माइकोबैक्टीरियल पहचान और प्रतिरोध

माइकोबैक्टीरियल पहचान और प्रतिरोध परीक्षण प्रयोगशाला विधियाँ हैं जिनका उपयोग माइकोबैक्टीरियम ट्यूबरकुलोसिस और अन्य माइकोबैक्टीरिया का पता लगाने, उन्हें प्रजातियों के अनुसार पहचानने और एंटीमाइकोबैक्टीरियल दवाओं के प्रति उनकी संवेदनशीलता निर्धारित करने के लिए किया जाता है। चूंकि माइकोबैक्टीरिया धीरे-धीरे बढ़ते हैं, यह क्षेत्र माइक्रोस्कोपी और कल्चर को तीव्र आणविक परीक्षणों के साथ जोड़ता है जो जीव और प्रमुख प्रतिरोध मार्करों दोनों का पता लगा सकते हैं।

Definition

माइकोबैक्टीरियल पहचान एक नैदानिक नमूने से माइकोबैक्टीरिया का प्रयोगशाला पता लगाना और प्रजाति-स्तर पर पहचान करना है; प्रतिरोध परीक्षण फेनोटाइपिक या आणविक विधियों द्वारा, एक माइकोबैक्टीरियल आइसोलेट की एंटीमाइकोबैक्टीरियल एजेंटों के प्रति संवेदनशीलता का निर्धारण है।

Scope

यह प्रविष्टि एसिड-फास्ट माइक्रोस्कोपी, माइकोबैक्टीरियल कल्चर, प्रजाति पहचान, फेनोटाइपिक और आणविक दवा-संवेदनशीलता परीक्षण, और तपेदिक में रिफाम्पिन प्रतिरोध जैसे प्रतिरोध का तीव्र आणविक पता लगाने को कवर करती है। यह इन्हें प्रयोगशाला विधियों के रूप में मानती है और उपचार के नियम या खुराक प्रदान नहीं करती है।

Core questions

• क्या इस नमूने में माइकोबैक्टीरिया मौजूद हैं, और क्या जीव माइकोबैक्टीरियम ट्यूबरकुलोसिस है या एक गैर-तपेदिक प्रजाति?
• कौन सी विधियाँ - एसिड-फास्ट माइक्रोस्कोपी, कल्चर, आणविक परीक्षण, या प्रोटीओमिक पहचान - माइकोबैक्टीरिया का पता लगाती और पहचान करती हैं?
• क्या आइसोलेट प्रमुख एंटीमाइकोबैक्टीरियल दवाओं के प्रति प्रतिरोधी है, और इसे फेनोटाइपिक या आणविक रूप से कैसे निर्धारित किया जाता है?
• माइकोबैक्टीरिया की धीमी वृद्धि और आणविक परीक्षणों की गति प्रयोगशाला कार्यप्रवाह को कैसे आकार देती है?

Key concepts

• एसिड-फास्ट (ज़ील-नील्सन, ऑरामाइन) माइक्रोस्कोपी
• माइकोबैक्टीरियल कल्चर (ठोस और तरल मीडिया)
• माइकोबैक्टीरियम ट्यूबरकुलोसिस कॉम्प्लेक्स बनाम गैर-तपेदिक माइकोबैक्टीरिया
• फेनोटाइपिक दवा-संवेदनशीलता परीक्षण
• प्रतिरोध का आणविक पता लगाना (जैसे रिफाम्पिन प्रतिरोध)
• प्रत्यक्ष पता लगाने के लिए न्यूक्लिक-एसिड प्रवर्धन
• लाइन प्रोब और कार्ट्रिज-आधारित परीक्षण
• धीमी वृद्धि और टर्नअराउंड समय

Mechanisms

माइकोबैक्टीरिया का पता लगाना एसिड-फास्ट माइक्रोस्कोपी से शुरू होता है, जो लिपिड-समृद्ध कोशिका भित्ति को दागता है, और ठोस या तरल मीडिया पर कल्चर के साथ, क्योंकि माइकोबैक्टीरिया धीरे-धीरे बढ़ते हैं, इसमें सप्ताह लग सकते हैं। प्रजाति पहचान आणविक जांच, अनुक्रमण, या मास स्पेक्ट्रोमेट्री (Clark et al., 2013) जैसे प्रोटीओमिक विधियों का उपयोग करके माइकोबैक्टीरियम ट्यूबरकुलोसिस कॉम्प्लेक्स को गैर-तपेदिक माइकोबैक्टीरिया से अलग करती है। दवा-संवेदनशीलता परीक्षण दवाओं की उपस्थिति में वृद्धि द्वारा फेनोटाइपिक रूप से किया जाता है या, तेजी से, प्रतिरोध-संबंधी उत्परिवर्तन के आणविक पता लगाने द्वारा। स्वचालित कार्ट्रिज-आधारित न्यूक्लिक-एसिड प्रवर्धन M. tuberculosis और रिफाम्पिन प्रतिरोध का सीधे एक नमूने से घंटों के भीतर पता लगा सकता है, बजाय कल्चर-आधारित परीक्षण के लिए आवश्यक हफ्तों के (Boehme et al., 2010), और वास्तविक समय पीसीआर प्रयोगशाला में प्रत्यक्ष आणविक पता लगाने का व्यापक रूप से समर्थन करता है (Espy et al., 2006)। व्यापक समीक्षाएं इन प्रयोगशाला विधियों को तपेदिक के व्यापक नैदानिक और निगरानी परिदृश्य के भीतर रखती हैं (Pai et al., 2016)।

Clinical relevance

माइकोबैक्टीरिया की पहचान करना और दवा प्रतिरोध का पता लगाना तपेदिक और गैर-तपेदिक माइकोबैक्टीरियल रोग के बारे में नैदानिक तर्क और सार्वजनिक-स्वास्थ्य नियंत्रण के लिए केंद्रीय जानकारी उत्पन्न करता है। यह प्रविष्टि बताती है कि वे प्रयोगशाला परिणाम कैसे उत्पन्न होते हैं और उन्हें क्या सीमित करता है; यह संदर्भ सामग्री है और किसी व्यक्ति के लिए एंटीमाइकोबैक्टीरियल नियम या खुराक निर्धारित नहीं करती है।

Epidemiology

माइकोबैक्टीरियल प्रयोगशाला परीक्षण तपेदिक नियंत्रण के लिए अभिन्न है: जीव और प्रतिरोध का तीव्र आणविक पता लगाना दवा-प्रतिरोधी तपेदिक को पहचानने के मार्ग को छोटा करता है और निगरानी को सूचित करता है (Boehme et al., 2010)। तपेदिक की समीक्षाएं रोग के वैश्विक महामारी विज्ञान और प्रबंधन में निदान की भूमिका पर जोर देती हैं (Pai et al., 2016)।

History

माइकोबैक्टीरियल निदान एक सदी से अधिक समय तक एसिड-फास्ट माइक्रोस्कोपी और धीमी गति से कल्चर पर आधारित था, जिसमें बाद में फेनोटाइपिक दवा-संवेदनशीलता परीक्षण जोड़ा गया। न्यूक्लिक-एसिड प्रवर्धन की शुरुआत और, विशेष रूप से, स्वचालित कार्ट्रिज-आधारित परीक्षण जो घंटों के भीतर सीधे थूक से M. tuberculosis और रिफाम्पिन प्रतिरोध की रिपोर्ट करने में सक्षम थे, ने प्रयोगशाला अभ्यास में एक बड़ा बदलाव चिह्नित किया (Boehme et al., 2010), जो आणविक माइक्रोबायोलॉजी के व्यापक विस्तार के भीतर स्थापित किया गया था (Espy et al., 2006)।

Seminal works

• boehme-2010
• pai-2016
• espy-2006

Frequently asked questions

माइकोबैक्टीरियल परीक्षण कल्चर और आणविक दोनों विधियों पर क्यों निर्भर करता है?

माइकोबैक्टीरिया धीरे-धीरे बढ़ते हैं, इसलिए कल्चर-आधारित पहचान और संवेदनशीलता परीक्षण में सप्ताह लग सकते हैं। आणविक परीक्षण जीव और प्रमुख प्रतिरोध मार्करों, जैसे रिफाम्पिन प्रतिरोध, का सीधे एक नमूने से घंटों के भीतर पता लगाते हैं, कल्चर का पूरक करते हुए (Boehme et al., 2010)।

प्रयोगशाला में माइकोबैक्टीरियम ट्यूबरकुलोसिस को गैर-तपेदिक माइकोबैक्टीरिया से क्या अलग करता है?

दोनों एसिड-फास्ट होते हैं, इसलिए केवल माइक्रोस्कोपी उन्हें अलग नहीं कर सकती; प्रजाति-स्तर की पहचान आणविक जांच, अनुक्रमण, या प्रोटीओमिक विधियों का उपयोग करके M. tuberculosis कॉम्प्लेक्स को गैर-तपेदिक माइकोबैक्टीरिया से अलग करती है (Clark et al., 2013)।