Validasi Uji dan Penilaian Kinerja

Validasi uji dan penilaian kinerja adalah serangkaian pekerjaan yang menunjukkan bahwa suatu uji molekuler mengukur apa yang diklaimnya, secara dapat direproduksi, dan untuk mendukung penggunaan klinis yang dimaksudkan. Ini memisahkan validasi analitis (apakah pengujian mengukur analit dengan benar?) dari validasi klinis (apakah hasilnya mencerminkan kondisi klinis?), dan mengukur kinerja dengan metrik seperti akurasi, presisi, sensitivitas, spesifisitas, dan batas deteksi.

Definition

Validasi uji adalah proses terdokumentasi untuk menunjukkan, melalui eksperimen sistematis, bahwa suatu uji laboratorium bekerja secara akurat dan dapat direproduksi serta sesuai untuk tujuan klinis yang dimaksudkan; penilaian kinerja adalah pengukuran dan verifikasi berkelanjutan dari karakteristik tersebut.

Scope

Entri ini mencakup konsep dan metrik yang digunakan untuk menetapkan dan mendokumentasikan kinerja uji molekuler sebelum penggunaan klinis dan untuk memverifikasinya setelahnya: validitas analitis versus klinis, karakteristik kinerja standar, dan pertimbangan khusus untuk pengujian dengan kompleksitas tinggi dan jalur bioinformatikanya. Ini adalah topik metodologis dan tidak memberikan instruksi untuk mendiagnosis atau merawat pasien.

Core questions

• Apa perbedaan antara validitas analitis dan klinis?
• Karakteristik kinerja apa yang harus ditetapkan untuk uji molekuler?
• Bagaimana batas deteksi dan kuantifikasi ditentukan?
• Bagaimana sekuensing dan jalur bioinformatika divalidasi, bukan hanya pengujian basah (wet-bench)?

Key concepts

• Validitas analitis
• Validitas klinis
• Akurasi dan ketepatan
• Presisi (keterulangan dan reproduktifitas)
• Sensitivitas analitis dan batas deteksi
• Spesifisitas analitis
• Rentang yang dapat dilaporkan dan terukur
• Validasi jalur bioinformatika
• Kesesuaian untuk tujuan penggunaan

Mechanisms

Validasi dilakukan melalui eksperimen yang dirancang menggunakan sampel yang telah dikarakterisasi. Akurasi dinilai dengan membandingkan dengan metode referensi atau spesimen yang diketahui; presisi dengan pengukuran berulang dalam kondisi keterulangan dan reproduktifitas; sensitivitas analitis dengan menentukan batas deteksi; dan spesifisitas analitis dengan menguji interferensi dan reaktivitas silang (Jennings et al., 2009). Pengujian molekuler kuantitatif dapat divalidasi dengan kerangka kerja kimia klinis yang sama yang digunakan untuk measurand lain, seperti yang ditunjukkan untuk pengujian biopsi cair PCR digital droplet (Milosevic et al., 2018). Untuk sekuensing generasi berikutnya, jalur komputasi yang memanggil dan menyaring varian harus divalidasi bersama dengan langkah-langkah laboratorium (Roy et al., 2018). Validitas klinis, yang berbeda dari ini, menanyakan seberapa baik hasilnya mengklasifikasikan kondisi klinis.

Clinical relevance

Apakah hasil molekuler dapat dipercaya dalam perawatan pasien bergantung pada pekerjaan validasi dan kinerja di baliknya; karakteristik kinerja yang tidak terdokumentasi atau lemah dapat merusak interpretasi. Entri ini menjelaskan bagaimana laboratorium membangun kepercayaan tersebut dan bukan merupakan panduan untuk memesan atau bertindak berdasarkan tes tertentu.

Evidence & guidelines

Praktik validasi dikodifikasi dalam pedoman profesional, termasuk prinsip AMP/CAP untuk memvalidasi tes patologi molekuler dan jalur sekuensing (Jennings et al., 2009; Roy et al., 2018) dan dokumen konsensus CLSI (CLSI EP28). Ini menyediakan desain eksperimental dan kriteria penerimaan yang diikuti laboratorium di bawah akreditasi.

History

Ketika pengujian molekuler klinis berkembang, organisasi profesional mengadaptasi prinsip-prinsip validasi kimia klinis dan kedokteran laboratorium yang telah ditetapkan ke pengujian molekuler, kemudian memperluasnya ke sekuensing paralel masif dan bioinformatikanya, menghasilkan standar validasi berlapis yang digunakan saat ini (Jennings et al., 2009; Roy et al., 2018).

Debates

Bagaimana validasi harus diskalakan untuk pengujian multi-target dengan kompleksitas tinggi?

Menetapkan kinerja untuk setiap varian yang mungkin terdeteksi oleh panel sekuensing yang luas tidak praktis, sehingga pedoman mengandalkan validasi representatif dan validasi jalur; seberapa banyak yang cukup masih menjadi diskusi aktif.

Seminal works

• jennings-2009
• roy-2018

Frequently asked questions

Apa perbedaan antara validitas analitis dan validitas klinis?

Validitas analitis adalah apakah pengujian mengukur analit secara akurat dan dapat direproduksi; validitas klinis adalah apakah hasilnya benar-benar sesuai dengan kondisi klinis yang dimaksudkan untuk dideteksi oleh tes tersebut.

Mengapa sekuensing generasi berikutnya membutuhkan validasi jalur?

Karena varian yang dilaporkan bergantung pada perangkat lunak yang menyelaraskan pembacaan dan memanggil varian, jalur bioinformatika dapat menimbulkan kesalahan dan harus divalidasi bersama dengan prosedur laboratorium.