Паразитологическая диагностика и лабораторные методы
Паразитологическая диагностика — это раздел клинической и прикладной паразитологии, занимающийся обнаружением, идентификацией и количественным определением простейших, гельминтов и членистоногих в образцах человека (и животных). Она опирается на многоуровневый инструментарий, который варьируется от классической микроскопии окрашенных мазков и концентрированного кала до анализов на антигены и антитела, амплификации нуклеиновых кислот и стандартизированного количественного подсчета для эпидемиологических исследований.
Definition
Паразитологическая диагностика включает лабораторные и полевые методы, используемые для обнаружения, идентификации до вида или стадии, а также количественного определения паразитарных организмов или их антигенов, антител и нуклеиновых кислот в биологических образцах.
Scope
Эта область знакомит читателя с основными группами методов, используемых для подтверждения паразитарной инфекции и измерения ее бремени. Она делит эту область на морфологическую идентификацию с помощью микроскопии, серологические и иммунологические анализы, молекулярные методы, а также количественные методы и методы отбора проб, используемые в полевой эпидемиологии. Она рассматривает их как справочную методологию, а не как клинический протокол, и не предписывает индивидуальное тестирование, лечение или дозировку.
Sub-topics
Core questions
- Присутствует ли паразит в образце, и какой это вид или стадия?
- Насколько интенсивна инфекция, и как следует измерять и сообщать об интенсивности?
- Какая группа методов (микроскопия, серология, молекулярные методы или количественный отбор проб) лучше всего отвечает на текущий диагностический или эпидемиологический вопрос?
- Как чувствительность, специфичность и отсутствие идеального золотого стандарта формируют интерпретацию результата?
Key concepts
- Морфологическая идентификация яиц, цист, личинок и трофозоитов
- Концентрация кала и постоянное окрашивание
- Обнаружение антигенов и серология на основе антител
- Амплификация нуклеиновых кислот (ПЦР и изотермические методы)
- Аналитическая и диагностическая чувствительность и специфичность
- Отсутствие истинного золотого стандарта
- Количественные показатели инфекции: распространенность, интенсивность и численность
Mechanisms
Диагностическое подтверждение основывается на обнаружении сигнала, полученного от паразита: узнаваемой морфологической структуры под микроскопом, циркулирующего или выделяемого антигена, реакции антител хозяина или видоспецифической последовательности нуклеиновой кислоты. Микроскопия остается историческим эталоном для многих инфекций, но зависит от навыков наблюдателя, плотности паразитов и прерывистого выделения, что мотивирует концентрацию и повторный отбор проб. Иммуноферментные анализы и молекулярная амплификация обменивают часть этой морфологической прямоты на более высокую аналитическую чувствительность и способность типировать скрытые или низкоплотные инфекции, при этом вводя свои собственные интерпретационные оговорки, такие как перекрестная реактивность и сохранение маркеров после излечения.
Clinical relevance
Точное обнаружение паразитов лежит в основе эпиднадзора, подтверждения отдельных случаев и мониторинга программ борьбы; понимание сравнительных преимуществ микроскопии, серологии и молекулярных анализов является частью грамотности в лабораторной медицине. Эта статья описывает, как генерируются и интерпретируются диагностические данные, и не является заменой стандартных операционных процедур лаборатории или принятия клинических решений.
Epidemiology
Паразитарные инфекции налагают большое глобальное бремя, сосредоточенное в тропических регионах и регионах с ограниченными ресурсами; по оценкам, только гельминты, передающиеся через почву, заражают более миллиарда человек, что делает масштабируемую, стандартизированную диагностику центральной для картирования и оценки программ борьбы.
History
Диагностическая паразитология развивалась из микроскопии XIX и начала XX веков, когда впервые были описаны жизненные циклы и морфология основных простейших и гельминтов. В середине XX века были добавлены серологические анализы и стандартизированные методы количественного определения кала, а молекулярная эра с конца 1980-х годов ввела обнаружение на основе амплификации, которое изменило как клиническое подтверждение, так и типирование видов.
Related topics
Seminal works
- ndao-2009
- garcia-2018
- cox-2002
Frequently asked questions
- Почему микроскопия все еще используется, если молекулярные тесты более чувствительны?
- Микроскопия недорога, широко доступна, позволяет напрямую идентифицировать виды и стадии, а также может давать количественную оценку интенсивности инфекции; молекулярные и антигенные тесты дополняют, а не полностью заменяют ее, и лучший выбор зависит от организма и диагностического вопроса.
- Что означает, что в паразитологии часто отсутствует истинный золотой стандарт?
- Ни один тест не обнаруживает каждую инфекцию идеально, поэтому положительный или отрицательный результат должен интерпретироваться с учетом известной чувствительности и специфичности метода и тестируемой популяции, иногда с использованием статистических моделей, которые не предполагают, что какой-либо один тест идеален.