用，而肉汤和琼脂稀释法则提供了定量的MIC。随着时间的推移，标准机构，特别是美国的CLSI和欧洲的EUCAST，规范了方法、折点和质量控制，自动化系统和梯度扩散条扩大了常规实践（jorgensen-2009）。

Debates

CLSI和EUCAST折点之间的差异

CLSI和EUCAST使用相关但不同的流程设定折点，它们的分类和中介类别的定义可能存在差异；协调和解读不一致的结果是持续存在的方法学问题。

折点附近的重现性

测得的MIC本身具有内在变异性，因此接近折点结果在不同重复或方法之间可能被归类不同，这使得对临界微生物的解读复杂化。

Seminal works

• jorgensen-2009
• leclercq-2013
• clsi-m100

Frequently asked questions

什么是最小抑菌浓度（MIC）？

MIC是在标准化条件下，阻止微生物可见生长的最低抗菌药物浓度；它是稀释法旨在确定的定量结果。

为什么有不同的AST方法？

稀释法提供数值MIC，纸片扩散法等扩散法简单且经济，自动化系统则提供速度和通量；实验室根据微生物、测试药物和可用资源进行选择。

敏感、中介和耐药意味着什么？

它们是通过将测得的MIC或抑菌圈直径与标准机构设定的折点进行比较而分配的解释性类别；它们总结了微生物在通常条件下对药物产生反应的可能性，并从方法学上而非作为治疗建议进行定义。