Histoquímica e Coloração de Rotina

A histoquímica utiliza reações químicas numa secção de tecido para conferir contraste ótico a estruturas que, de outra forma, seriam quase transparentes. A coloração de rotina — sobretudo o par hematoxilina e eosina (H&E) — fornece o mapa de cores diário do tecido, enquanto as colorações especiais e as reações histoquímicas revelam seletivamente substâncias particulares, como hidratos de carbono, lípidos, fibras ou microrganismos.

Definition

Histoquímica é o uso de reações químicas in situ para localizar e identificar constituintes químicos específicos de células e tecidos; coloração de rotina é a aplicação de combinações padrão de corantes, principalmente hematoxilina e eosina, para fornecer contraste estrutural geral em secções de tecido.

Scope

Este tópico abrange os princípios da ligação de corantes e das reações histoquímicas, o método H&E como a ferramenta de rotina, e as famílias de colorações especiais utilizadas para demonstrar componentes teciduais específicos. É uma referência metodológica e não fornece orientação para interpretação clínica.

Core questions

• Como os corantes se ligam seletivamente aos componentes do tecido para criar contraste?
• O que os componentes hematoxilina e eosina coram, e porquê?
• Como as reações histoquímicas demonstram substâncias específicas como hidratos de carbono ou lípidos?
• Quando uma coloração especial é escolhida em vez da H&E de rotina?

Key concepts

• Afinidade corante-tecido e interações de carga
• Basofilia e acidofilia
• Hematoxilina e eosina (H&E)
• Mordentes e metacromasia
• Histoquímica de hidratos de carbono (e.g. PAS)
• Colorações de tecido conjuntivo e lípidos
• Histoquímica enzimática

Mechanisms

A coloração depende de interações seletivas entre corantes e constituintes teciduais. Muitos corantes básicos (catiónicos), como a hematoxilina, ligam-se a componentes carregados negativamente — ácidos nucleicos e estruturas ácidas — tornando-os basofílicos, enquanto corantes ácidos (aniónicos), como a eosina, ligam-se a proteínas carregadas positivamente, tornando-as acidofílicas; esta lógica de carga subjaz aos familiares núcleos azuis e citoplasma rosa da H&E. Alguns corantes requerem um mordente (frequentemente um ião metálico) para fazer a ponte entre o corante e o tecido, e certos corantes mudam de cor quando ligados a substratos particulares (metacromasia). Os métodos histoquímicos vão mais longe ao explorar reações químicas definidas in situ — por exemplo, oxidando dióis vicinais a aldeídos que são então revelados pelo reagente de Schiff para demonstrar hidratos de carbono, ou reações enzima-substrato que depositam produto colorido nos locais de atividade enzimática. A base teórica destas reações é tratada em referências padrão de histoquímica (Pearse, 1980; Lillie & Fullmer, 1976).

Clinical relevance

A coloração de rotina e especial produz as lâminas interpretadas na histologia diagnóstica e de pesquisa, e reconhecer o que cada coloração demonstra faz parte da leitura da evidência tecidual. Esta entrada explica os métodos conceptualmente e não constitui uma base para decisões individuais de diagnóstico ou tratamento.

Evidence & guidelines

Os princípios e protocolos de coloração estão consolidados em referências de longa data de histotecnologia e histoquímica (Suvarna et al., 2018; Kiernan, 2015; Pearse, 1980; Lillie & Fullmer, 1976). Os programas de qualidade laboratorial definem adicionalmente controlos e critérios de aceitação para o desempenho da coloração, tratados no tópico de avaliação da qualidade.

History

A coloração de tecidos cresceu rapidamente após a disponibilidade de corantes de anilina sintéticos na segunda metade do século XIX, e a combinação hematoxilina-eosina estabeleceu-se como o método de rotina. Ao longo do século XX, a histoquímica desenvolveu-se numa disciplina sistemática de reações químicas in situ, codificada em obras de referência por Lillie e Fullmer (1976) e Pearse (1980), estendendo a coloração do contraste puramente estrutural à demonstração de grupos químicos definidos e atividades enzimáticas.

Key figures

• A. G. Everson Pearse
• Ralph Lillie

Seminal works

• pearse-1980
• lillie-1976

Frequently asked questions

O que a hematoxilina e a eosina coram individualmente?

A hematoxilina, com um mordente, cora estruturas ácidas/basofílicas, como núcleos celulares, de azul-púrpura, enquanto a eosina cora componentes básicos/acidofílicos, como o citoplasma e muitas proteínas extracelulares, em tons de rosa.

Como a histoquímica difere da coloração de rotina?

A coloração de rotina confere contraste estrutural geral através da afinidade do corante, enquanto a histoquímica utiliza reações químicas definidas in situ para localizar substâncias específicas, como hidratos de carbono, lípidos ou atividades enzimáticas.