Coloração de Gram e Coloração Diferencial

A coloração de Gram é a coloração diferencial fundamental da bacteriologia: uma sequência de cristal violeta, mordente de iodo, uma etapa de descoloração e uma contracoloração que classifica as bactérias em Gram-positivas (retendo o corante violeta) e Gram-negativas (perdendo-o e absorvendo a contracoloração vermelha). As colorações diferenciais, de forma mais ampla, utilizam as propriedades estruturais das células para separá-las em grupos visualmente distintos.

Definition

A coloração de Gram é um método de coloração diferencial que classifica as bactérias como Gram-positivas ou Gram-negativas de acordo com a capacidade de sua parede celular reter um complexo cristal violeta-iodo após a descoloração, refletindo diferenças na espessura do peptidoglicano e na estrutura do envelope.

Scope

Este tópico aborda o procedimento e o mecanismo subjacente da coloração de Gram, como ela reflete a estrutura da parede celular e o conceito mais amplo de coloração diferencial, incluindo a coloração ácido-resistente para micobactérias e a coloração de endosporos. Ele trata dos próprios métodos de coloração; a estrutura do envelope que explica a reação de Gram é abordada em um tópico relacionado.

Core questions

• Quais são as etapas da coloração de Gram e o que cada uma faz?
• Por que as células Gram-positivas e Gram-negativas se comportam de forma diferente no procedimento?
• Como funcionam outras colorações diferenciais, como as colorações ácido-resistente e de endosporos?

Key concepts

• Corante primário (cristal violeta)
• Mordente (iodo)
• Descoloração com álcool ou acetona
• Contracoloração (safranina)
• Reação Gram-positiva versus Gram-negativa
• Coloração ácido-resistente
• Coloração de endosporos

Mechanisms

No procedimento de Gram, o cristal violeta cora todas as células e o iodo forma um grande complexo corante-iodo dentro delas. A descoloração então explora a diferença na estrutura da parede celular: o peptidoglicano espesso e desidratado das células Gram-positivas retém o complexo, enquanto nas células Gram-negativas a fina camada de peptidoglicano e a membrana externa desorganizada pelo solvente permitem que o complexo seja lavado, de modo que as células são descoloridas e absorvem a contracoloração de safranina. A reação, portanto, revela a estrutura do envelope celular. Outras colorações diferenciais usam propriedades distintas: a coloração ácido-resistente depende da parede cerosa e rica em ácido micólico das micobactérias, e a coloração de endosporos depende da impermeabilidade do revestimento do esporo.

Clinical relevance

A coloração de Gram é uma das observações mais antigas e amplamente utilizadas em espécimes clínicos, fornecendo uma rápida classificação estrutural de organismos que, com a morfologia, enquadra como os laboratórios descrevem um isolado; a coloração ácido-resistente identifica de forma semelhante as micobactérias. Esta entrada descreve os métodos de coloração como material de referência e não é uma base para decisões individuais de diagnóstico ou tratamento.

Evidence & guidelines

O procedimento e sua base mecanicista na estrutura da parede celular são estabelecidos em revisões clássicas e na literatura sobre o envelope celular, sendo padronizados em manuais de laboratório e livros didáticos de microbiologia padrão.

History

Hans Christian Gram introduziu o método de coloração em 1884 enquanto tentava tornar as bactérias mais visíveis nos tecidos; o comportamento diferencial que ele observou provou refletir uma divisão estrutural fundamental das bactérias. Trabalhos posteriores, revisados em meados do século XX, esclareceram a química das etapas e associaram a reação à arquitetura da parede e do envelope celular.

Key figures

• Hans Christian Gram
• James W. Bartholomew
• Terry J. Beveridge

Seminal works

• bartholomew-1952
• beveridge-1999

Frequently asked questions

Por que as bactérias Gram-positivas coram em roxo e as bactérias Gram-negativas em rosa?

As células Gram-positivas possuem uma parede de peptidoglicano espessa que retém o complexo cristal violeta-iodo durante a descoloração, permanecendo roxas, enquanto as células Gram-negativas possuem uma parede fina e uma membrana externa que permitem que o complexo seja lavado, absorvendo assim a contracoloração rosa.

O que é uma coloração diferencial?

Uma coloração diferencial utiliza diferenças estruturais ou químicas entre as células para separá-las em grupos visualmente distinguíveis; a coloração de Gram, a coloração ácido-resistente e a coloração de endosporos são exemplos comuns.