显微镜检查和形态学鉴定
显微镜检查是诊断寄生虫学的经典基础:经过培训的观察者检查染色或浓缩的样本,并通过寄生虫的虫卵、包囊、幼虫、滋养体或成虫阶段的形态来鉴定寄生虫。尽管抗原和分子检测技术不断兴起,但显微镜形态学鉴定对于许多肠道和血液寄生虫来说仍然是一种参考方法,因为它成本低廉、直观可见,并且可以同时鉴定物种和评估感染强度。
Definition
显微镜检查和形态学鉴定是指通过湿制剂、浓缩样本、永久染色涂片和血膜的光学显微镜检查,根据寄生虫的结构特征,在临床样本中目视检测并进行物种或阶段水平的寄生虫鉴定。
Scope
本主题涵盖用于检测和鉴定寄生虫的主要显微镜方法:直接湿涂片、粪便浓缩、永久染色涂片以及用于血液寄生虫的血膜,以及用于将生物体归类到物种和阶段的形态学标准。它讨论了显微镜作为证据的优点和局限性,不提供临床检测方案或治疗指导。
Core questions
- 哪些形态特征可以将一种寄生虫物种或阶段与相似物区分开来?
- 浓缩和永久染色如何提高低密度感染的检测率?
- 间歇性排出何时需要重复采样才能获得可靠结果?
- 对于特定生物体,显微镜检查相对于抗原和分子方法的敏感性如何?
Key concepts
- 直接湿涂片检查
- 粪便浓缩(例如,福尔马林-乙酸乙酯沉淀法)
- 永久染色涂片(例如,三色染色)
- 用于血液寄生虫的厚血膜和薄血膜
- 虫卵、包囊、幼虫、滋养体和成虫形态
- 观察者技能和读者间差异
- 间歇性排出和重复样本的必要性
Mechanisms
检测依赖于使寄生虫可见且可区分。湿涂片可实现快速筛查和观察运动;浓缩技术可使虫卵和包囊从粪便碎屑中沉淀或漂浮出来,以提高灵敏度;如三色染色等永久染色可固定并对比内部结构,从而区分原生动物物种。对于血液寄生虫,厚血膜用于筛查低寄生虫血症,而薄血膜则保留形态以进行物种鉴定。由于包囊、虫卵和微丝蚴的排出可能是间歇性的且密度依赖的,因此通过样本浓缩和检查在不同日期收集的多个样本可以提高灵敏度。
Clinical relevance
通过显微镜进行的形态学鉴定支持许多寄生虫感染的确认,并且仍然是实验室医学中的一项关键能力,尤其是在它能够同时鉴定物种和评估感染强度的情况下。本条目描述了该方法及其作为证据来源的局限性,不能替代实验室标准操作程序或临床判断。
Epidemiology
显微镜检查是许多人群水平寄生虫学的基础,但荟萃分析工作表明其对土源性蠕虫的敏感性并不完美,并且在低感染强度下会下降,这促使人们将其与分子和基于抗原的替代方法进行正式比较,并使用不假设任何单一检测是完美金标准的统计模型。
History
从19世纪起,显微镜鉴定就定义了寄生虫学,随着原生动物和蠕虫的形态和生命周期逐渐被描述。20世纪70年代早期通过厚涂片方法对粪便进行标准化定量,以及浓缩和染色程序的规范化,使显微镜检查成为一种可重复的诊断学科,并一直沿用至今。
Debates
- 鉴于其可变的敏感性,显微镜检查是否应继续作为参考标准?
- 显微镜检查依赖于操作者,可能会漏诊低强度感染,因此其作为新检测方法判断标准的长期作用受到质疑;在没有真正金标准的情况下,荟萃分析表明其敏感性应被估计而非假定为完美。
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Seminal works
- garcia-2018
- katz-1972
- ndao-2009
Frequently asked questions
- 为什么通常要检查多个粪便样本?
- 许多肠道原生动物和蠕虫会间歇性排出包囊、虫卵或幼虫,因此单个样本可能会漏诊感染;检查在不同日期收集的多个样本可以提高检测几率。
- 厚血膜和薄血膜有什么区别?
- 厚血膜浓缩血液以筛查低密度寄生虫(如疟疾),但会扭曲形态;而薄血膜则保留寄生虫和红细胞的形态,以便进行物种鉴定。