Recuperação de Oócitos, Fertilização e Desenvolvimento Embrionário Precoce

Após a estimulação ovariana, oócitos maduros são coletados dos ovários por aspiração guiada por ultrassom transvaginal e levados ao laboratório de embriologia, onde são fertilizados por espermatozoides e cultivados. O oócito fertilizado (zigoto) divide-se nos dias seguintes, formando um embrião em estágio de clivagem, e pode progredir para um blastocisto, a partir do qual um embrião é selecionado para transferência. Este tópico abrange o cerne processual e laboratorial de um ciclo de fertilização in vitro (FIV).

Definition

A recuperação de oócitos é a aspiração de oócitos de folículos ovarianos, geralmente sob orientação de ultrassom transvaginal. A fertilização in vitro é a união de oócito e espermatozoide em laboratório, alcançada por inseminação convencional ou por injeção intracitoplasmática de espermatozoides, após o que o embrião resultante é cultivado durante seu desenvolvimento pré-implantação precoce.

Scope

O tópico aborda como os oócitos são recuperados e seus principais riscos, as duas vias de fertilização em laboratório (inseminação convencional e injeção intracitoplasmática de espermatozoides), a avaliação da fertilização e os marcos do desenvolvimento embrionário precoce, desde o zigoto, passando pelos estágios de clivagem, até o blastocisto. É uma referência metodológica e biológica, não um protocolo operatório ou laboratorial.

Core questions

• Como os oócitos maduros são recuperados dos ovários e quais são os principais riscos do procedimento?
• Quando a inseminação convencional é utilizada e quando a injeção intracitoplasmática de espermatozoides (ICSI) é indicada?
• Como o sucesso da fertilização é reconhecido e quais são os marcos do desenvolvimento embrionário precoce?
• O que distingue os embriões em estágio de clivagem dos embriões em estágio de blastocisto para fins de cultura e seleção?

Key concepts

• Aspiração de oócitos guiada por ultrassom transvaginal
• Maturidade do oócito (metáfase II)
• Inseminação in vitro convencional
• Injeção intracitoplasmática de espermatozoides (ICSI)
• Verificação da fertilização e pronúcleos
• Embrião em estágio de clivagem
• Formação de blastocisto
• Cultura embrionária estendida

Mechanisms

Uma vez desencadeada a maturação final, os oócitos são aspirados de cada folículo, tipicamente através de uma agulha passada sob orientação de ultrassom transvaginal, um procedimento com uma taxa baixa, mas real, de sangramento e infecção (Ludwig et al., 2006). No laboratório, os oócitos maduros são fertilizados colocando-os com espermatozoides móveis preparados (inseminação convencional) ou, quando o número ou a função dos espermatozoides é inadequado, por injeção intracitoplasmática de espermatozoides, na qual um único espermatozoide é injetado no citoplasma do oócito (Palermo et al., 1992). A fertilização é confirmada pelo aparecimento de dois pronúcleos. O zigoto então passa por divisões de clivagem sucessivas nos primeiros dois a três dias e pode compactar e cavitar para formar um blastocisto por volta dos dias cinco a seis; os embriões podem ser selecionados para transferência no estágio de clivagem ou de blastocisto (Blake et al., 2004).

Clinical relevance

A recuperação e a fase laboratorial determinam quantos e quais embriões se tornam disponíveis, e a escolha entre inseminação convencional e ICSI, e entre cultura em estágio de clivagem e blastocisto, molda os resultados subsequentes. Esta entrada descreve essas etapas para referência e avaliação de evidências; não é um protocolo cirúrgico, anestésico ou laboratorial e não oferece aconselhamento individualizado.

Epidemiology

A recuperação transvaginal é um procedimento de rotina com baixa taxa de complicações em grandes séries prospectivas (Ludwig et al., 2006). A ICSI, introduzida em 1992, rapidamente se tornou uma via padrão para a fertilização, particularmente para a infertilidade por fator masculino (Palermo et al., 1992). A proporção de embriões cultivados até o estágio de blastocisto antes da transferência aumentou à medida que os sistemas de cultura laboratorial melhoraram (Blake et al., 2004).

Evidence & guidelines

As evidências provêm de estudos prospectivos de procedimentos, dos relatórios originais da ICSI e de revisões sistemáticas Cochrane comparando os estágios de cultura e transferência (Blake et al., 2004); sociedades profissionais como a ESHRE e a ASRM emitem orientações laboratoriais e processuais. A técnica operatória ou laboratorial detalhada não é reproduzida aqui.

History

A FIV inicial dependia da coleta laparoscópica de óvulos, como no trabalho que levou ao primeiro nascimento por FIV (Steptoe & Edwards, 1978); a aspiração guiada por ultrassom transvaginal tornou-se posteriormente a via padrão, menos invasiva. A introdução da injeção intracitoplasmática de espermatozoides em 1992 transformou o manuseio laboratorial de oócitos, permitindo a fertilização mesmo com muito poucos espermatozoides ou com baixa motilidade (Palermo et al., 1992), e as melhorias nos meios de cultura subsequentemente tornaram viável a cultura de rotina até o estágio de blastocisto (Blake et al., 2004).

Debates

Cultura em estágio de clivagem versus estágio de blastocisto

Cultivar embriões até o estágio de blastocisto pode auxiliar na seleção e melhorar os resultados por transferência, mas também corre o risco de não haver embrião adequado para transferência; uma revisão Cochrane examina as compensações, e o estágio ideal para transferência permanece uma questão prática.

Uso de ICSI além da infertilidade por fator masculino

A ICSI foi desenvolvida para infertilidade grave por fator masculino, mas seu uso se expandiu para casos não relacionados ao fator masculino; se essa aplicação mais ampla melhora os resultados em comparação com a inseminação convencional é debatido, uma vez que o procedimento foi validado no contexto de fator masculino.

Key figures

• Robert Edwards
• Patrick Steptoe
• Gianpiero Palermo
• André Van Steirteghem

Seminal works

• palermo-1992
• steptoe-edwards-1978

Frequently asked questions

A recuperação de oócitos é uma cirurgia de grande porte?

É um procedimento curto realizado com orientação ultrassonográfica e geralmente alguma forma de sedação ou anestesia. Grandes estudos prospectivos relatam uma baixa taxa de complicações como sangramento ou infecção, embora continue sendo um procedimento invasivo; esta entrada não fornece instruções de procedimento ou recuperação.

Qual a diferença entre FIV convencional e ICSI?

Na FIV convencional, espermatozoides preparados são colocados com o oócito e a fertilização ocorre espontaneamente. Na ICSI, um único espermatozoide é injetado diretamente no oócito. A ICSI foi desenvolvida para casos em que os espermatozoides são muito poucos ou muito comprometidos para fertilizar um óvulo sem ajuda.