Nhận diện hiện vật và đánh giá chất lượng

Hiện vật là một đặc điểm được nhìn thấy trên lam kính do quá trình chuẩn bị tạo ra chứ không phải do chính mô. Việc nhận diện hiện vật — và đánh giá chất lượng tổng thể của một mẫu vật — là rất cần thiết để tránh nhầm lẫn các lỗi xử lý với những phát hiện thực tế, và để các phòng thí nghiệm có thể giám sát và cải thiện phương pháp của mình.

Definition

Hiện vật trong mô học là một cấu trúc hoặc hình dạng trong mẫu mô không đại diện cho mô gốc mà được tạo ra do quá trình thu thập, cố định, xử lý, cắt lát, nhuộm hoặc gắn lam; đánh giá chất lượng là việc đánh giá và kiểm soát có hệ thống chất lượng mẫu vật để phát hiện và giảm thiểu các hiện vật đó.

Scope

Chủ đề này bao gồm các loại hiện vật mô học phổ biến phát sinh từ mỗi giai đoạn của quy trình làm việc (cố định, xử lý, cắt lát, nhuộm, gắn lam), nguyên tắc phân biệt hiện vật với cấu trúc thật, và vai trò của các kiểm soát và xác nhận trong đảm bảo chất lượng. Đây là một tài liệu tham khảo về phương pháp luận và không cung cấp hướng dẫn diễn giải lâm sàng.

Core questions

• Làm thế nào để phân biệt một hiện vật của mẫu vật với một đặc điểm mô thật?
• Ở những bước nào của quy trình làm việc mà các hiện vật chính phát sinh?
• Các kiểm soát và xác nhận hỗ trợ việc diễn giải đáng tin cậy như thế nào?
• Các phòng thí nghiệm giám sát và duy trì chất lượng mẫu vật như thế nào?

Key concepts

• Hiện vật cố định (ví dụ: co rút, sắc tố)
• Hiện vật xử lý và nhúng
• Hiện vật cắt lát (nếp gấp, chatter, vết dao)
• Hiện vật nhuộm và gắn lam
• Phân biệt hiện vật với cấu trúc thật
• Kiểm soát dương tính và âm tính
• Đảm bảo chất lượng và xác nhận xét nghiệm

Mechanisms

Hiện vật có thể được tạo ra ở bất kỳ giai đoạn nào của quy trình làm việc, và việc nhận diện chúng phụ thuộc vào việc biết mỗi bước có thể thất bại như thế nào. Cố định chậm trễ hoặc không đầy đủ cho phép tự phân hủy và có thể để lại sắc tố hoặc gây co rút; xử lý khắc nghiệt có thể làm cứng quá mức hoặc làm biến dạng mô; cắt lát có thể tạo ra nếp gấp, vết rách, nén (chatter), hoặc vết dao; và nhuộm hoặc gắn lam có thể để lại kết tủa, bọt khí, hoặc màu không đều. Bởi vì những đặc điểm này phát sinh từ quy trình chứ không phải từ mô, chúng thường có các mẫu hình học hoặc phân bố đặc trưng — đều đặn, trên toàn bộ lát cắt, hoặc nằm ở các cạnh — đánh dấu chúng là không sinh học. Đánh giá chất lượng bảo vệ việc diễn giải bằng cách tiêu chuẩn hóa các quy trình và bằng cách chạy các kiểm soát: đặc biệt, các kiểm soát dương tính và âm tính là trung tâm để diễn giải các xét nghiệm dựa trên kháng thể, và việc xác nhận phân tích chính thức được khuyến nghị cho các xét nghiệm như vậy (Fitzgibbons et al., 2014). Hướng dẫn thực hành tốt chung để nhận diện và ngăn ngừa hiện vật được tổng hợp trong các tài liệu tham khảo về kỹ thuật mô học (Suvarna et al., 2018; Kiernan, 2015; Rolls, 2012).

Clinical relevance

Việc phân biệt hiện vật với các phát hiện thực tế và duy trì chất lượng mẫu vật là những điều kiện tiên quyết để có được sự diễn giải đáng tin cậy dựa trên mô trong cả chẩn đoán và nghiên cứu. Mục này giải thích các biện pháp bảo vệ phương pháp luận này về mặt khái niệm; đây là một định hướng tham khảo và không phải là cơ sở cho các quyết định chẩn đoán hoặc điều trị cá nhân.

Evidence & guidelines

Đảm bảo chất lượng cho các xét nghiệm dựa trên mô được hỗ trợ bởi các hướng dẫn chuyên môn như hướng dẫn của College of American Pathologists về xác nhận phân tích các xét nghiệm hóa mô miễn dịch (Fitzgibbons et al., 2014), và các phương pháp thực hành tốt để ngăn ngừa và nhận diện hiện vật được tổng hợp trong các tài liệu tham khảo về kỹ thuật mô học (Suvarna et al., 2018; Kiernan, 2015; Rolls, 2012).

History

Khi các phương pháp nhuộm và xử lý nhân lên trong suốt thế kỷ XX, việc phân biệt cấu trúc thật với các hình dạng do chuẩn bị gây ra đã trở thành một kỹ năng được công nhận, được ghi lại trong các sách hướng dẫn kỹ thuật mô học. Sự nhấn mạnh sau này vào tiêu chuẩn hóa, kiểm soát và xác nhận chính thức — được minh họa bằng hướng dẫn về xác nhận phân tích các xét nghiệm hóa mô miễn dịch (Fitzgibbons et al., 2014) — phản ánh vai trò ngày càng tăng của đảm bảo chất lượng khi các xét nghiệm dựa trên mô trở nên trung tâm trong chẩn đoán.

Seminal works

• fitzgibbons-2014

Frequently asked questions

Hiện vật mô học là gì?

Đó là một đặc điểm được nhìn thấy trên lam kính được tạo ra bởi quá trình chuẩn bị — ví dụ như một nếp gấp, một kết tủa, hoặc sự co rút — chứ không phải là một phần của mô gốc, và nó không được nhầm lẫn với một phát hiện thực tế.

Tại sao các kiểm soát lại quan trọng trong đánh giá chất lượng?

Các kiểm soát dương tính và âm tính cho thấy liệu một thuốc nhuộm hoặc xét nghiệm có hoạt động như mong đợi hay không, giúp phân biệt kết quả thật với lỗi kỹ thuật hoặc tín hiệu không đặc hiệu và hỗ trợ việc diễn giải đáng tin cậy.