Pilzidentifizierung und Antimykotika-Testung

Die Pilzidentifizierung und Antimykotika-Testung sind Labormethoden, die Hefen und Schimmelpilze, die menschliche Infektionen verursachen, nachweisen und benennen sowie deren Empfindlichkeit gegenüber Antimykotika messen. Die diagnostische Mykologie kombiniert Mikroskopie und Kultur mit dem Nachweis von Antigenen und Antikörpern, molekularen Methoden und proteomischer Identifizierung und ergänzt dies durch In-vitro-Empfindlichkeitstests für Antimykotika.

Definition

Die Pilzidentifizierung ist die Laborbestimmung der Spezies einer Hefe oder eines Schimmelpilzes aus einer klinischen Probe mittels Mikroskopie, Kultur, Serologie, molekularer oder proteomischer Methoden; die Antimykotika-Testung ist die In-vitro-Messung der Empfindlichkeit eines Pilzisolats gegenüber Antimykotika.

Scope

Der Eintrag behandelt die direkte Mikroskopie und Kultur, den Antigen- und Antikörpernachweis (serologisch), die Nukleinsäure- und proteomische Identifizierung von Pilzen sowie die Antimykotika-Empfindlichkeitstestung mit ihren interpretativen Breakpoints. Er behandelt diese als Labormethoden und bietet keine Auswahl oder Dosierung von Antimykotika für Patienten an.

Core questions

• Ist ein Pilz in dieser Probe vorhanden, und welche Spezies ist es?
• Welche Methoden – Mikroskopie, Kultur, Antigen- oder Antikörpernachweis, molekulare Assays oder Massenspektrometrie – weisen ihn am besten nach und identifizieren ihn?
• Ist das Isolat empfindlich gegenüber relevanten Antimykotika, und wie wird das gemessen und interpretiert?
• Was sind die Grenzen der Pilzdiagnostik hinsichtlich Sensitivität, Geschwindigkeit und Standardisierung?

Key concepts

• Direkte Mikroskopie (KOH, Calcofluor, Histopathologie)
• Pilzkultur und Morphologie
• Antigennachweis (z.B. Galactomannan, Kryptokokken-Antigen, Beta-D-Glucan)
• Antikörper (serologische) Testung
• Molekulare und proteomische Identifizierung
• MALDI-TOF-Massenspektrometrie von Pilzen
• Antimykotika-Empfindlichkeitstestung und Breakpoints
• Hefen versus Schimmelpilze

Mechanisms

Die diagnostische Mykologie weist Pilze nach, indem sie diese in Proben mit Färbungen und Mikroskopie sichtbar macht, sie in Kultur züchtet und Kolonie- und mikroskopische Morphologie beurteilt, sowie durch kultur-unabhängige Methoden. Antigen-Assays weisen zirkulierende Pilzzellwand- oder Kapselkomponenten nach, während Antikörpertests die Wirtsreaktion detektieren; zusammen mit molekularen Assays und proteomischer Identifizierung erweitern diese den Nachweis auf Organismen, die langsam wachsen oder schwer zu kultivieren sind (Kozel & Wickes, 2014). Die Spezies-Identifizierung nutzt zunehmend die MALDI-TOF-Massenspektrometrie, die das Proteinspektrum eines Pilzisolats mit einer Referenzdatenbank abgleicht (Clark et al., 2013). Die Antimykotika-Empfindlichkeitstestung misst dann die hemmende Aktivität von Antimykotika gegen ein Isolat und interpretiert diese anhand von Breakpoints; die Standardisierung dieser Testung und deren Bezug zu den Ergebnissen ist ein sich entwickelnder Prozess (Rex & Pfaller, 2002). Fachliche Leitlinien ordnen diese Labormethoden in die umfassendere diagnostische Bewertung von Pilzerkrankungen ein (Pappas et al., 2016).

Clinical relevance

Die Ergebnisse der Pilzidentifizierung und Empfindlichkeit tragen zur klinischen Entscheidungsfindung bei invasiven und oberflächlichen Pilzinfektionen bei und informieren über den umsichtigen Einsatz von Antimykotika. Dieser Eintrag beschreibt, wie diese Laborergebnisse erstellt und interpretiert werden; er ist Referenzmaterial und keine Grundlage für die Auswahl oder Dosierung einer antimykotischen Therapie für eine Einzelperson, was durch klinische Leitlinien und das behandelnde Team geregelt wird.

Epidemiology

Die diagnostische Mykologie unterstützt die Überwachung von Pilzpathogenen und aufkommenden Antimykotika-Resistenzen, einschließlich Verschiebungen bei den für Infektionen wie Candidiasis verantwortlichen Spezies. Leitliniendokumente spiegeln wider, wie Labordiagnostik und Empfindlichkeitsdaten das Management auf Populations- und individueller Ebene informieren (Pappas et al., 2016).

History

Die mykologische Diagnose beruhte lange Zeit auf Mikroskopie und langsamer Kultur mit morphologischer Identifizierung. Antigen- und Antikörper-Assays, dann molekulare und proteomische Methoden, erweiterten und beschleunigten den Nachweis (Kozel & Wickes, 2014), während sich die Antimykotika-Empfindlichkeitstestung im späten 20. und frühen 21. Jahrhundert von einem Forschungsinstrument zu einem standardisierten klinischen Assay entwickelte (Rex & Pfaller, 2002).

Seminal works

• kozel-2014
• rex-2002
• pappas-2016

Frequently asked questions

Wie werden Pilze nachgewiesen, wenn die Kultur langsam oder negativ ist?

Laboratorien verwenden kultur-unabhängige Methoden – Antigen-Assays (wie Kryptokokken-Antigen, Galactomannan oder Beta-D-Glucan), Antikörpertests und molekulare Assays –, um Pilze nachzuweisen, die langsam wachsen oder aus einer bestimmten Probe nicht kultiviert werden können (Kozel & Wickes, 2014).

Was ist die Antimykotika-Empfindlichkeitstestung?

Es ist die In-vitro-Messung, ob ein Antimykotikum ein Pilzisolat hemmt, interpretiert anhand von Breakpoints. Die Standardisierung dieser Testung und deren Verknüpfung mit klinischen Ergebnissen war ein schrittweiser Prozess (Rex & Pfaller, 2002).