Numune Toplama ve Hazırlama
Numune toplama ve hazırlama, sitopatolojinin pre-analitik temelini oluşturmaktadır: Bu, hücresel materyalin vücuttan alındığı ve bireysel hücrelerin mikroskop altında incelenebilmesi için bir lam üzerine yerleştirildiği teknikler bütünüdür. Sitopatolojik tanı, sağlam doku mimarisinden ziyade hücrelerin ve küçük hücre gruplarının morfolojisine dayandığından, bir numunenin toplanma, aktarılma, fikse edilme ve boyanma şekli, güvenilir bir tanının mümkün olup olmadığını büyük ölçüde belirlemektedir.
Tanım
Numune toplama ve hazırlama, klinik sitolojik bir numuneyi morfolojik yorumlama için uygun bir mikroskop lamına dönüştüren sitopreparasyon adımlarını (örnekleme, lam veya fiksatif ortama aktarma, fiksasyon ve boyama) içermektedir.
Kapsam
Bu alan, okuyucuyu sitolojide kullanılan başlıca hazırlık yöntemlerine yönlendirmektedir: doğrudan konvansiyonel yaymalar, sıvı bazlı işlemeler, fiksasyon stratejileri ve iki büyük boyama geleneği (alkol ile fikse edilmiş Papanicolaou boyası ve havada kurutulmuş Romanowsky boyaları). Bu yöntemler, numune yeterliliğini ve yorumlanabilirliğini şekillendiren laboratuvar metotları olarak ele alınmaktadır; bu bir prosedür el kitabı değildir ve hastaya özgü talimatlar içermemektedir.
Alt konular
Anahtar kavramlar
- Sitolojinin pre-analitik fazı
- Numune yeterliliği ve hücresellik
- Konvansiyonel yayma ve sıvı bazlı işleme karşılaştırması
- Islak fiksasyon ve havada kurutma karşılaştırması
- Papanicolaou boyası ve Romanowsky boyaları
- Fiksasyon, şeffaflık ve nükleer detay
- Kuruma artefaktı
Mekanizmalar
Sitolojik bir numune, sıvı içinde süspanse edilmiş veya bir aletle kazınmış hücreler olarak başlamaktadır. Konvansiyonel hazırlıkta materyal doğrudan bir cam lam üzerine yayılmakta ve Papanicolaou boyası için hemen fikse edilmekte (ıslak fiksasyon) veya Romanowsky boyası için havada kurumaya bırakılmaktadır. Sıvı bazlı sitolojide ise numune koruyucu bir sıvıya durulanmakta ve bir cihaz, lam üzerine ince, düzgün bir hücre tek tabakası (monolayer) yerleştirerek kan, mukus ve üst üste binme gibi engelleyici faktörleri azaltmaktadır (Arbyn 2008). Fiksasyon, hücresel proteinleri stabilize etmekte ve nükleer kromatin detayını korumaktadır; boyama adımı ise çekirdeklerin, sitoplazmanın ve arka planın okunmasını sağlayan renk ve kontrastı kazandırmaktadır. Hazırlık ve boya seçimi, tanısal soruya göre yapılmaktadır — Papanicolaou boyası epitel hücrelerinde nükleer ve kromatin detayını öne çıkarırken, havada kurutulmuş Romanowsky boyaları aspirasyon sitolojisinde faydalı olan sitoplazmik ve stromal özellikleri vurgulamaktadır (Papanicolaou 1942; Koss & Melamed 2006).
Klinik önem
Sitolojik bir numunenin yeterliliği ve kalitesi, tanısal doğruluğun üst sınırını belirlemektedir; bu nedenle numune hazırlığı, sitolojinin tarama ve tanıya katkısında ayrılmaz bir parçadır. Bu alan, güvenilir sitolojik materyalin nasıl üretildiğini açıklamakta ve laboratuvar pratiğini anlamak için bir arka plan sağlamayı amaçlamaktadır; bireysel klinik kararlar için bir temel oluşturmamaktadır.
Kanıt ve kılavuzlar
Hazırlık yöntemlerine ilişkin karşılaştırmalı kanıtlar en çok servikal taramada geliştirilmiştir; burada yapılan sistematik derlemeler, sıvı bazlı ve konvansiyonel sitolojinin genel olarak benzer doğruluğa sahip olduğunu, ancak sıvı bazlı işlemenin yetersiz numuneleri azalttığını göstermiştir (Arbyn 2008; Siebers 2012, sıvı bazlı sitoloji maddesinde belirtilmiştir). Bethesda Sistemi gibi raporlama çerçeveleri, doğrudan hazırlık kalitesine bağlı olan açık numune yeterliliği kriterlerini içermektedir (Solomon 2002, ilgili konu başlıklarında belirtilmiştir).
Tarihçe
Modern sitopreparasyon, George Papanicolaou'nun yirminci yüzyılın başlarında fikse edilmiş yaymalar için geliştirdiği çok renkli bir boyadan doğmuştur ve bu, popülasyon ölçeğinde servikal taramayı mümkün kılmıştır. Doğrudan yayma ve alkol fiksasyonu onlarca yıl pratiğe hakim olmuştur; 1990'lardan itibaren sıvı bazlı yöntemler standartlaştırılmış tek tabaka (monolayer) hazırlığını tanıtmış ve alan, moleküler ve yardımcı testleri artık numune materyali üzerine entegre etmeye devam etmektedir (Koss & Melamed 2006; Bibbo & Wilbur 2014).
Öne çıkan isimler
- George Papanicolaou
- Leopold Koss
İlgili konular
Temel eserler
- papanicolaou-1942
- arbyn-2008
- koss-melamed-2006
Sıkça sorulan sorular
- Sitolojide numune toplama ve numune hazırlama arasındaki fark nedir?
- Toplama, hücresel numunenin hastadan alınmasıdır; hazırlama ise bu numuneyi okunabilir bir mikroskop lamına dönüştüren laboratuvar işlemidir (lam veya sıvıya aktarma, fiksasyon ve boyama). Her ikisi de numune kalitesini yöneten pre-analitik fazın bir parçasıdır.
- Sitoloji numunesi neden boyamadan önce fikse edilmeli veya havada kurutulmalıdır?
- Fiksasyon veya kontrollü havada kurutma, hücresel yapıyı korur ve hücreleri boyayı tekrarlanabilir bir şekilde alacak şekilde hazırlar. Islak fiksasyon, Papanicolaou boyası gibi nükleer detay boyalarını desteklerken, kasıtlı havada kurutma Romanowsky boyaları için hazırlık adımıdır.