Thu nhận noãn, thụ tinh và phát triển phôi sớm

Sau khi kích thích buồng trứng, các noãn trưởng thành được thu nhận từ buồng trứng bằng phương pháp chọc hút dưới hướng dẫn siêu âm qua ngả âm đạo và được đưa đến phòng thí nghiệm phôi học, nơi chúng được thụ tinh bằng tinh trùng và nuôi cấy. Noãn đã thụ tinh (hợp tử) phân chia trong những ngày tiếp theo thành phôi giai đoạn phân cắt và có thể phát triển thành phôi nang, từ đó một phôi được chọn để chuyển. Chủ đề này bao gồm các quy trình và hoạt động cốt lõi trong phòng thí nghiệm của một chu kỳ IVF.

Definition

Thu nhận noãn là việc chọc hút noãn từ các nang buồng trứng, thường dưới hướng dẫn siêu âm qua ngả âm đạo. Thụ tinh trong ống nghiệm là sự kết hợp của noãn và tinh trùng trong phòng thí nghiệm, đạt được bằng cách thụ tinh thông thường hoặc bằng cách tiêm tinh trùng vào bào tương noãn, sau đó phôi thu được được nuôi cấy qua giai đoạn phát triển sớm trước khi làm tổ.

Scope

Chủ đề này bao gồm cách thức thu nhận noãn và các rủi ro chính của nó, hai con đường thụ tinh trong phòng thí nghiệm (thụ tinh thông thường và tiêm tinh trùng vào bào tương noãn), đánh giá sự thụ tinh, và các mốc phát triển của phôi sớm từ hợp tử qua các giai đoạn phân cắt đến phôi nang. Đây là một tài liệu tham khảo về phương pháp và sinh học, không phải là một quy trình phẫu thuật hoặc phòng thí nghiệm.

Core questions

• Noãn trưởng thành được thu nhận từ buồng trứng như thế nào, và những rủi ro chính của thủ thuật là gì?
• Khi nào thì sử dụng thụ tinh thông thường và khi nào thì chỉ định tiêm tinh trùng vào bào tương noãn (ICSI)?
• Sự thụ tinh thành công được nhận biết như thế nào, và các mốc phát triển của phôi sớm là gì?
• Điều gì phân biệt phôi giai đoạn phân cắt với phôi giai đoạn phôi nang cho mục đích nuôi cấy và lựa chọn?

Key concepts

• Chọc hút noãn dưới hướng dẫn siêu âm qua ngả âm đạo
• Độ trưởng thành của noãn (metaphase II)
• Thụ tinh trong ống nghiệm thông thường
• Tiêm tinh trùng vào bào tương noãn (ICSI)
• Kiểm tra thụ tinh và tiền nhân
• Phôi giai đoạn phân cắt
• Hình thành phôi nang
• Nuôi cấy phôi kéo dài

Mechanisms

Khi quá trình trưởng thành cuối cùng đã được kích hoạt, noãn được chọc hút từ mỗi nang, thường thông qua một kim được đưa vào dưới hướng dẫn siêu âm qua ngả âm đạo, một thủ thuật có tỷ lệ chảy máu và nhiễm trùng thấp nhưng có thật (Ludwig et al., 2006). Trong phòng thí nghiệm, noãn trưởng thành được thụ tinh bằng cách đặt chúng cùng với tinh trùng di động đã được chuẩn bị (thụ tinh thông thường) hoặc, khi số lượng hoặc chức năng tinh trùng không đủ, bằng cách tiêm tinh trùng vào bào tương noãn, trong đó một tinh trùng duy nhất được tiêm vào bào tương noãn (Palermo et al., 1992). Sự thụ tinh được xác nhận bằng sự xuất hiện của hai tiền nhân. Hợp tử sau đó trải qua các phân chia phân cắt liên tiếp trong hai đến ba ngày đầu tiên và có thể cô đặc và tạo khoang để hình thành phôi nang vào ngày thứ năm đến thứ sáu; phôi có thể được chọn để chuyển ở giai đoạn phân cắt hoặc giai đoạn phôi nang (Blake et al., 2004).

Clinical relevance

Việc thu nhận và giai đoạn phòng thí nghiệm quyết định số lượng và loại phôi có sẵn, và lựa chọn giữa thụ tinh thông thường và ICSI cũng như giữa nuôi cấy giai đoạn phân cắt và giai đoạn phôi nang định hình các kết quả tiếp theo. Mục này mô tả các bước này để tham khảo và đánh giá bằng chứng; nó không phải là một quy trình phẫu thuật, gây mê hoặc phòng thí nghiệm và không đưa ra lời khuyên cá nhân hóa.

Epidemiology

Thu nhận qua ngả âm đạo là một thủ thuật thường quy với tỷ lệ biến chứng thấp trong các loạt nghiên cứu tiền cứu lớn (Ludwig et al., 2006). ICSI, được giới thiệu vào năm 1992, nhanh chóng trở thành một con đường thụ tinh tiêu chuẩn, đặc biệt đối với vô sinh do yếu tố nam (Palermo et al., 1992). Tỷ lệ phôi được nuôi cấy đến giai đoạn phôi nang trước khi chuyển đã tăng lên khi các hệ thống nuôi cấy trong phòng thí nghiệm được cải thiện (Blake et al., 2004).

Evidence & guidelines

Bằng chứng đến từ các nghiên cứu quy trình tiền cứu, các báo cáo ICSI ban đầu, và các đánh giá hệ thống Cochrane so sánh các giai đoạn nuôi cấy và chuyển phôi (Blake et al., 2004); các hiệp hội chuyên nghiệp như ESHRE và ASRM đưa ra hướng dẫn về phòng thí nghiệm và quy trình. Kỹ thuật phẫu thuật hoặc phòng thí nghiệm chi tiết không được trình bày lại ở đây.

History

IVF ban đầu dựa vào việc thu thập trứng bằng nội soi ổ bụng, như trong công trình dẫn đến ca sinh IVF đầu tiên (Steptoe & Edwards, 1978); chọc hút dưới hướng dẫn siêu âm qua ngả âm đạo sau đó trở thành phương pháp tiêu chuẩn, ít xâm lấn hơn. Sự ra đời của tiêm tinh trùng vào bào tương noãn vào năm 1992 đã thay đổi cách xử lý noãn trong phòng thí nghiệm bằng cách cho phép thụ tinh ngay cả với rất ít tinh trùng hoặc tinh trùng di động kém (Palermo et al., 1992), và những cải tiến trong môi trường nuôi cấy sau đó đã giúp việc nuôi cấy thường quy đến giai đoạn phôi nang trở nên khả thi (Blake et al., 2004).

Debates

Nuôi cấy giai đoạn phân cắt so với giai đoạn phôi nang

Nuôi cấy phôi đến giai đoạn phôi nang có thể hỗ trợ lựa chọn và cải thiện kết quả mỗi lần chuyển phôi, nhưng nó cũng có nguy cơ không có phôi nào phù hợp để chuyển; đánh giá Cochrane xem xét các đánh đổi, và giai đoạn tối ưu để chuyển phôi vẫn là một câu hỏi thực tế.

Sử dụng ICSI ngoài vô sinh do yếu tố nam

ICSI được phát triển cho vô sinh do yếu tố nam nghiêm trọng, nhưng việc sử dụng nó đã mở rộng sang các trường hợp không do yếu tố nam; liệu việc ứng dụng rộng rãi hơn này có cải thiện kết quả so với thụ tinh thông thường hay không vẫn còn đang tranh cãi, vì thủ thuật này đã được xác nhận trong bối cảnh yếu tố nam.

Key figures

• Robert Edwards
• Patrick Steptoe
• Gianpiero Palermo
• André Van Steirteghem

Seminal works

• palermo-1992
• steptoe-edwards-1978

Frequently asked questions

Thu nhận noãn có phải là một ca phẫu thuật lớn không?

Đây là một thủ thuật ngắn được thực hiện dưới hướng dẫn siêu âm và thường có một số hình thức an thần hoặc gây mê. Các nghiên cứu tiền cứu lớn báo cáo tỷ lệ biến chứng thấp như chảy máu hoặc nhiễm trùng, mặc dù nó vẫn là một thủ thuật xâm lấn; mục này không đưa ra hướng dẫn về quy trình hoặc phục hồi.

Sự khác biệt giữa IVF thông thường và ICSI là gì?

Trong IVF thông thường, tinh trùng đã được chuẩn bị được đặt cùng với noãn và sự thụ tinh xảy ra một cách tự nhiên. Trong ICSI, một tinh trùng duy nhất được tiêm trực tiếp vào noãn. ICSI được phát triển cho các trường hợp tinh trùng quá ít hoặc quá suy yếu để thụ tinh trứng mà không cần hỗ trợ.