हिस्टोकेमिस्ट्री और रूटीन स्टेनिंग

हिस्टोकेमिस्ट्री ऊतक के अनुभाग पर रासायनिक प्रतिक्रियाओं का उपयोग करती है ताकि उन संरचनाओं को ऑप्टिकल कंट्रास्ट दिया जा सके जो अन्यथा लगभग पारदर्शी होंगी। रूटीन स्टेनिंग — विशेष रूप से हेमेटोक्सिलिन और ईओसिन (H&E) जोड़ी — ऊतक का रोज़मर्रा का रंग मानचित्र प्रदान करती है, जबकि विशेष दाग और हिस्टोकेमिकल प्रतिक्रियाएं चुनिंदा रूप से कार्बोहाइड्रेट, लिपिड, फाइबर या सूक्ष्मजीवों जैसे विशेष पदार्थों को प्रकट करती हैं।

Definition

हिस्टोकेमिस्ट्री कोशिकाओं और ऊतकों के विशिष्ट रासायनिक घटकों को स्थानीयकृत करने और पहचानने के लिए यथास्थान रासायनिक प्रतिक्रियाओं का उपयोग है; रूटीन स्टेनिंग मानक डाई संयोजनों, मुख्य रूप से हेमेटोक्सिलिन और ईओसिन का अनुप्रयोग है, ताकि ऊतक अनुभागों में सामान्य संरचनात्मक कंट्रास्ट प्रदान किया जा सके।

Scope

यह विषय डाई बाइंडिंग और हिस्टोकेमिकल प्रतिक्रियाओं के सिद्धांतों, रूटीन कार्यप्रणाली के रूप में H&E विधि, और विशिष्ट ऊतक घटकों को प्रदर्शित करने के लिए उपयोग किए जाने वाले विशेष दागों के परिवारों को शामिल करता है। यह एक कार्यप्रणाली संदर्भ है और नैदानिक व्याख्या मार्गदर्शन प्रदान नहीं करता है।

Core questions

• कंट्रास्ट बनाने के लिए रंजक ऊतक घटकों से चुनिंदा रूप से कैसे बंधते हैं?
• हेमेटोक्सिलिन और ईओसिन घटक प्रत्येक क्या दागते हैं, और क्यों?
• हिस्टोकेमिकल प्रतिक्रियाएं कार्बोहाइड्रेट या लिपिड जैसे विशिष्ट पदार्थों को कैसे प्रदर्शित करती हैं?
• रूटीन H&E के बजाय विशेष दाग कब चुना जाता है?

Key concepts

• डाई-ऊतक संबंध और चार्ज अंतःक्रियाएं
• बेसोफिलिया और एसिडोफिलिया
• हेमेटोक्सिलिन और ईओसिन (H&E)
• मॉर्डेंट और मेटाक्रोमेसिया
• कार्बोहाइड्रेट हिस्टोकेमिस्ट्री (जैसे PAS)
• संयोजी-ऊतक और लिपिड दाग
• एंजाइम हिस्टोकेमिस्ट्री

Mechanisms

स्टेनिंग डाई और ऊतक घटकों के बीच चयनात्मक अंतःक्रियाओं पर निर्भर करता है। कई मूल (धनायनिक) रंजक जैसे हेमेटोक्सिलिन नकारात्मक रूप से चार्ज किए गए घटकों — न्यूक्लिक एसिड और अम्लीय संरचनाओं — से बंधते हैं, जिससे वे बेसोफिलिक हो जाते हैं, जबकि अम्लीय (ऋणायनी) रंजक जैसे ईओसिन सकारात्मक रूप से चार्ज किए गए प्रोटीन से बंधते हैं, जिससे वे एसिडोफिलिक हो जाते हैं; यह चार्ज तर्क H&E के परिचित नीले नाभिक और गुलाबी साइटोप्लाज्म का आधार है। कुछ रंजकों को डाई और ऊतक को जोड़ने के लिए एक मॉर्डेंट (अक्सर एक धातु आयन) की आवश्यकता होती है, और कुछ रंजक विशेष सब्सट्रेट्स (मेटाक्रोमेसिया) से बंधने पर रंग बदलते हैं। हिस्टोकेमिकल विधियाँ यथास्थान परिभाषित रासायनिक प्रतिक्रियाओं का लाभ उठाकर आगे बढ़ती हैं — उदाहरण के लिए विसिनल डायोल को एल्डिहाइड में ऑक्सीकृत करना जिन्हें बाद में कार्बोहाइड्रेट को प्रदर्शित करने के लिए शिफ़ अभिकर्मक द्वारा प्रकट किया जाता है, या एंजाइम-सब्सट्रेट प्रतिक्रियाएं जो एंजाइम गतिविधि के स्थलों पर रंगीन उत्पाद जमा करती हैं। इन प्रतिक्रियाओं का सैद्धांतिक आधार मानक हिस्टोकेमिस्ट्री संदर्भों (पियर्स, 1980; लिली और फुलमर, 1976) में वर्णित है।

Clinical relevance

रूटीन और विशेष स्टेनिंग नैदानिक और अनुसंधान हिस्टोलॉजी में व्याख्या की जाने वाली स्लाइडें तैयार करते हैं, और यह पहचानना कि प्रत्येक दाग क्या प्रदर्शित करता है, ऊतक साक्ष्य को पढ़ने का एक हिस्सा है। यह प्रविष्टि वैचारिक रूप से विधियों की व्याख्या करती है और व्यक्तिगत नैदानिक या उपचार निर्णयों का आधार नहीं है।

Evidence & guidelines

स्टेनिंग सिद्धांत और प्रोटोकॉल लंबे समय से चले आ रहे हिस्टोटेक्नोलॉजी और हिस्टोकेमिस्ट्री संदर्भों (सुवर्णा एट अल।, 2018; कीर्नन, 2015; पियर्स, 1980; लिली और फुलमर, 1976) में समेकित हैं। प्रयोगशाला गुणवत्ता कार्यक्रम दाग प्रदर्शन के लिए नियंत्रण और स्वीकृति मानदंड भी परिभाषित करते हैं, जिन्हें गुणवत्ता-मूल्यांकन विषय के भीतर वर्णित किया गया है।

History

उन्नीसवीं सदी के उत्तरार्ध में सिंथेटिक एनिलिन रंजक उपलब्ध होने के बाद ऊतक स्टेनिंग तेजी से बढ़ी, और हेमेटोक्सिलिन-ईओसिन संयोजन को नियमित विधि के रूप में स्थापित किया गया। बीसवीं सदी के दौरान हिस्टोकेमिस्ट्री यथास्थान रासायनिक प्रतिक्रियाओं के एक व्यवस्थित अनुशासन के रूप में विकसित हुई, जिसे लिली और फुलमर (1976) और पियर्स (1980) के संदर्भ कार्यों में संहिताबद्ध किया गया, जिससे स्टेनिंग को विशुद्ध रूप से संरचनात्मक कंट्रास्ट से परिभाषित रासायनिक समूहों और एंजाइम गतिविधियों के प्रदर्शन तक विस्तारित किया गया।

Key figures

• A. G. Everson Pearse
• Ralph Lillie

Seminal works

• pearse-1980
• lillie-1976

Frequently asked questions

हेमेटोक्सिलिन और ईओसिन प्रत्येक क्या दागते हैं?

हेमेटोक्सिलिन, एक मॉर्डेंट के साथ, अम्लीय/बेसोफिलिक संरचनाओं जैसे कोशिका नाभिक को नीला-बैंगनी रंग देता है, जबकि ईओसिन मूल/एसिडोफिलिक घटकों जैसे साइटोप्लाज्म और कई बाह्यकोशिकीय प्रोटीन को गुलाबी रंग के विभिन्न शेड्स में दागता है।

हिस्टोकेमिस्ट्री रूटीन स्टेनिंग से कैसे भिन्न है?

रूटीन स्टेनिंग डाई संबंध के माध्यम से सामान्य संरचनात्मक कंट्रास्ट प्रदान करती है, जबकि हिस्टोकेमिस्ट्री विशिष्ट पदार्थों, जैसे कार्बोहाइड्रेट, लिपिड, या एंजाइम गतिविधियों को स्थानीयकृत करने के लिए यथास्थान परिभाषित रासायनिक प्रतिक्रियाओं का उपयोग करती है।