Yüzey Plazmon Rezonansı
Surface Plasmon Resonance · Ayrıca şöyle bilinir: SPR, surface plasmon, SPR biosensing
Yüzey Plazmon Rezonansı (YPR), ligand bağlanmasıyla oluşan kırılma indisi değişikliklerini ölçerek bir sensör yüzeyindeki biyomoleküler etkileşimleri algılamak ve izlemek için kullanılan gerçek zamanlı, etiketsiz bir tekniktir. 1971'de Kretschmann tarafından geliştirilen ve 1983'te Liedberg, Nylander ve Lundström tarafından biyosensör uygulamalarına uyarlanan YPR, günümüzde protein etkileşimleri, antikor-antijen tanıma ve ilaç keşfi alanlarında bağlanma kinetiğini (birleşme ve ayrışma hızları) ve denge bağlanma sabitlerini ölçmek için altın standarttır.
Tam yöntemi oku
Bu bölümü okumak için ücretsiz hesapla giriş yapın.
Yöntem haritası
İlişkili yöntemlerin komşuluğu — keşfetmek için bir düğüm seçin.
Ne zaman kullanılır
Herhangi bir biyomoleküler etkileşim için bağlanma kinetiğini ve afinitesini ölçmek üzere YPR'yi uygulayın: protein-ligand, protein-protein, antikor-antijen veya hücre-hücre etkileşimleri. YPR, bağlanan partnerlerden birinin (analit) sensör yüzeyine sabitlenmesini gerektirir; bu, kinetikleri çözelti ölçümlerine kıyasla etkileyebilir. YPR, yüzlerce ligandı taramak, bağlanmayı optimize etmek ve yapısal modelleri doğrulamak için idealdir.
Güçlü yönler & sınırlılıklar
- Etiketsiz: floresan, radyoaktif veya enzimatik etiket gerekmez; doğrudan kırılma indisi değişimini ölçer
- Gerçek zamanlı kinetikler: hem birleşme (ka) hem de ayrışma (kd) hızlarını tek bir deneyde yakalar
- Yüksek verimli yetenekli: sensör dizileri veya çoklu formatlar kullanarak paralel olarak birden çok deney
- Numune tüketimi yok: analit çözeltisi çipin üzerinden geçer ve gerekirse toplanabilir
- Bağlanan partnerlerden birinin sabitlenmesini gerektirir; yapışma kimyası bağlanmayı bozabilir veya sterik etkiler yaratabilir
- Sensör yüzeyine spesifik olmayan adsorpsiyon sonuçları karıştırabilir
- Düşük molekül ağırlıklı ligandlar (< 500 Da) küçük kırılma indisi değişiklikleri üretir, hassasiyeti azaltır
- Temel çizgi sürüklenmesi ve sensör yaşlanması uzun vadeli tekrarlanabilirliği etkiler
SSS
YPR bağlanma kinetiğini neden doğrudan ölçebilir?
YPR, sensör yüzeyindeki kırılma indisi değişikliklerini izleyerek bağlanma ve ayrılma olaylarını gerçek zamanlı olarak algılar. Birleşme hızı (ka), ligand enjekte edildiğinde yükselen fazdan; ayrışma hızı (kd), ligand çıkarıldığında düşen fazdan bellidir. Gerçek denge sabiti Kd = kd/ka her ikisini birleştirir.
Kinetik ve kararlı durum bağlanma sabiti belirlemesi arasındaki fark nedir?
Kinetik Kd = kd/ka, ayrışma ve birleşme hızlarının oranından çıkarılır. Kararlı durum Kd, denge (plato fazı) bağlanmasını ligand konsantrasyonuna göre uyarlayarak belirlenir. Her iki yöntem de Kd'yi verir, ancak kinetik analiz mekanizma hakkında ek bilgi sağlar.
Yüzey immobilizasyonu YPR sonuçlarını nasıl etkiler?
İmmobilizasyon, reseptör hareketle kısıtlandığı için ayrışma hızlarını (kd) yavaşlatabilir; çözelti kinetikleri genellikle daha hızlı ayrışma gösterir. Birleşme hızları (ka) da yüzey kalabalıklaşması ve sterik etkilerden etkilenebilir. Dikkatli yüzey kimyası ve düşük reseptör yoğunluğu bu artefaktları en aza indirir.
Kaynaklar
- Kretschmann, E. (1971). Determination of optical constants of metals by excitation of surface plasmons. Zeitschrift für Physik, 241(4), 313-324. link ↗
- Liedberg, B., Nylander, C., & Lundström, I. (1983). Surface plasmon resonance for gas detection and biosensing. Sensors and Actuators, 4, 299-304. DOI: 10.1016/0250-6874(83)85036-7 ↗
- Homola, J. (2008). Surface plasmon resonance sensors for detection of chemical and biological species. Chemical Reviews, 108(2), 462-493. DOI: 10.1021/cr068107d ↗
Bu sayfayı kaynak gösterin
ScholarGate. (2026, June 3). Surface Plasmon Resonance. ScholarGate. https://scholargate.app/tr/spectroscopy/surface-plasmon-resonance
Hangi yöntem?
Bu yöntemi en yakın akrabalarının yanına koyup yan yana okuyun — kütüphane kitapları masaya serer; seçim sizindir.
- Dairesel DikroizmSpektroskopi↔ karşılaştır
- İzotermal Titrasyon KalorimetrisiSpektroskopi↔ karşılaştır
- Yüzeyde Geliştirilmiş Raman Spektroskopisi (SERS)Spektroskopi↔ karşılaştır