جمع العينات وتحضيرها
يُعد جمع العينات وتحضيرها الأساس قبل التحليلي لعلم أمراض الخلايا: وهي مجموعة التقنيات التي يتم من خلالها الحصول على المادة الخلوية من الجسم ووضعها على شريحة بحيث يمكن فحص الخلايا الفردية تحت المجهر. ولأن التشخيص الخلوي يعتمد على مورفولوجيا الخلايا ومجموعات الخلايا الصغيرة بدلاً من البنية النسيجية السليمة، فإن طريقة جمع العينة ونقلها وتثبيتها وصباغتها تحدد إلى حد كبير ما إذا كان التشخيص الموثوق ممكنًا.
Definition
يشمل جمع العينات وتحضيرها الخطوات التحضيرية الخلوية - أخذ العينات، النقل إلى الشريحة أو وسط التثبيت، التثبيت، والصباغة - التي تحول العينة الخلوية السريرية إلى شريحة مجهرية مناسبة للتفسير المورفولوجي.
Scope
يوجه هذا المجال القارئ إلى المسارات التحضيرية الرئيسية المستخدمة في علم الخلايا: المسحات التقليدية المباشرة، والمعالجة القائمة على السائل، واستراتيجيات التثبيت، وتقاليد الصباغة العظيمة (صبغة بابانيكولاو المثبتة بالكحول وصبغات رومانوفسكي المجففة بالهواء). ويؤطر هذه الطرق كطرق مخبرية تشكل كفاية العينة وقابليتها للتفسير؛ وهو ليس دليلاً إجرائيًا ولا يقدم تعليمات خاصة بالمريض.
Sub-topics
Key concepts
- المرحلة قبل التحليلية لعلم الخلايا
- كفاية العينة وعدد الخلايا
- المسحة التقليدية مقابل المعالجة القائمة على السائل
- التثبيت الرطب مقابل التجفيف بالهواء
- صبغة بابانيكولاو وصبغات رومانوفسكي
- التثبيت، الشفافية، وتفاصيل النواة
- التحف الجافة
Mechanisms
تبدأ العينة الخلوية كخلايا معلقة في سائل أو مكشوطة على أداة. في التحضير التقليدي، تُمسح المادة مباشرة على شريحة زجاجية وتُثبت إما فورًا (تثبيت رطب) لصبغة بابانيكولاو أو تُترك لتجف في الهواء لصبغة رومانوفسكي. في علم الخلايا القائم على السائل، تُشطف العينة بدلاً من ذلك في سائل حافظ وتقوم أداة بترسيب طبقة رقيقة ومتساوية من الخلايا على الشريحة، مما يقلل من الدم والمخاط والتداخل الذي يحجب الرؤية (Arbyn 2008). يعمل التثبيت على استقرار البروتينات الخلوية ويحافظ على تفاصيل الكروماتين النووي؛ ثم تمنح خطوة الصباغة اللون والتباين اللذين يسمحان بقراءة النوى والسيتوبلازم والخلفية. يتم مطابقة اختيار التحضير والصبغة مع السؤال التشخيصي - تفضل صبغة بابانيكولاو تفاصيل النواة والكروماتين في الخلايا الظهارية، بينما تؤكد صبغات رومانوفسكي المجففة بالهواء على الميزات السيتوبلازمية والسدوية المفيدة في علم الخلايا الشفطي (Papanicolaou 1942; Koss & Melamed 2006).
Clinical relevance
تضع كفاية وجودة العينة الخلوية حدًا أعلى لدقة التشخيص، وهذا هو السبب في أن تحضير العينة جزء لا يتجزأ من كيفية مساهمة علم الخلايا في الفحص والتشخيص. يصف هذا المجال كيفية إنتاج مادة خلوية موثوقة وهو مخصص كخلفية لفهم الممارسة المخبرية؛ وهو ليس أساسًا لاتخاذ قرارات سريرية فردية.
Evidence & guidelines
تتطور الأدلة المقارنة لطرق التحضير بشكل أكبر في فحص عنق الرحم، حيث وجدت مراجعة منهجية أن علم الخلايا القائم على السائل والتقليدي لهما دقة متشابهة بشكل عام بينما تقلل المعالجة القائمة على السائل من العينات غير المرضية (Arbyn 2008; Siebers 2012، المشار إليه في مدخل علم الخلايا القائم على السائل). تتضمن أطر الإبلاغ مثل نظام بيثيسدا معايير صريحة لكفاية العينة تعتمد مباشرة على جودة التحضير (Solomon 2002، المشار إليه في إدخالات الموضوعات ذات الصلة).
History
نشأ التحضير الخلوي الحديث من تطوير جورج بابانيكولاو في أوائل القرن العشرين لصبغة متعددة الألوان للمسحات الثابتة، مما جعل فحص عنق الرحم على نطاق واسع ممكنًا. سيطرت المسحة المباشرة والتثبيت بالكحول على الممارسة لعقود؛ ومنذ التسعينيات، أدخلت الطرق القائمة على السائل تحضير الطبقة الأحادية الموحد، ويستمر المجال في دمج الاختبارات الجزيئية والمساعدة على المواد المتبقية من العينات (Koss & Melamed 2006; Bibbo & Wilbur 2014).
Key figures
- George Papanicolaou
- Leopold Koss
Related topics
Seminal works
- papanicolaou-1942
- arbyn-2008
- koss-melamed-2006
Frequently asked questions
- ما الفرق بين جمع العينات وتحضير العينات في علم الخلايا؟
- الجمع هو الحصول على العينة الخلوية من المريض؛ والتحضير هو المعالجة المخبرية - النقل إلى الشريحة أو السائل، التثبيت، والصباغة - التي تحول تلك العينة إلى شريحة مجهرية قابلة للقراءة. كلاهما جزء من المرحلة قبل التحليلية التي تحكم جودة العينة.
- لماذا تحتاج عينة علم الخلايا إلى التثبيت أو التجفيف بالهواء قبل الصباغة؟
- يحافظ التثبيت أو التجفيف بالهواء المتحكم فيه على البنية الخلوية ويهيئ الخلايا لامتصاص الصبغة بطريقة قابلة للتكرار. يدعم التثبيت الرطب صبغات تفاصيل النواة مثل صبغة بابانيكولاو، بينما التجفيف المتعمد بالهواء هو الخطوة التحضيرية لصبغات رومانوفسكي.