Các phương pháp huyết thanh học và miễn dịch học

Các phương pháp huyết thanh học và miễn dịch học chẩn đoán nhiễm ký sinh trùng một cách gián tiếp, bằng cách phát hiện phản ứng kháng thể của vật chủ đối với ký sinh trùng hoặc các kháng nguyên có nguồn gốc từ ký sinh trùng trong máu, phân hoặc các dịch cơ thể khác. Chúng đặc biệt có giá trị khi khó tìm thấy bản thân ký sinh trùng bằng kính hiển vi, chẳng hạn như trong các bệnh nhiễm trùng mô sâu, nhiễm trùng mật độ thấp hoặc các sinh vật được thải ra không liên tục.

Definition

Các phương pháp huyết thanh học và miễn dịch học là các xét nghiệm trong phòng thí nghiệm phát hiện kháng thể của vật chủ chống lại ký sinh trùng hoặc các kháng nguyên có nguồn gốc từ ký sinh trùng, sử dụng các phản ứng miễn dịch hóa học như ELISA, miễn dịch huỳnh quang và miễn dịch sắc ký để suy ra nhiễm trùng hoặc phơi nhiễm.

Scope

Chủ đề này bao gồm các xét nghiệm chính dựa trên kháng thể và kháng nguyên được sử dụng trong ký sinh trùng học, chủ yếu là xét nghiệm miễn dịch liên kết enzyme (ELISA) và các xét nghiệm miễn dịch liên quan, cùng với những thách thức trong việc giải thích về phản ứng chéo, sự tồn tại của kháng thể sau khi chữa khỏi và sự phân biệt giữa phơi nhiễm và nhiễm trùng đang hoạt động. Nó coi đây là phương pháp chẩn đoán và không cung cấp các quy trình xét nghiệm hoặc điều trị lâm sàng.

Core questions

• Kết quả kháng thể dương tính cho thấy nhiễm trùng đang hoạt động hay chỉ phơi nhiễm trong quá khứ?
• Khi nào phát hiện kháng nguyên được ưu tiên hơn phát hiện kháng thể?
• Phản ứng chéo giữa các ký sinh trùng có liên quan hạn chế tính đặc hiệu như thế nào?
• Các dấu hiệu như IgM và ái lực IgG được sử dụng như thế nào để ước tính thời điểm nhiễm trùng?

Key concepts

• Phát hiện kháng thể so với phát hiện kháng nguyên
• Xét nghiệm miễn dịch liên kết enzyme (ELISA)
• Xét nghiệm miễn dịch huỳnh quang và miễn dịch sắc ký (dòng chảy ngang)
• Phản ứng chéo và tính đặc hiệu
• IgM, IgG và ái lực IgG để phân giai đoạn nhiễm trùng
• Sự tồn tại của kháng thể sau khi điều trị khỏi ký sinh trùng
• Phát hiện kháng nguyên trong phân và kháng nguyên lưu hành

Mechanisms

Các xét nghiệm kháng thể cố định kháng nguyên ký sinh trùng và đo lượng globulin miễn dịch của vật chủ liên kết với nó, điển hình là thông qua một kháng thể thứ cấp được gắn enzyme tạo ra tín hiệu màu tỷ lệ với lượng kháng thể, như trong ELISA. Các xét nghiệm kháng nguyên đảo ngược logic này, bắt giữ các phân tử có nguồn gốc từ ký sinh trùng bằng các kháng thể đặc hiệu để chứng minh rằng sinh vật thực sự có mặt, điều này theo dõi chặt chẽ hơn tình trạng nhiễm trùng đang hoạt động. Việc giải thích phụ thuộc vào động học của phản ứng miễn dịch: IgM có xu hướng đánh dấu nhiễm trùng gần đây, IgG tồn tại và có thể cho thấy phơi nhiễm trong quá khứ, và độ bền liên kết của IgG (ái lực) có thể giúp phân biệt nhiễm trùng gần đây với nhiễm trùng đã hình thành, như được sử dụng trong bệnh toxoplasma.

Clinical relevance

Các xét nghiệm huyết thanh học và miễn dịch học mở rộng chẩn đoán đến các bệnh nhiễm trùng mà kính hiển vi phát hiện kém và được sử dụng rộng rãi trong giám sát và sàng lọc; việc hiểu một kết quả dương tính chứng minh điều gì và không chứng minh điều gì là trọng tâm để giải thích chúng. Mục này mô tả các phương pháp và giới hạn giải thích của chúng như bằng chứng và không thay thế cho các quy trình phòng thí nghiệm hoặc quyết định lâm sàng.

Epidemiology

Vì kháng thể có thể tồn tại lâu sau khi nhiễm trùng đã khỏi, các cuộc khảo sát huyết thanh học đo lường mức độ phơi nhiễm tích lũy trong một quần thể hơn là nhiễm trùng hiện tại, một sự phân biệt định hình cách dữ liệu huyết thanh học được sử dụng trong việc lập bản đồ các bệnh ký sinh trùng như bệnh toxoplasma.

History

Chẩn đoán miễn dịch trong ký sinh trùng học đã phát triển trong suốt thế kỷ XX từ các xét nghiệm cố định bổ thể và kết tủa sang các xét nghiệm được tiêu chuẩn hóa hơn. Mô tả về ELISA của Engvall và Perlmann vào năm 1971 đã cung cấp một nền tảng mạnh mẽ, định lượng và có thể mở rộng, trở thành trung tâm của chẩn đoán huyết thanh học, và việc bổ sung sau đó các định dạng bắt giữ kháng nguyên và dựa trên ái lực đã tinh chỉnh khả năng phân biệt nhiễm trùng đang hoạt động với nhiễm trùng trong quá khứ.

Debates

Huyết thanh học dương tính có nghĩa là nhiễm trùng đang hoạt động không?

Sự tồn tại của kháng thể có nghĩa là kết quả dương tính có thể phản ánh phơi nhiễm trong quá khứ chứ không phải bệnh hiện tại, vì vậy các xét nghiệm kháng thể thường được kết hợp với phát hiện kháng nguyên hoặc các dấu hiệu phân giai đoạn; việc giải thích khác nhau đáng kể tùy theo ký sinh trùng và bối cảnh lâm sàng.

Seminal works

• engvall-perlmann-1971
• robert-gangneux-2012
• ricciardi-2015

Frequently asked questions

Sự khác biệt giữa phát hiện kháng thể và kháng nguyên là gì?

Phát hiện kháng thể đo lường phản ứng miễn dịch của vật chủ và có thể phản ánh nhiễm trùng hiện tại hoặc trong quá khứ, trong khi phát hiện kháng nguyên tìm kiếm các phân tử có nguồn gốc từ ký sinh trùng và trực tiếp hơn cho thấy rằng sinh vật có mặt.

Tại sao huyết thanh học có thể phản ứng chéo giữa các ký sinh trùng khác nhau?

Các ký sinh trùng có liên quan có thể chia sẻ các yếu tố quyết định kháng nguyên, vì vậy các kháng thể được tạo ra chống lại một loại có thể liên kết với kháng nguyên của loại khác, làm giảm tính đặc hiệu; các xét nghiệm được thiết kế và giải thích với giới hạn này trong tâm trí.