Lösemide Sitokimya ve Akış Sitometrisi
Sitokimya ve akış sitometrisi, bir lösemi tanısını morfolojik bir izlenimden tanımlanmış bir soya ve immünofenotipe dönüştüren laboratuvar teknikleridir. Sitokimyasal boyamalar lösemik hücrelerin enzimatik ve metabolik özelliklerini ortaya koyarken, çok parametreli akış sitometrisi aynı anda birçok yüzey ve hücre içi belirteci ölçerek soy tayini yapmakta ve ölçülebilir rezidüel hastalığı tespit etmektedir.
Tanım
Sitokimya ve akış sitometrisi, lösemik hücreleri karakterize etmek için kullanılan laboratuvar yöntemleridir: sitokimya, enzimatik veya biyokimyasal özellikleri (örneğin miyeloperoksidaz aktivitesi) ortaya koyan boyamaları kullanırken, çok parametreli akış sitometrisi, soy tayini yapmak, immünofenotipi tanımlamak ve rezidüel hastalığı nicelendirmek için hücre başına birden fazla yüzey ve hücre içi antijeni ölçmektedir.
Kapsam
Bu konu, lösemik hücreleri morfolojinin ötesinde karakterize etmek için kullanılan yöntemleri kapsamaktadır: miyeloperoksidaz gibi klasik sitokimyasal boyamalar ve standart antikor panelleri ile ölçülebilir (minimal) rezidüel hastalık tespitini içeren modern çok parametreli akış sitometrik immünofenotipleme. Bu metin, laboratuvar metodolojisi üzerine bir referans materyal olup, bir klinik protokol değildir.
Anahtar kavramlar
- Miyeloperoksidaz ve diğer sitokimyasal boyamalar
- İmmünofenotiple soy tayini
- Çok parametreli (çok renkli) akış sitometrisi
- Standart antikor panelleri
- Anormal antijen ekspresyonu
- Geçitlenme (gating) ve popülasyon analizi
- Ölçülebilir (minimal) rezidüel hastalık tespiti
Mekanizmalar
Sitokimyasal boyamalar, hücreye özgü enzimleri ve bileşenleri kullanmaktadır: örneğin, miyeloperoksidaz aktivitesi miyeloid soyu işaretlemekte ve boyanmış bir yaymada akut miyeloid lösemiyi akut lenfoblastik lösemiden ayırmaya yardımcı olmaktadır. Akış sitometrisi, hücreleri lazerlerin önünden geçen bir akış içinde süspanse etmekte ve antikora bağlı belirteçlerden gelen ışık saçılımını ve floresansı kaydetmekte, böylece her hücrede birçok antijenin ölçülmesine olanak tanımaktadır; karakteristik ve anormal antijen kombinasyonları soyu tanımlamakta ve lösemik popülasyonu belirlemektedir. Aynı yaklaşım, standart panellerle yüksek hassasiyette uygulandığında, tedavi sonrası kalan küçük rezidüel lösemik popülasyonları ölçülebilir rezidüel hastalık olarak tespit etmektedir (van Dongen ve ark., 2012; Schuurhuis ve ark., 2018).
Klinik önem
Bu teknikler, modern lösemi sınıflandırmasının dayandığı soy tayini ve immünofenotiplemenin temelini oluşturmaktadır ve akış sitometrik ölçülebilir rezidüel hastalık değerlendirmesi literatürde önemli bir yanıt belirteci haline gelmiştir. Bu madde, yöntemleri referans düzeyinde tanımlamakta olup, bireysel bir hastanın sonuçlarını yorumlamak için bir rehber niteliği taşımamaktadır.
Kanıt ve kılavuzlar
EuroFlow antikor panelleri gibi standardizasyon çabaları, tekrarlanabilir akış sitometrik immünofenotiplemeyi tanımlamakta ve Avrupa Lösemi Ağı MRD Çalışma Grubu, akut miyeloid lösemide ölçülebilir rezidüel hastalık değerlendirmesi için konsensüs kriterleri sunmaktadır; soy kriterleri ayrıca DSÖ sınıflandırmasına da dahil edilmiştir (van Dongen ve ark., 2012; Schuurhuis ve ark., 2018; Arber ve ark., 2016).
Tarihçe
Sitokimyasal boyama, akut löseminin morfolojik tanısını iyileştirmenin ve soy tayini yapmanın orijinal aracıydı. Akış sitometrik immünofenotipleme daha sonra hücre başına birçok antijeni ölçerek soy tayini için sitokimyanın yerini büyük ölçüde almıştır ve standardizasyon girişimleri ile ölçülebilir rezidüel hastalık konsensüs belgeleri daha sonra rolünü tekrarlanabilir, yüksek hassasiyetli değerlendirmeye genişletmiştir (van Dongen ve ark., 2012; Schuurhuis ve ark., 2018).
İlgili konular
Temel eserler
- van-dongen-2012
- schuurhuis-2018
Sıkça sorulan sorular
- Akut lösemide miyeloperoksidaz boyaması neden faydalıdır?
- Miyeloperoksidaz, miyeloid soyun bir belirtecidir; bu nedenle, sitokimyasal bir boyamada varlığı akut miyeloid lösemi tanısını desteklemekte ve onu akut lenfoblastik lösemiden ayırmaya yardımcı olmaktadır.
- Akış sitometrisi ile ölçülebilir rezidüel hastalık tespiti nedir?
- Bu, tedavi sonrası rutin morfolojide görülebilen seviyenin altında kalan küçük lösemik hücre popülasyonlarını bir yanıt belirteci olarak tespit etmek için yüksek hassasiyetli çok parametreli akış sitometrisinin kullanılmasıdır.