طرق اختبار الحساسية للمضادات الحيوية

اختبار الحساسية للمضادات الحيوية (AST) هو مجموعة من الطرق المختبرية الموحدة المستخدمة لتحديد ما إذا كان الكائن الحي الدقيق يتأثر أو يُقتل بواسطة عامل مضاد للميكروبات وبأي تركيز. يتم تفسير مخرجاته، التي عادةً ما تكون الحد الأدنى للتركيز المثبط (MIC) أو قطر منطقة التثبيط، مقابل نقاط القطع المنشورة لتصنيف الكائن الحي على أنه حساس أو متوسط الحساسية أو مقاوم.

Definition

اختبار الحساسية للمضادات الحيوية هو القياس الموحد لاستجابة الكائنات الحية الدقيقة في المختبر للعوامل المضادة للميكروبات، ويُعبر عنه بـ MIC أو قطر المنطقة ويُفسر مقابل نقاط القطع لتحديد فئة حساسة أو متوسطة الحساسية أو مقاومة.

Scope

يتناول هذا المدخل طرق اختبار الحساسية للمضادات الحيوية الرئيسية، والكميات التي تقيسها، وكيفية تفسير النتائج. ويتطرق إلى طرق التخفيف (التخفيف الدقيق في المرق، التخفيف في الآجار)، وطرق الانتشار (انتشار القرص، الشريط المتدرج)، والأنظمة الآلية، بالإضافة إلى أنظمة نقاط القطع الخاصة بـ CLSI و EUCAST. وهو منهجي ولا يقدم توصيات للجرعات أو العلاج.

Core questions

• ما هو تركيز المضاد الحيوي الذي يثبط نمو هذا الكائن الحي؟
• كيف تختلف طرق التخفيف والانتشار فيما تقيسه وكيف تُقرأ؟
• كيف تُترجم قيمة MIC المقاسة أو قطر المنطقة إلى فئة سريرية؟

Key concepts

• الحد الأدنى للتركيز المثبط (MIC)
• التخفيف الدقيق في المرق (طريقة مرجعية)
• التخفيف في الآجار
• انتشار القرص (Kirby-Bauer)
• انتشار التدرج (شريط تدرج MIC)
• قطر منطقة التثبيط
• نقاط القطع السريرية (CLSI, EUCAST)
• فئات الحساسية-المتوسطة-المقاومة
• سلالات مراقبة الجودة واللقاح الموحد

Mechanisms

تشترك طرق اختبار الحساسية للمضادات الحيوية في منطق مشترك: يتم تعريض لقاح موحد من الكائن الحي لتركيزات محددة من مضاد للميكروبات تحت ظروف مضبوطة، ويتم قراءة تثبيط النمو. تحدد طرق التخفيف (التخفيف الدقيق في المرق، والذي يعتبر طريقة مرجعية، والتخفيف في الآجار) أقل تركيز يثبط النمو المرئي، وهو الـ MIC. تضع طرق الانتشار الدواء في الآجار بحيث ينتشر ليشكل تدرجًا في التركيز: يقرأ انتشار القرص قطر منطقة التثبيط، بينما تقرأ الشرائط المتدرجة الـ MIC حيث يتقاطع القطع الناقص للتثبيط مع مقياس معاير. تولد الأنظمة التجارية الآلية قيم MIC من التخفيف الدقيق في المرق والكشف البصري أو العكر للنمو. تُفسر النتائج مقابل نقاط القطع من CLSI أو EUCAST، وتتحقق القواعد المتخصصة من النتائج للتأكد من اتساقها مع الأنماط الظاهرية المعروفة للمقاومة (jorgensen-2009; leclercq-2013; clsi-m100; eucast-breakpoints).

Clinical relevance

تُفيد نتائج الحساسية في إدارة الأمراض المعدية، والإشراف على استخدام المضادات الحيوية، والمراقبة، وتُستخدم في إعداد تقارير المضادات الحيوية التراكمية التي تصدرها المختبرات. يشرح هذا المدخل كيفية إنتاج وتفسير تلك النتائج كمادة مرجعية؛ وهو ليس مصدرًا لقرارات التشخيص أو الوصف الفردية.

Epidemiology

نظرًا لتوحيد اختبار الحساسية للمضادات الحيوية، فإن النتائج قابلة للمقارنة عبر المختبرات وعلى مر الزمن، مما يتيح تجميعها في تقارير مضادات حيوية محلية وفي مراقبة المقاومة الوطنية والدولية. يؤثر اختيار الطريقة، وإصدار نقاط القطع، ومراقبة الجودة جميعها على قابلية مقارنة هذه البيانات (clsi-m100; eucast-breakpoints).

History

تطور اختبار الحساسية في العقود التي تلت إدخال المضادات الحيوية. تم توحيد طريقة انتشار القرص في الستينيات وأصبحت تستخدم على نطاق واسع لبساطتها، بينما وفرت طرق التخفيف في المرق والآجار قيم MIC كمية. بمرور الوقت، قامت الهيئات المعيارية، ولا سيما CLSI في الولايات المتحدة و EUCAST في أوروبا، بإضفاء الطابع الرسمي على الطرق ونقاط القطع ومراقبة الجودة، ووسعت الأنظمة الآلية والشرائط المتدرجة الممارسة الروتينية (jorgensen-2009).

Debates

الاختلافات بين نقاط القطع لـ CLSI و EUCAST

تحدد CLSI و EUCAST نقاط القطع باستخدام عمليات ذات صلة ولكنها متميزة، وقد تختلف تصنيفاتهما وتعريف الفئة المتوسطة؛ التنسيق وتفسير النتائج المتضاربة هي قضايا منهجية مستمرة.

قابلية التكاثر بالقرب من نقاط القطع

تحمل قيم MIC المقاسة تباينًا متأصلًا، لذا قد تُصنف النتائج القريبة من نقطة القطع بشكل مختلف عبر التكرارات أو الطرق، مما يعقد تفسير الكائنات الحية الحدودية.

Seminal works

• jorgensen-2009
• leclercq-2013
• clsi-m100

Frequently asked questions

ما هو الحد الأدنى للتركيز المثبط (MIC)؟

الـ MIC هو أقل تركيز لمضاد حيوي يمنع النمو المرئي للكائن الحي تحت ظروف موحدة؛ وهو النتيجة الكمية التي تهدف طرق التخفيف إلى تحديدها.

لماذا توجد طرق مختلفة لاختبار الحساسية للمضادات الحيوية؟

تعطي طرق التخفيف قيمة MIC رقمية، وطرق الانتشار مثل انتشار القرص بسيطة وغير مكلفة، وتقدم الأنظمة الآلية السرعة والإنتاجية؛ تختار المختبرات من بينها بناءً على الكائن الحي، والأدوية المختبرة، والموارد المتاحة.

ماذا تعني مصطلحات حساس، متوسط الحساسية، ومقاوم؟

هي فئات تفسيرية تُحدد بمقارنة قيمة MIC المقاسة أو قطر المنطقة بنقاط القطع التي تحددها الهيئات المعيارية؛ وهي تلخص احتمالية استجابة الكائن الحي لعامل ما في الظروف المعتادة وتُعرف منهجيًا وليس كنصيحة علاجية.