真菌の同定と抗真菌薬感受性試験

真菌の同定と抗真菌薬感受性試験は、ヒトの感染症を引き起こす酵母やカビを検出し、その種類を特定し、抗真菌薬に対する感受性を測定する検査方法です。診断真菌学では、顕微鏡検査と培養に加え、抗原・抗体検出、分子生物学的手法、プロテオミクスによる同定、および抗真菌薬のin vitro感受性試験を組み合わせます。

Definition

真菌の同定とは、臨床検体から得られた酵母またはカビの種を、顕微鏡検査、培養、血清学、分子生物学、またはプロテオミクス法によって検査室で決定することです。抗真菌薬感受性試験とは、真菌分離株の抗真菌薬に対する感受性をin vitroで測定することです。

Scope

本項目では、直接顕微鏡検査と培養、抗原・抗体（血清学的）検出、真菌の核酸およびプロテオミクスによる同定、ならびに解釈ブレイクポイントを用いた抗真菌薬感受性試験について扱います。これらは検査方法として記述されており、患者に対する抗真菌薬の選択や投与量については提供していません。

Core questions

• この検体中に真菌は存在するか、またその種は何か？
• 顕微鏡検査、培養、抗原または抗体検出、分子アッセイ、質量分析のうち、どれが最も適切に真菌を検出し同定できるか？
• 分離株は関連する抗真菌薬に感受性があるか、またそれはどのように測定され解釈されるか？
• 真菌診断の感度、速度、標準化における限界は何か？

Key concepts

• 直接顕微鏡検査（KOH、カルコフロール、病理組織学）
• 真菌培養と形態
• 抗原検出（例：ガラクトマンナン、クリプトコッカス抗原、β-D-グルカン）
• 抗体（血清学的）検査
• 分子生物学およびプロテオミクスによる同定
• 真菌のMALDI-TOF質量分析
• 抗真菌薬感受性試験とブレイクポイント
• 酵母とカビ

Mechanisms

診断真菌学では、検体中の真菌を染色と顕微鏡で可視化したり、培養してコロニーと顕微鏡形態を観察したり、培養に依存しない方法で検出します。抗原アッセイは循環する真菌の細胞壁または莢膜成分を検出し、抗体検査は宿主の応答を検出します。これらは分子アッセイやプロテオミクスによる同定と合わせて、増殖が遅い、または培養が困難な微生物の検出を可能にします（Kozel & Wickes, 2014）。種レベルの同定には、真菌分離株のタンパク質スペクトルを参照データベースと照合するMALDI-TOF質量分析法がますます使用されています（Clark et al., 2013）。抗真菌薬感受性試験は、分離株に対する抗真菌薬の阻害活性を測定し、ブレイクポイントと照合して解釈します。この試験の標準化と臨床転帰との関連付けは、継続的な取り組みとなっています（Rex & Pfaller, 2002）。専門的なガイドラインでは、これらの検査方法を真菌症のより広範な診断評価の中に位置付けています（Pappas et al., 2016）。

Clinical relevance

真菌の同定と感受性試験の結果は、侵襲性および表在性真菌感染症に関する臨床的推論に貢献し、抗真菌薬の管理に情報を提供します。本項目は、これらの検査結果がどのように生成され、解釈されるかを説明するものであり、参考資料として提供されています。個人の抗真菌薬治療の選択や投与量の決定の根拠となるものではなく、これらは臨床ガイドラインおよび治療チームによって対処されます。

Epidemiology

診断真菌学は、真菌病原体のサーベイランスと、カンジダ症などの感染症の原因菌種のシフトを含む、新たな抗真菌薬耐性の監視を支援します。ガイドライン文書は、検査診断と感受性データが、集団レベルおよび個人レベルでの管理にどのように情報を提供するかを反映しています（Pappas et al., 2016）。

History

真菌学的診断は長らく、顕微鏡検査と形態学的同定を伴う時間のかかる培養に依存していました。抗原・抗体アッセイ、次いで分子生物学的手法とプロテオミクス法が検出を広げ、加速させ（Kozel & Wickes, 2014）、一方、抗真菌薬感受性試験は20世紀後半から21世紀初頭にかけて、研究ツールから標準化された臨床アッセイへと成熟しました（Rex & Pfaller, 2002）。

Seminal works

• kozel-2014
• rex-2002
• pappas-2016

Frequently asked questions

培養が遅い、または陰性の場合、真菌はどのように検出されますか？

検査室では、培養に依存しない方法、すなわち抗原アッセイ（クリプトコッカス抗原、ガラクトマンナン、β-D-グルカンなど）、抗体検査、分子アッセイを用いて、増殖が遅い、または特定の検体から培養できない真菌を検出します（Kozel & Wickes, 2014）。

抗真菌薬感受性試験とは何ですか？

これは、抗真菌薬が真菌分離株を阻害するかどうかをin vitroで測定し、ブレイクポイントと照合して解釈するものです。この試験の標準化と臨床転帰との関連付けは、段階的なプロセスでした（Rex & Pfaller, 2002）。