Prélèvement et préparation des échantillons
Le prélèvement et la préparation des échantillons constituent le fondement pré-analytique de la cytopathologie : il s'agit de l'ensemble des techniques par lesquelles le matériel cellulaire est obtenu du corps et déposé sur une lame afin que les cellules individuelles puissent être examinées au microscope. Étant donné que le diagnostic cytologique repose sur la morphologie des cellules et des petits groupes cellulaires plutôt que sur l'architecture tissulaire intacte, la manière dont un échantillon est prélevé, transféré, fixé et coloré détermine en grande partie la possibilité d'un diagnostic fiable.
Definition
Le prélèvement et la préparation des échantillons comprennent les étapes de cytopréparation - l'échantillonnage, le transfert sur lame ou dans un milieu fixateur, la fixation et la coloration - qui transforment un échantillon cytologique clinique en une lame de microscope adaptée à l'interprétation morphologique.
Scope
Ce domaine oriente le lecteur vers les principales voies de préparation utilisées en cytologie : les frottis conventionnels directs, le traitement en milieu liquide, les stratégies de fixation et les deux grandes traditions de coloration (la coloration de Papanicolaou fixée à l'alcool et les colorations de Romanowsky séchées à l'air). Il les présente comme des méthodes de laboratoire qui influencent l'adéquation et l'interprétabilité des échantillons ; il ne s'agit pas d'un manuel de procédures et il ne fournit pas d'instructions spécifiques au patient.
Sub-topics
Key concepts
- Phase pré-analytique de la cytologie
- Adéquation et cellularité des échantillons
- Frottis conventionnel versus traitement en milieu liquide
- Fixation humide versus séchage à l'air
- Coloration de Papanicolaou et colorations de Romanowsky
- Fixation, transparence et détails nucléaires
- Artefact de séchage
Mechanisms
Un échantillon cytologique débute sous forme de cellules en suspension dans un liquide ou raclées sur un instrument. Dans la préparation conventionnelle, le matériel est étalé directement sur une lame de verre et soit fixé immédiatement (fixation humide) pour la coloration de Papanicolaou, soit laissé sécher à l'air pour une coloration de Romanowsky. En cytologie en milieu liquide, l'échantillon est plutôt rincé dans un liquide conservateur et un instrument dépose une monocouche mince et uniforme de cellules sur la lame, réduisant ainsi l'obscurcissement dû au sang, au mucus et au chevauchement (Arbyn 2008). La fixation stabilise les protéines cellulaires et préserve les détails de la chromatine nucléaire ; l'étape de coloration confère ensuite la couleur et le contraste qui permettent de lire les noyaux, le cytoplasme et l'arrière-plan. Le choix de la préparation et de la coloration est adapté à la question diagnostique - la coloration de Papanicolaou favorise les détails nucléaires et chromatiniques dans les cellules épithéliales, tandis que les colorations de Romanowsky séchées à l'air mettent l'accent sur les caractéristiques cytoplasmiques et stromales utiles en cytologie par aspiration (Papanicolaou 1942 ; Koss & Melamed 2006).
Clinical relevance
L'adéquation et la qualité d'un échantillon cytologique fixent une limite supérieure à la précision diagnostique, c'est pourquoi la préparation des échantillons fait partie intégrante de la contribution de la cytologie au dépistage et au diagnostic. Ce domaine décrit comment un matériel cytologique fiable est produit et est destiné à servir de base à la compréhension de la pratique de laboratoire ; il ne constitue pas une base pour des décisions cliniques individuelles.
Evidence & guidelines
Les preuves comparatives concernant les méthodes de préparation sont les plus développées dans le dépistage cervical, où une revue systématique a montré que la cytologie en milieu liquide et la cytologie conventionnelle présentaient une précision globalement similaire, tandis que le traitement en milieu liquide réduit les échantillons insatisfaisants (Arbyn 2008 ; Siebers 2012, cité dans l'entrée sur la cytologie en milieu liquide). Les cadres de rapport tels que le Système de Bethesda intègrent des critères explicites d'adéquation des échantillons qui dépendent directement de la qualité de la préparation (Solomon 2002, cité dans les entrées thématiques pertinentes).
History
La cytopréparation moderne est née du développement par George Papanicolaou, au début du XXe siècle, d'une coloration polychromatique pour les frottis fixés, ce qui a rendu possible le dépistage cervical à l'échelle de la population. Le frottis direct et la fixation à l'alcool ont dominé la pratique pendant des décennies ; à partir des années 1990, les méthodes en milieu liquide ont introduit la préparation standardisée en monocouche, et le domaine continue d'intégrer les tests moléculaires et auxiliaires sur le matériel d'échantillon résiduel (Koss & Melamed 2006 ; Bibbo & Wilbur 2014).
Key figures
- George Papanicolaou
- Leopold Koss
Related topics
Seminal works
- papanicolaou-1942
- arbyn-2008
- koss-melamed-2006
Frequently asked questions
- Quelle est la différence entre le prélèvement et la préparation des échantillons en cytologie ?
- Le prélèvement consiste à obtenir l'échantillon cellulaire du patient ; la préparation est le traitement en laboratoire - transfert sur lame ou dans un liquide, fixation et coloration - qui transforme cet échantillon en une lame de microscope lisible. Les deux font partie de la phase pré-analytique qui régit la qualité de l'échantillon.
- Pourquoi un échantillon cytologique doit-il être fixé ou séché à l'air avant la coloration ?
- La fixation ou le séchage à l'air contrôlé préserve la structure cellulaire et prépare les cellules à absorber le colorant de manière reproductible. La fixation humide est favorable aux colorations qui mettent en évidence les détails nucléaires, comme la coloration de Papanicolaou, tandis que le séchage délibéré à l'air est l'étape préparatoire aux colorations de Romanowsky.