تشخیص سرولوژیک: شناسایی آنتیبادی و آنتیژن
تشخیص سرولوژیک از واکنشهای ایمونولوژیک برای شناسایی آنتیبادیهای اختصاصی ویروس تولید شده توسط میزبان یا آنتیژنهای ویروسی موجود در نمونه استفاده میکند. با بهرهگیری از ویژگی اتصال آنتیبادی-آنتیژن، سرولوژی میتواند مواجهه با ویروس را تأیید کند، مرحله عفونت را از طریق کلاس و تیتر آنتیبادی مشخص کند، یا پروتئینهای ویروسی را مستقیماً نشان دهد، که اغلب با فرمتهای آزمایش سریع و مقیاسپذیر همراه است.
Definition
تشخیص سرولوژیک، شناسایی آزمایشگاهی آنتیبادیهای اختصاصی ویروس (پاسخ ایمنی میزبان) یا آنتیژنهای ویروسی است که با استفاده از واکنشهای اتصال آنتیبادی-آنتیژن که توسط سیستمهای شناسایی آنزیمی، فلورسنت یا سایر سیستمهای نشاندار خوانده میشوند، انجام میگیرد.
Scope
این موضوع اصول شناسایی آنتیبادی و آنتیژن در ویروسشناسی، پلتفرمهای اصلی آزمایش (ایمونواسیهای آنزیمی، ایمونوبلات، تستهای سریع جریان جانبی، خنثیسازی) و تفسیر کلاس و تیتر آنتیبادی در رابطه با زمانبندی عفونت را پوشش میدهد. این یک مرجع روششناختی است و پروتکلهای سفارش آزمایش یا توصیههای مدیریت بالینی را ارائه نمیدهد.
Core questions
- آیا آزمایش باید آنتیبادیهای میزبان را شناسایی کند یا آنتیژنهای ویروس را، و هر کدام چه مفهومی در مورد وضعیت عفونت دارند؟
- چگونه IgM و IgG، و تغییرات در تیتر، زمانبندی یا مرحله عفونت را نشان میدهند؟
- چگونه حساسیت، اختصاصیت و واکنش متقاطع در طراحی آزمایش متعادل میشوند؟
- چه زمانی برای تأیید نتیجه غربالگری به یک آزمایش تأییدی یا خنثیسازی نیاز است؟
Key concepts
- اختصاصیت آنتیبادی-آنتیژن
- آزمایش ایمونوسوربنت مرتبط با آنزیم (ELISA)
- تأیید ایمونوبلات (وسترن بلات)
- تست سریع آنتیژن جریان جانبی
- IgM در مقابل IgG و سر وکانورژن
- تیتر آنتیبادی
- آزمایش خنثیسازی
- دوره پنجره و واکنش متقاطع
Mechanisms
آزمایشهای سرولوژیک بر اتصال اختصاصی بین یک آنتیبادی و آنتیژن آن تکیه دارند. در شناسایی آنتیبادی، آنتیژن ویروسی تثبیتشده، آنتیبادیهای بیمار را به دام میاندازد که سپس توسط یک معرف ثانویه نشاندار، مانند آنچه در آزمایش ایمونوسوربنت مرتبط با آنزیم (ELISA) استفاده میشود، آشکار میشوند. در شناسایی آنتیژن، معرف تثبیتشده یک آنتیبادی است که پروتئین ویروسی را از نمونه به دام میاندازد، فرمتی که در بسیاری از تستهای سریع جریان جانبی استفاده میشود. کلاس آنتیبادی شناساییشده به مرحلهبندی عفونت کمک میکند: IgM معمولاً زودتر ظاهر میشود و IgG ماندگار است، و افزایش تیتر بین سرمهای جفتشده از عفونت اخیر حمایت میکند. ایمونواسیهای غربالگری اغلب با روشهای تأییدی اختصاصیتر مانند ایمونوبلات یا خنثیسازی جفت میشوند، که دومی آنتیبادیهای از نظر عملکردی مرتبط را که عفونتزایی ویروسی را مسدود میکنند، اندازهگیری میکند. هر طراحی، حساسیت را در برابر اختصاصیت متعادل میکند، با چالش تکرارشونده واکنش متقاطع بین ویروسهای مرتبط.
Clinical relevance
سرولوژی از تشخیص عفونت ویروسی گذشته یا حال، ارزیابی وضعیت ایمنی و بررسیهای سرواپیدمیولوژیک حمایت میکند؛ تستهای آنتیژن تشخیص مستقیم و سریع را در محل مراقبت فراهم میکنند. این مدخل نحوه عملکرد این آزمایشها و نحوه چارچوببندی نتایج آنها را توضیح میدهد، از جمله محدودیتهایی مانند عدم وجود آنتیبادی در اوایل عفونت (دوره پنجره)؛ این توصیفی است و مبنایی برای تصمیمگیریهای تشخیصی یا درمانی فردی نیست.
Epidemiology
بررسیهای سرولوژیک مبتنی بر آنتیبادی، ابزاری استاندارد برای تخمین نسبت تجمعی جمعیتی است که در معرض ویروس قرار گرفتهاند و مکمل نظارت مولکولی است که عفونت فعال را شناسایی میکند. تستهای سریع آنتیژن ظرفیت آزمایش را در طول شیوع بیماری با امکان تشخیص غیرمتمرکز و سریع افزایش میدهند.
History
سرولوژی ویروسی از آزمایشهای اولیه آگلوتیناسیون، تثبیت کمپلمان و خنثیسازی توسعه یافت و با معرفی آزمایش ایمونوسوربنت مرتبط با آنزیم (ELISA) توسط انگوال و پرلمن در سال 1971 متحول شد، که اندازهگیری آنتیبادی و آنتیژن را کمی و مقیاسپذیر ساخت. ایمونوبلاتینگ پروتئین، که توسط توبین و همکارانش در سال 1979 توصیف شد، یک فرمت تأییدی اختصاصی را اضافه کرد که هنوز برای چندین عفونت ویروسی استفاده میشود.
Key figures
- Eva Engvall
- Peter Perlmann
- Albert Coons
Related topics
Seminal works
- engvall-perlmann-1971
- towbin-1979
Frequently asked questions
- تفاوت بین شناسایی آنتیبادی و شناسایی آنتیژن چیست؟
- شناسایی آنتیبادی، پاسخ ایمنی میزبان به ویروس را اندازهگیری میکند و میتواند نشاندهنده عفونت گذشته یا جاری باشد، در حالی که شناسایی آنتیژن، پروتئینهای ویروسی را مستقیماً نشان میدهد و منعکسکننده حضور فعلی ویروس است. این دو به سوالات متفاوتی در مورد وضعیت عفونت پاسخ میدهند.
- چرا یک آزمایش سرولوژی ممکن است در اوایل عفونت منفی باشد؟
- تولید آنتیبادیها پس از مواجهه زمان میبرد، بنابراین در طول این دوره پنجره، آزمایش آنتیبادی ممکن است منفی باشد حتی اگر ویروس وجود داشته باشد. روشهای مستقیم مانند شناسایی آنتیژن یا اسید نوکلئیک برای شناسایی عفونت اولیه استفاده میشوند.