التقنيات المساعدة والأساليب الجزيئية في علم أمراض الخلايا
التقنيات المساعدة هي الأساليب المخبرية المطبقة على المواد الخلوية بعد فحص المسحات الروتينية المصبوغة بصبغتي بابانيكولاو ورومانوفسكي، وذلك بهدف تحسين الانطباع المورفولوجي، أو تصنيف ورم، أو الكشف عن تغيير ذي أهمية سريرية. إنها توسع نطاق علم الخلايا إلى ما هو أبعد من المورفولوجيا وحدها، مما يسمح للعينات الصغيرة مثل شفط الإبرة الدقيقة، والسوائل الانصبابية، والمستحضرات التقشيرية بتقديم معلومات مناعية ظاهرية ووراثية خلوية وجزيئية.
Definition
التقنيات المساعدة في علم أمراض الخلايا هي دراسات مخبرية إضافية تُجرى على المستحضرات الخلوية أو المواد الخلوية المتبقية لتكملة التشخيص المورفولوجي، وتشمل الأساليب المناعية الظاهرية والوراثية الخلوية والجزيئية والحسابية.
Scope
يوجه هذا المجال القارئ إلى الأساليب المساعدة الرئيسية المستخدمة في العينات الخلوية: الكيمياء المناعية الخلوية لمؤشرات البروتين، التهجين الموضعي المتألق (FISH) للتغيرات على مستوى الكروموسومات والجينات، قياس التدفق الخلوي لتحديد النمط المناعي للمعلّقات الخلوية، الفحوصات الجزيئية وفيروس الورم الحليمي البشري على المواد الخلوية، وعلم الأمراض الرقمي مع التحليل الآلي للصور. إنها نظرة عامة هيكلية؛ وتُعالَج كل تقنية بالتفصيل في عقدة الموضوع الخاصة بها.
Sub-topics
Core questions
- ما هي الطريقة المساعدة المناسبة لعينات خلوية معينة وسؤال تشخيصي؟
- كيف يؤثر تحضير العينة وتثبيتها على صلاحية نتائج الكيمياء المناعية الخلوية، والتهجين الموضعي المتألق (FISH)، والنتائج الجزيئية؟
- كيف يمكن فرز المواد الخلوية المحدودة بحيث يتم الحفاظ على الدراسات المورفولوجية والمساعدة على حد سواء؟
Key concepts
- كفاية العينة وفرزها
- تحضير الكتلة الخلوية
- تحديد النمط المناعي
- التحقق والعوامل قبل التحليلية
- الاختبار الانعكاسي والإضافي
- سير العمل الموفر للعينات
Mechanisms
يمكن معالجة العينات الخلوية كمسحات مباشرة، أو مستحضرات سائلة، أو مستحضرات بالطرد الخلوي (cytospins)، أو كتل خلوية؛ ويحدد التحضير المختار أي الأساليب المساعدة ممكنة. تحدد الكيمياء المناعية الخلوية مستضدات البروتين باستخدام أجسام مضادة معلمة، ويعرض التهجين الموضعي المتألق تسلسلات حمض نووي ريبوزي منقوص الأكسجين (DNA) محددة باستخدام مجسات متألقة، ويقيس قياس التدفق الخلوي تعبير المستضد على الخلايا في المعلق، وتستخلص الفحوصات الجزيئية الأحماض النووية وتستجوبها. نظرًا لأن المواد الخلوية غالبًا ما تكون نادرة، فإن الموضوع المتكرر هو فرز العينة بحيث يمكن إجراء كل من المورفولوجيا ودراسة مساعدة واحدة أو أكثر.
Clinical relevance
توسع التقنيات المساعدة ما يمكن أن تجيب عنه العينة الخلوية، مما يدعم تصنيف الأورام، وتحديد السلالة، والكشف عن المؤشرات الحيوية التي يتم الإبلاغ عنها جنبًا إلى جنب مع المورفولوجيا. كمادة مرجعية، يصف هذا المجال كيفية توليد هذه المعلومات؛ ويعد اختيار الاختبار المحدد وتفسيره قرارات مخبرية سريرية وليست نصيحة فردية هنا.
Evidence & guidelines
أصدرت الهيئات المهنية أطر التحقق والإبلاغ ذات الصلة بهذه الأساليب، بما في ذلك إرشادات الكلية الأمريكية لأطباء الأمراض (College of American Pathologists) بشأن التحقق من صحة التصوير الشريحي الكامل للاستخدام التشخيصي (Pantanowitz et al., 2013). يتم تلخيص الأدلة الخاصة بالأسلوب، مثل تسلسل الجيل التالي الذي يتم إجراؤه مباشرة على مادة شفط الإبرة الدقيقة (Qiu et al., 2015)، ضمن عقد الموضوعات المقابلة.
History
بدأ علم أمراض الخلايا كتخصص مورفولوجي بحت مبني على صبغة بابانيكولاو. على مدى العقود اللاحقة، تم تكييف الكيمياء المناعية الخلوية، ثم التهجين الموضعي وقياس التدفق الخلوي، ومؤخرًا الفحوصات الجزيئية القائمة على الحمض النووي وتحليل الصور الرقمية، من علم الأنسجة والطب المخبري لتناسب العينات الأصغر حجمًا والمُحضرة بطرق مختلفة والتي تُصادف في علم الخلايا.
Related topics
Seminal works
- fetsch-abati-2001
- pantanowitz-2013
Frequently asked questions
- لماذا تعتبر التقنيات المساعدة مهمة بشكل خاص في علم الخلايا؟
- غالبًا ما تكون العينات الخلوية صغيرة وتفتقر إلى البنية، لذا فإن الأساليب المساعدة التي تضيف معلومات مناعية ظاهرية أو جزيئية غالبًا ما تسمح بتصنيف نهائي لا يمكن للمورفولوجيا وحدها توفيره.
- ما هي الكتلة الخلوية ولماذا هي مهمة للاختبارات المساعدة؟
- الكتلة الخلوية هي مستحضر مغمور بالبارافين مصنوع من المواد الخلوية المتبقية؛ ويوفر مقاطع مناسبة للكيمياء المناعية الخلوية، والتهجين الموضعي، والاستخلاص الجزيئي، مما يجعله عامل تمكين رئيسي للدراسات المساعدة على عينات علم الخلايا.