वायरल कल्चर और सेल कल्चर तकनीकें

वायरल कल्चर जीवित परपोषी कोशिकाओं में वायरस का प्रवर्धन है ताकि उसकी उपस्थिति का पता लगाया जा सके और आगे के अध्ययन के लिए वायरस को पुनः प्राप्त किया जा सके। चूंकि वायरस केवल कोशिकाओं के अंदर ही प्रतिकृति करते हैं, इसलिए कल्चर प्रणालियाँ — ऐतिहासिक रूप से भ्रूणित अंडे और जानवर, अब मुख्य रूप से सेल (ऊतक) कल्चर — वह आधार प्रदान करती हैं जिसमें एक वायरस बढ़ सकता है, विशिष्ट कोशिकीय परिवर्तनों के माध्यम से स्वयं को प्रकट कर सकता है, और उसे अलग किया जा सकता है।

Definition

वायरल कल्चर संवेदनशील जीवित कोशिकाओं में एक वायरस का संवर्धन है ताकि इसकी प्रतिकृति, पहचान (आमतौर पर साइटोपैथिक प्रभाव या विशिष्ट दाग के माध्यम से), और पहचान और आगे के लक्षण वर्णन के लिए अलगाव की अनुमति मिल सके।

Scope

यह विषय सेल कल्चर में वायरस उगाने के सिद्धांतों, साइटोपैथिक प्रभाव और संबंधित संकेतकों के माध्यम से वायरल प्रतिकृति की पहचान, शेल वायल कल्चर जैसे त्वरित प्रारूपों, और आणविक विधियों के साथ कल्चर की निरंतर भूमिका को शामिल करता है। यह कल्चर को एक कार्यप्रणाली विषय के रूप में मानता है और प्रयोगशाला प्रोटोकॉल या नैदानिक मार्गदर्शन प्रदान नहीं करता है।

Core questions

• कौन सी सेल प्रणालियाँ किसी दिए गए वायरस की प्रतिकृति का समर्थन करती हैं?
• वायरल वृद्धि को कैसे पहचाना जाता है और गैर-विशिष्ट कोशिकीय परिवर्तन से कैसे अलग किया जाता है?
• संक्रामक वायरस को पुनः प्राप्त करने से उसके जीनोम या एंटीजन का पता लगाने से परे कब मूल्य जुड़ता है?
• लाइव-वायरस पुनर्प्राप्ति के लाभों को बनाए रखते हुए कल्चर को कैसे त्वरित किया जा सकता है?

Key concepts

• साइटोपैथिक प्रभाव
• सेल (ऊतक) कल्चर मोनोलेयर
• अनुमेय और संवेदनशील कोशिकाएँ
• प्लेक निर्माण
• शेल वायल परख
• हेमोएडसॉर्प्शन
• वायरस अलगाव और मार्ग

Mechanisms

एक नैदानिक नमूना संदिग्ध वायरस के प्रति संवेदनशीलता के लिए चुनी गई संवर्धित कोशिकाओं की एक मोनोलेयर पर टीका लगाया जाता है। जैसे-जैसे वायरस प्रतिकृति करता है, यह परपोषी कोशिकाओं को बदल देता है, जिससे एक साइटोपैथिक प्रभाव उत्पन्न होता है — गोलाई, लसीका, सिंसिटियम निर्माण, या समावेशन निकाय — जिसका पैटर्न वायरल पहचान का एक सुराग प्रदान करता है जिसे बाद में दाग या आणविक विधियों द्वारा पुष्टि की जाती है। कुछ वायरस अप्रत्यक्ष रूप से पता लगाए जाते हैं, उदाहरण के लिए संक्रमित मोनोलेयर पर लाल रक्त कोशिकाओं के हेमोएडसॉर्प्शन द्वारा। शेल वायल तकनीक नमूने को कोशिकाओं पर सेंट्रीफ्यूज करती है और परिणाम के समय को कम करने के लिए प्रारंभिक एंटीजन पहचान का उपयोग करती है। मार्ग द्वारा संक्रामक वायरस की पुनर्प्राप्ति एंटीजेनिक लक्षण वर्णन और एंटीवायरल संवेदनशीलता जैसे फेनोटाइपिक अध्ययनों की अनुमति देती है जो अकेले जीनोम पहचान प्रदान नहीं कर सकती है।

Clinical relevance

कल्चर ने ऐतिहासिक रूप से वायरल निदान को आधार दिया और संक्रामक वायरस को पुनः प्राप्त करने, फेनोटाइपिक लक्षण वर्णन का समर्थन करने, और उपन्यास या अप्रत्याशित एजेंटों की पुष्टि करने के लिए एक संदर्भ विधि बनी हुई है। यह प्रविष्टि बताती है कि कल्चर क्या प्रदर्शित करता है और गति और संवेदनशीलता में इसके व्यापार-बंद; यह कार्यप्रणाली का वर्णनात्मक है और नैदानिक या उपचार निर्णयों के लिए एक मार्गदर्शिका नहीं है।

History

सेल कल्चर ने 1949 में एंडर्स, वेल्लर और रॉबिन्स द्वारा यह दिखाने के बाद वायरोलॉजी को बदल दिया कि पोलियोवायरस को गैर-तंत्रिका मानव ऊतक कल्चर में उगाया जा सकता है, इस कार्य को नोबेल पुरस्कार से सम्मानित किया गया और आधुनिक नैदानिक और वैक्सीन वायरोलॉजी की नींव रखी गई। कल्चर-आधारित अलगाव ने बाद में कई मानव वायरस की खोज को सक्षम किया, जिसमें प्रारंभिक मानव कोरोनावायरस भी शामिल थे, इससे पहले कि आणविक विधियाँ प्रमुख हो गईं।

Key figures

• John Enders
• Thomas Weller
• Frederick Robbins

Seminal works

• enders-1949
• leland-ginocchio-2007

Frequently asked questions

साइटोपैथिक प्रभाव क्या है?

साइटोपैथिक प्रभाव एक प्रतिकृति वायरस द्वारा संवर्धित कोशिकाओं को होने वाली दृश्य क्षति है — जैसे गोलाई, अलगाव, सिंसिटिया में संलयन, या समावेशन निकाय। इसका पैटर्न यह सुझाव दे सकता है कि कौन सा वायरस मौजूद है और फिर विशिष्ट दाग या आणविक परीक्षण द्वारा इसकी पुष्टि की जाती है।

यदि आणविक परीक्षण तेज़ हैं, तो वायरल कल्चर अभी भी क्यों किया जाता है?

कल्चर संक्रामक वायरस को पुनः प्राप्त करता है, जिसकी आवश्यकता फेनोटाइपिक अध्ययनों जैसे एंटीजेनिक लक्षण वर्णन, एंटीवायरल संवेदनशीलता परीक्षण, और उपन्यास एजेंटों की जांच के लिए होती है — ऐसी क्षमताएं जो अकेले जीनोम या एंटीजन पहचान प्रदान नहीं कर सकती हैं।