Sitokimia dan Flow Sitometri pada Leukemia

Sitokimia dan flow sitometri adalah teknik laboratorium yang mengubah diagnosis leukemia dari kesan morfologis menjadi garis keturunan dan imunofenotipe yang terdefinisi. Pewarnaan sitokimia mengungkapkan sifat enzimatik dan metabolik sel leukemia, sementara flow sitometri multiparameter mengukur banyak penanda permukaan dan intraseluler secara bersamaan, bersama-sama menetapkan garis keturunan dan mendeteksi penyakit sisa terukur.

Definition

Sitokimia dan flow sitometri adalah metode laboratorium untuk mengkarakterisasi sel leukemia: sitokimia menggunakan pewarnaan yang mengungkapkan fitur enzimatik atau biokimia (misalnya aktivitas mieloperoksidase), dan flow sitometri multiparameter mengukur beberapa antigen permukaan dan intraseluler per sel untuk menetapkan garis keturunan, mendefinisikan imunofenotipe, dan mengukur penyakit sisa.

Scope

Topik ini mencakup metode yang digunakan untuk mengkarakterisasi sel leukemia di luar morfologi: pewarnaan sitokimia klasik seperti mieloperoksidase, dan imunofenotipe flow sitometri multiparameter modern, termasuk panel antibodi terstandardisasi dan deteksi penyakit sisa terukur (minimal). Ini adalah materi referensi tentang metodologi laboratorium, bukan protokol klinis.

Key concepts

• Mieloperoksidase dan pewarnaan sitokimia lainnya
• Penetapan garis keturunan berdasarkan imunofenotipe
• Flow sitometri multiparameter (multikolor)
• Panel antibodi terstandardisasi
• Ekspresi antigen aberan
• Gating dan analisis populasi
• Deteksi penyakit sisa terukur (minimal)

Mechanisms

Pewarnaan sitokimia memanfaatkan enzim dan konstituen spesifik sel: aktivitas mieloperoksidase, misalnya, menandai garis keturunan mieloid dan membantu memisahkan leukemia mieloid akut dari leukemia limfoblastik akut pada apusan yang diwarnai. Flow sitometri menangguhkan sel dalam aliran melewati laser dan merekam hamburan cahaya serta fluoresensi dari penanda yang terikat antibodi, memungkinkan banyak antigen diukur pada setiap sel; kombinasi antigen yang khas dan aberan mendefinisikan garis keturunan dan mengidentifikasi populasi leukemia. Pendekatan yang sama, diterapkan pada sensitivitas tinggi dengan panel terstandardisasi, mendeteksi populasi leukemia sisa kecil setelah pengobatan sebagai penyakit sisa terukur (van Dongen et al., 2012; Schuurhuis et al., 2018).

Clinical relevance

Teknik-teknik ini mendasari penetapan garis keturunan dan imunofenotipe yang menjadi dasar klasifikasi leukemia modern, dan penilaian penyakit sisa terukur dengan flow sitometri telah menjadi penanda respons penting dalam literatur. Entri ini menjelaskan metode pada tingkat referensi dan bukan panduan untuk menafsirkan hasil pasien individu.

Evidence & guidelines

Upaya standardisasi seperti panel antibodi EuroFlow mendefinisikan imunofenotipe flow sitometri yang dapat direproduksi, dan European LeukemiaNet MRD Working Party menyediakan kriteria konsensus untuk penilaian penyakit sisa terukur pada leukemia mieloid akut; kriteria garis keturunan juga tertanam dalam klasifikasi WHO (van Dongen et al., 2012; Schuurhuis et al., 2018; Arber et al., 2016).

History

Pewarnaan sitokimia adalah sarana asli untuk menyempurnakan diagnosis morfologis leukemia akut dan menetapkan garis keturunan. Imunofenotipe flow sitometri kemudian sebagian besar menggantikan sitokimia untuk penetapan garis keturunan dengan mengukur banyak antigen per sel, dan inisiatif standardisasi serta dokumen konsensus penyakit sisa terukur kemudian memperluas perannya menjadi penilaian yang dapat direproduksi dan sensitivitas tinggi (van Dongen et al., 2012; Schuurhuis et al., 2018).

Seminal works

• van-dongen-2012
• schuurhuis-2018

Frequently asked questions

Mengapa pewarnaan mieloperoksidase berguna pada leukemia akut?

Mieloperoksidase adalah penanda garis keturunan mieloid, sehingga keberadaannya pada pewarnaan sitokimia mendukung diagnosis leukemia mieloid akut dan membantu membedakannya dari leukemia limfoblastik akut.

Apa itu deteksi penyakit sisa terukur dengan flow sitometri?

Ini adalah penggunaan flow sitometri multiparameter sensitivitas tinggi untuk mendeteksi populasi kecil sel leukemia yang bertahan setelah pengobatan, di bawah tingkat yang terlihat pada morfologi rutin, sebagai penanda respons.