การรู้จำสิ่งแปลกปลอมและการประเมินคุณภาพ

สิ่งแปลกปลอม (artifact) คือลักษณะที่ปรากฏบนสไลด์ซึ่งเกิดจากกระบวนการเตรียมชิ้นเนื้อ ไม่ใช่จากเนื้อเยื่อเอง การรู้จำสิ่งแปลกปลอมและการประเมินคุณภาพโดยรวมของการเตรียมชิ้นเนื้อเป็นสิ่งจำเป็น เพื่อไม่ให้ความผิดพลาดของกระบวนการถูกเข้าใจผิดว่าเป็นผลการค้นพบที่แท้จริง และเพื่อให้ห้องปฏิบัติการสามารถติดตามและปรับปรุงวิธีการของตนได้

Definition

สิ่งแปลกปลอมทางจุลพยาธิวิทยา (artifact in histology) คือโครงสร้างหรือลักษณะที่ปรากฏในการเตรียมเนื้อเยื่อซึ่งไม่ได้เป็นตัวแทนของเนื้อเยื่อดั้งเดิม แต่เกิดจากการเก็บ, การตรึง, การเตรียม, การตัด, การย้อมสี, หรือการปิดสไลด์; การประเมินคุณภาพคือการประเมินและควบคุมคุณภาพของการเตรียมชิ้นเนื้ออย่างเป็นระบบเพื่อตรวจจับและลดสิ่งแปลกปลอมดังกล่าว

Scope

หัวข้อนี้ครอบคลุมประเภททั่วไปของสิ่งแปลกปลอมทางจุลพยาธิวิทยาที่เกิดขึ้นในแต่ละขั้นตอนของกระบวนการทำงาน (การตรึง, การเตรียม, การตัด, การย้อมสี, การปิดสไลด์), หลักการในการแยกแยะสิ่งแปลกปลอมออกจากโครงสร้างที่แท้จริง, และบทบาทของการควบคุมและการตรวจสอบความถูกต้องในการประกันคุณภาพ เนื้อหานี้เป็นข้อมูลอ้างอิงทางระเบียบวิธีวิจัยและไม่ได้ให้คำแนะนำในการตีความทางคลินิก

Core questions

• จะแยกแยะสิ่งแปลกปลอมจากการเตรียมชิ้นเนื้อออกจากลักษณะเนื้อเยื่อที่แท้จริงได้อย่างไร?
• สิ่งแปลกปลอมหลักเกิดขึ้นในขั้นตอนใดของกระบวนการทำงาน?
• การควบคุมและการตรวจสอบความถูกต้องสนับสนุนการตีความที่น่าเชื่อถือได้อย่างไร?
• ห้องปฏิบัติการติดตามและรักษาคุณภาพของการเตรียมชิ้นเนื้อได้อย่างไร?

Key concepts

• สิ่งแปลกปลอมจากการตรึง (เช่น การหดตัว, เม็ดสี)
• สิ่งแปลกปลอมจากการเตรียมและการฝัง
• สิ่งแปลกปลอมจากการตัด (รอยพับ, chatter, รอยมีด)
• สิ่งแปลกปลอมจากการย้อมสีและการปิดสไลด์
• การแยกแยะสิ่งแปลกปลอมออกจากโครงสร้างที่แท้จริง
• การควบคุมเชิงบวกและเชิงลบ
• การประกันคุณภาพและการตรวจสอบความถูกต้องของการทดสอบ

Mechanisms

สิ่งแปลกปลอมสามารถเกิดขึ้นได้ในทุกขั้นตอนของกระบวนการทำงาน และการรู้จำสิ่งแปลกปลอมขึ้นอยู่กับการทราบว่าแต่ละขั้นตอนอาจเกิดความผิดพลาดได้อย่างไร การตรึงที่ล่าช้าหรือไม่เพียงพอจะทำให้เกิดการสลายตัวของเซลล์ (autolysis) และอาจทิ้งเม็ดสีหรือทำให้เกิดการหดตัว; การเตรียมที่รุนแรงอาจทำให้เนื้อเยื่อแข็งเกินไปหรือบิดเบี้ยว; การตัดด้วยไมโครโตมอาจทำให้เกิดรอยพับ, รอยฉีกขาด, การบีบอัด (chatter), หรือรอยมีด; และการย้อมสีหรือการปิดสไลด์อาจทิ้งตะกอน, ฟองอากาศ, หรือสีที่ไม่สม่ำเสมอ เนื่องจากลักษณะเหล่านี้เกิดจากกระบวนการมากกว่าเนื้อเยื่อ จึงมักมีรูปแบบทางเรขาคณิตหรือการกระจายตัวที่บ่งบอก — เช่น เป็นระเบียบ, ทั่วทั้งชิ้น, หรืออยู่ตามขอบ — ซึ่งบ่งชี้ว่าไม่ใช่สิ่งมีชีวิต การประเมินคุณภาพช่วยป้องกันการตีความผิดพลาดโดยการกำหนดมาตรฐานขั้นตอนและโดยการใช้การควบคุม: โดยเฉพาะอย่างยิ่งการควบคุมเชิงบวกและเชิงลบมีความสำคัญต่อการตีความการทดสอบที่ใช้แอนติบอดี และแนะนำให้มีการตรวจสอบความถูกต้องเชิงวิเคราะห์อย่างเป็นทางการสำหรับการทดสอบดังกล่าว (Fitzgibbons et al., 2014) คำแนะนำแนวปฏิบัติที่ดีทั่วไปสำหรับการรู้จำและป้องกันสิ่งแปลกปลอมได้ถูกรวบรวมไว้ในเอกสารอ้างอิงทางจุลพยาธิวิทยา (Suvarna et al., 2018; Kiernan, 2015; Rolls, 2012)

Clinical relevance

การแยกแยะสิ่งแปลกปลอมออกจากผลการค้นพบที่แท้จริงและการรักษาคุณภาพของการเตรียมชิ้นเนื้อเป็นสิ่งจำเป็นสำหรับการตีความที่น่าเชื่อถือโดยอาศัยเนื้อเยื่อทั้งในการวินิจฉัยและการวิจัย ข้อมูลนี้อธิบายถึงมาตรการป้องกันทางระเบียบวิธีวิจัยเหล่านี้ในเชิงแนวคิด; เป็นแนวทางอ้างอิงและไม่ใช่พื้นฐานสำหรับการตัดสินใจในการวินิจฉัยหรือการรักษาเฉพาะบุคคล

Evidence & guidelines

การประกันคุณภาพสำหรับการทดสอบที่อาศัยเนื้อเยื่อได้รับการสนับสนุนจากคำแนะนำทางวิชาชีพ เช่น แนวทางของ College of American Pathologists เกี่ยวกับการตรวจสอบความถูกต้องเชิงวิเคราะห์ของการทดสอบทางอิมมูโนฮิสโตเคมี (Fitzgibbons et al., 2014) และแนวทางปฏิบัติที่ดีในการป้องกันและรู้จำสิ่งแปลกปลอมได้ถูกรวบรวมไว้ในเอกสารอ้างอิงทางจุลพยาธิวิทยา (Suvarna et al., 2018; Kiernan, 2015; Rolls, 2012)

History

เมื่อวิธีการย้อมสีและการเตรียมชิ้นเนื้อมีจำนวนเพิ่มขึ้นตลอดศตวรรษที่ยี่สิบ การแยกแยะโครงสร้างที่แท้จริงออกจากลักษณะที่เกิดจากการเตรียมชิ้นเนื้อกลายเป็นทักษะที่ได้รับการยอมรับ ซึ่งมีการบันทึกไว้ในคู่มือจุลพยาธิวิทยา การเน้นย้ำในภายหลังเกี่ยวกับการกำหนดมาตรฐาน, การควบคุม, และการตรวจสอบความถูกต้องอย่างเป็นทางการ — ซึ่งแสดงให้เห็นได้จากคำแนะนำเกี่ยวกับการตรวจสอบความถูกต้องเชิงวิเคราะห์ของการทดสอบทางอิมมูโนฮิสโตเคมี (Fitzgibbons et al., 2014) — สะท้อนให้เห็นถึงบทบาทที่เพิ่มขึ้นของการประกันคุณภาพเมื่อการทดสอบที่อาศัยเนื้อเยื่อกลายเป็นสิ่งสำคัญในการวินิจฉัย

Seminal works

• fitzgibbons-2014

Frequently asked questions

สิ่งแปลกปลอมทางจุลพยาธิวิทยาคืออะไร?

คือลักษณะที่ปรากฏบนสไลด์ซึ่งเกิดจากกระบวนการเตรียมชิ้นเนื้อ — เช่น รอยพับ, ตะกอน, หรือการหดตัว — ไม่ใช่ส่วนหนึ่งของเนื้อเยื่อดั้งเดิม และต้องไม่ถูกเข้าใจผิดว่าเป็นผลการค้นพบที่แท้จริง

เหตุใดการควบคุมจึงมีความสำคัญในการประเมินคุณภาพ?

การควบคุมเชิงบวกและเชิงลบแสดงให้เห็นว่าการย้อมสีหรือการทดสอบทำงานได้ตามที่คาดไว้หรือไม่ ซึ่งช่วยแยกแยะผลลัพธ์ที่แท้จริงออกจากความล้มเหลวทางเทคนิคหรือสัญญาณที่ไม่จำเพาะ และสนับสนุนการตีความที่น่าเชื่อถือ