진균 배양 및 분리

진균 배양은 환자 검체에서 인공 배지 위에 진균을 성장시켜 생존 가능한 유기체를 회수하고, 검사하고, 식별하고, 테스트하는 과정입니다. 직접 검출 방법보다 처리 시간이 느리지만, 배양은 확정적인 종 식별 및 항진균 감수성 테스트를 위한 살아있는 분리주를 제공하기 때문에 여전히 참조 표준으로 남아 있습니다.

Definition

진균 배양 및 분리는 진균 성장에 유리한 조건에서 선택 또는 강화 배지를 접종하여 임상 물질에서 생존 가능한 진균을 회수하고, 추가 식별 및 테스트를 위한 순수 분리주를 얻는 일련의 실험실 기술입니다.

Scope

이 주제는 임상 검체에서 진균을 회수하는 원리, 즉 선택 및 강화 배지, 배양 조건, 배양에서 효모와 곰팡이의 구별, 그리고 순수 분리주가 형태학, 질량 분석법 또는 염기서열 분석을 통한 식별을 어떻게 지원하는지에 대해 다룹니다. 이는 배양을 실험실 방법으로 다루며, 검체 채취 프로토콜이나 치료 지침은 제공하지 않습니다.

Core questions

• 주어진 검체에서 의심되는 진균을 가장 잘 회수하는 배지 및 배양 조건은 무엇입니까?
• 임상적으로 중요한 분리주를 환경 오염과 어떻게 구별합니까?
• 배양 기반 식별이 염기서열 분석 또는 질량 분석법에 의한 확인을 필요로 하는 경우는 언제입니까?
• 침습성 진균 질환에서 배양 민감도의 한계는 무엇입니까?

Key concepts

• 선택 및 강화 배지 (예: Sabouraud agar)
• 효모 대 곰팡이 성장
• 배양 온도 및 시간
• 순수 분리주 및 계대 배양
• 오염 대 진정한 병원체
• 감수성 테스트를 위한 기질로서의 배양
• 분리주의 다상 식별

Mechanisms

검체는 경쟁하는 박테리아를 억제하면서 진균 성장을 지원하도록 고안된 배지에 접종됩니다. 고전적으로는 Sabouraud dextrose agar가 사용되며, 때로는 항균제 또는 선택적 첨가제가 포함됩니다. 플레이트와 사면 배지는 종종 많은 진균이 느리게 성장하기 때문에 장기간 배양되며, 이형성 또는 내열성을 나타내기 위해 선택된 온도에서 배양됩니다. 그런 다음 성장을 평가합니다. 효모는 반죽 같은 콜로니를 형성하는 반면, 곰팡이는 실 모양의 종종 색소가 있는 콜로니를 생성하며, 이들의 거시적 및 미시적 형태는 식별에 도움이 됩니다. 배양이 제공하는 순수 분리주는 형태학, MALDI-TOF 질량 분석법 또는 DNA 염기서열 분석을 통해 종을 확인하고 항진균 감수성을 측정하는 기질입니다. 생존 가능한 유기체가 희박할 수 있으므로, 배양은 심부 감염이나 치료된 감염에서 민감도가 낮을 수 있습니다. 이것이 직접 및 분자 방법과 함께 해석되는 이유입니다.

Clinical relevance

배양은 진균 병원체가 확인되고 명명되는 방식의 많은 부분을 뒷받침하며, 일반적으로 무균 부위에서 양성 배양 결과는 침습성 진균 질환의 합의 정의 내에서 특별한 진단적 중요성을 가집니다. 이 항목은 방법과 그 해석적 가치를 설명합니다. 이는 분리주를 얻는 방법에 대한 참고 자료이며, 검체 처리 또는 환자 관리에 대한 지침이 아닙니다.

Evidence & guidelines

영국 의학 진균학회(British Society for Medical Mycology) 및 EORTC/MSGERC 합의 정의의 모범 사례 권장 사항은 진단 방법 중 배양의 역할, 무균 부위에서 진균이 회수될 때의 중요성, 그리고 일부 침습성 감염에서의 알려진 비민감도를 설명합니다. 참고 아틀라스는 분리주를 식별하는 데 사용되는 콜로니 및 미시적 형태를 분류합니다.

History

정의된 배지에서의 배양은 의학 진균학의 기초 도구였으며, 20세기 초에 도입된 Sabouraud dextrose agar는 진균을 회수하고 식별하는 표준 기질이 되었습니다. 세기 대부분 동안 식별은 배양에서 읽은 콜로니 및 미시적 형태에 의존했으며, 나중에 질량 분석법과 염기서열 분석이 배양된 분리주의 식별에 정확성을 더했습니다.

Seminal works

• schelenz-2015
• dehoog-2020

Frequently asked questions

진균 배양이 종종 왜 그렇게 오래 걸립니까?

의학적으로 중요한 많은 곰팡이와 일부 효모는 느리게 성장하므로, 눈에 보이는 성장과 신뢰할 수 있는 식별을 위해 배양을 며칠에서 몇 주 동안 유지해야 할 수 있습니다. 이것이 더 빠른 직접 및 분자 방법이 배양과 함께 사용되는 한 가지 이유입니다.

양성 진균 배양 결과가 항상 감염을 의미합니까?

반드시 그렇지는 않습니다. 진균은 환경과 신체 표면에 흔하므로, 양성 배양 결과는 맥락에서 해석되어야 합니다. 일반적으로 무균 부위에서 회수되는 것은 오염되거나 군집화된 검체에서 회수되는 것보다 훨씬 더 의미가 있습니다.