Mykologische Diagnostik und Labormethoden
Die mykologische Diagnostik ist die Labordisziplin, die Pilze, die menschliche Krankheiten verursachen, nachweist, identifiziert und charakterisiert. Sie umfasst klassische Methoden wie Kultur und Mikroskopie, immunologische Antigen- und Antikörpertests sowie molekulare Techniken einschließlich PCR und DNA-Sequenzierung, die zusammengeführt werden, um eine Pilzinfektion zu bestätigen oder auszuschließen und den verantwortlichen Organismus zu benennen.
Definition
Mykologische Diagnostik und Labormethoden sind die Techniken und Verfahren, die im klinischen Labor eingesetzt werden, um medizinisch wichtige Pilze aus Patientenproben zu gewinnen, zu visualisieren, zu identifizieren und anderweitig zu charakterisieren, einschließlich phänotypischer, immunologischer und molekularer Ansätze.
Scope
Dieser Bereich führt den Leser in die Hauptfamilien der Labormethoden ein, die in der medizinischen Mykologie verwendet werden: das Züchten und Isolieren von Pilzen in Kultur, deren Untersuchung und Färbung unter dem Mikroskop, die Amplifikation und Sequenzierung ihrer Nukleinsäuren, der Nachweis ihrer Antigene und Wirtsantikörper sowie die Messung von Biomarkern und Biofilm-bezogenen Merkmalen. Er fasst diese als diagnostische Methodik und nicht als Behandlungsleitfaden zusammen und verweist für Details auf die entsprechenden Themenknoten.
Sub-topics
Core questions
- Ist ein Pilz in dieser Probe vorhanden, und ist er ein Kontaminant oder ein echter Erreger?
- Welche Gattung oder Art ist verantwortlich, und wie sicher kann sie benannt werden?
- Welche Kombination aus Kultur, Mikroskopie, Antigen- und molekularen Methoden passt am besten zur klinischen Fragestellung und zum Probentyp?
- Wie werden positive und negative Laborbefunde innerhalb standardisierter Definitionen invasiver Pilzerkrankungen interpretiert?
Key concepts
- Phänotypische versus molekulare Identifizierung
- Direkter Nachweis versus kulturbasierte Gewinnung
- Sensitivität und Spezifität von Pilztests
- Gesicherte, wahrscheinliche und mögliche invasive Pilzerkrankung
- Probenqualität und Kontaminationskontrolle
- Polyphasische Identifizierung
Mechanisms
Die Labormykologie kombiniert komplementäre Signale. Die Kultur gewinnt lebensfähige Organismen und ermöglicht die morphologische Identifizierung und Empfindlichkeitstestung, ist aber bei invasiven Erkrankungen oft langsam und unempfindlich. Mikroskopie und Histopathologie visualisieren Pilzelemente direkt in Proben und liefern schnelle Hinweise auf Gewebeinvasionen. Antigen-Assays und Serologie weisen Pilzzellwandkomponenten oder Wirtsantikörperreaktionen nach, ohne dass ein Wachstum erforderlich ist. Molekulare Methoden amplifizieren und sequenzieren konservierte oder spezies-spezifische DNA, und die Massenspektrometrie profiliert Proteine, was eine schnelle und präzise Identifizierung ermöglicht. Die moderne Diagnose ist polyphasisch und integriert mehrere dieser Methoden, wobei standardisierte Konsensdefinitionen festlegen, wie die Ergebnisse zu Kategorien invasiver Pilzerkrankungen zusammengefasst werden.
Clinical relevance
Die hier zusammengefassten Methoden generieren die Evidenz, auf deren Grundlage Pilzinfektionen in der klinischen Praxis und Forschung erkannt und benannt werden. Das Verständnis ihrer Stärken und Grenzen hilft bei der Bewertung diagnostischer Berichte und Studienergebnisse. Dieser Eintrag ist deskriptives Referenzmaterial darüber, wie Pilzdiagnosen erstellt werden, und kein Protokoll für die Testung, Verschreibung oder Behandlung einzelner Patienten.
Evidence & guidelines
Konsensdefinitionen der EORTC und des Mycoses Study Group Education and Research Consortium standardisieren, wie mykologische und klinische Befunde zu Kategorien invasiver Pilzerkrankungen kombiniert werden, und bieten einen gemeinsamen Rahmen für Diagnose und Forschung. Referenztexte wie der Atlas of Clinical Fungi katalogisieren die morphologischen Merkmale, die bei der phänotypischen Identifizierung verwendet werden, während Übersichten zur Histopathologie und Massenspektrometrie die Rolle neuerer Identifizierungsmethoden dokumentieren.
History
Die diagnostische Mykologie entwickelte sich aus der Kultur und Mikroskopie des neunzehnten und zwanzigsten Jahrhunderts, bei der Pilze auf selektiven Medien gewonnen und anhand der Kolonie- und mikroskopischen Morphologie identifiziert wurden. Das späte zwanzigste Jahrhundert fügte Immunoassays für Pilzantigene und Wirtsantikörper hinzu, und der Aufstieg von PCR, DNA-Sequenzierung ribosomaler Regionen und MALDI-TOF-Massenspektrometrie transformierte die Identifizierung hin zu molekularer und proteomischer Präzision, während Konsensdefinitionen die Interpretation standardisierten.
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Frequently asked questions
- Warum werden mehrere verschiedene Methoden zur Diagnose einer Pilzinfektion eingesetzt?
- Keine einzelne Methode ist für jede Situation sowohl schnell als auch zuverlässig. Kultur, Mikroskopie, Antigentests und molekulare Tests weisen jeweils einen anderen Aspekt des Pilzes nach, sodass deren Kombination die Chance auf eine korrekte und zeitnahe Diagnose verbessert.
- Was ist der Unterschied zwischen dem Nachweis eines Pilzes und seiner Identifizierung?
- Der Nachweis stellt fest, dass ein Pilz vorhanden ist, zum Beispiel durch das Erkennen von Pilzelementen oder den Nachweis eines Antigens. Die Identifizierung benennt die Gattung oder Art, was in der Regel Kulturmorphologie, Sequenzierung oder Massenspektrometrie erfordert.