ऊतकवैज्ञानिक तकनीकें और ऊतक विश्लेषण

ऊतकवैज्ञानिक तकनीकें वे प्रयोगशाला विधियाँ हैं जिनका उपयोग ऊतक के एक टुकड़े को एक स्थिर, पतले, कंट्रास्ट-समृद्ध तैयारी में बदलने के लिए किया जाता है जिसे माइक्रोस्कोप के तहत जांचा जा सके। वे ताजे निकाले गए ऊतक को संरक्षित करने से लेकर, उसे सहारा देने और काटने तक, विशिष्ट संरचनाओं को दागने और लेबल करने तक की पूरी कार्यप्रणाली को कवर करती हैं, और वे नैदानिक ​​विकृति विज्ञान और मूल ऊतक अनुसंधान दोनों का आधार हैं।

Definition

ऊतकवैज्ञानिक तकनीकें भौतिक और रासायनिक प्रक्रियाओं का एक समूह हैं जिनका उपयोग ऊतकों और कोशिकाओं को संरक्षित करने, सहारा देने, काटने और चुनिंदा रूप से देखने के लिए किया जाता है ताकि उनकी संरचना और आणविक संरचना का प्रकाश या इलेक्ट्रॉन माइक्रोस्कोपी द्वारा विश्लेषण किया जा सके।

Scope

यह क्षेत्र किसी एक प्रोटोकॉल का विवरण देने के बजाय ऊतकवैज्ञानिक विधि के प्रमुख परिवारों के बारे में पाठक को जानकारी देता है। यह कार्यप्रणाली को ऊतक स्थिरीकरण और एम्बेडिंग, हिस्टोकेमिस्ट्री और नियमित धुंधलापन, एंटीबॉडी-आधारित लेबलिंग (इम्यूनोहिस्टोकेमिस्ट्री और इम्यूनोफ्लोरेसेंस), इलेक्ट्रॉन माइक्रोस्कोपी और अल्ट्रास्ट्रक्चर, और कलाकृतियों की पहचान और गुणवत्ता मूल्यांकन में समूहित करता है। यह इन्हें स्वास्थ्य विज्ञान में कार्यप्रणाली संबंधी विषयों के रूप में मानता है, न कि नैदानिक ​​मार्गदर्शन के रूप में।

Sub-topics

• कलाकृति पहचान और गुणवत्ता मूल्यांकन
• इलेक्ट्रॉन माइक्रोस्कोपी और अल्ट्रास्ट्रक्चर
• हिस्टोकेमिस्ट्री और रूटीन स्टेनिंग
• इम्यूनोहिस्टोकेमिस्ट्री और इम्यूनोफ्लोरेसेंस
• ऊतक स्थिरीकरण और अंतःस्थापन

Core questions

• ऊतक को कैसे संरक्षित और सहारा दिया जाता है ताकि इसे पतले, जांच योग्य वर्गों में काटा जा सके?
• धुंधलापन और लेबलिंग के माध्यम से विशिष्ट संरचनाओं और अणुओं को कैसे दृश्यमान बनाया जाता है?
• प्रकाश माइक्रोस्कोपी, इम्यूनोलैबिंग और इलेक्ट्रॉन माइक्रोस्कोपी में संकल्प और विशिष्टता का कैसे व्यापार-बंद किया जाता है?
• तैयारी कलाकृतियों को वास्तविक ऊतक विशेषताओं से कैसे अलग किया जा सकता है?

Key concepts

• स्थिरीकरण और ऊतक संरक्षण
• एम्बेडिंग, सेक्शनिंग और माइक्रोटोमी
• हिस्टोकेमिकल और नियमित धुंधलापन
• एंटीबॉडी-आधारित लेबलिंग
• अल्ट्रास्ट्रक्चरल इमेजिंग
• कलाकृति पहचान और गुणवत्ता नियंत्रण

Mechanisms

ऊतकवैज्ञानिक कार्यप्रणाली चरणों में आगे बढ़ती है जो प्रत्येक अगले पर बाधाएं डालती है। स्थिरीकरण ऑटोलाइसिस को रोकता है और संरचना को संरक्षित करने के लिए ऊतक घटकों को क्रॉस-लिंक या अवक्षेपित करता है; एक सहायक माध्यम में एम्बेडिंग ऊतक को माइक्रोमीटर-पतले वर्गों में काटने के लिए पर्याप्त कठोरता देता है; धुंधलापन या लेबलिंग तब परिभाषित लक्ष्यों के लिए रंगों, एंजाइम सब्सट्रेट्स, या एंटीबॉडी को बांधकर ऑप्टिकल कंट्रास्ट पेश करता है। फिक्सेटिव और प्रसंस्करण का चुनाव काफी हद तक निर्धारित करता है कि कौन सी डाउनस्ट्रीम विधियाँ संभव हैं — उदाहरण के लिए, एल्डिहाइड स्थिरीकरण जो इलेक्ट्रॉन माइक्रोस्कोपी के लिए ठीक संरचना को संरक्षित करता है (सबातिनी, 1963) एंटीजन संरक्षण के लिए अनुकूल हल्की परिस्थितियों से भिन्न होता है, और फ्लोरोसेंट-एंटीबॉडी लेबलिंग (कून्स, 1941) की शुरूआत ने अणु-विशिष्ट स्थानीयकरण का एक मार्ग खोला जो शास्त्रीय रंग प्रदान नहीं कर सकते थे।

Clinical relevance

ऊतकवैज्ञानिक तकनीकें वे स्लाइड बनाती हैं जिन पर नैदानिक ​​विकृति विज्ञान का बहुत कुछ निर्भर करता है, और उनके तर्क को समझना स्वास्थ्य विज्ञान में ऊतक-आधारित साक्ष्य की व्याख्या का हिस्सा है। यह प्रविष्टि बताती है कि ऊतक तैयारियाँ कैसे बनाई और पढ़ी जाती हैं; यह एक संदर्भ अभिविन्यास है और व्यक्तिगत निदान या उपचार निर्णयों का आधार नहीं है।

Evidence & guidelines

हिस्टोलॉजी और हिस्टोकेमिस्ट्री में मानक अभ्यास बैंक्रॉफ्ट की हिस्टोलॉजिकल तकनीकों के सिद्धांत और अभ्यास (सुवर्णा एट अल।, 2018) और कीर्नन की हिस्टोलॉजिकल और हिस्टोकेमिकल मेथड्स (कीर्नन, 2015) जैसे संदर्भ ग्रंथों में समेकित है। एंटीबॉडी-आधारित परख के लिए, पेशेवर निकायों ने विश्लेषणात्मक-सत्यापन मार्गदर्शन जारी किया है जिसे इम्यूनोहिस्टोकेमिस्ट्री विषय के भीतर माना जाता है।

History

ऊतक का सूक्ष्म अध्ययन सत्रहवीं शताब्दी में कोशिकाओं के प्रेक्षणों से बढ़ा, लेकिन व्यावहारिक हिस्टोलॉजी उन्नीसवीं शताब्दी के दौरान स्थिरीकरण, एम्बेडिंग, माइक्रोटोमी और सिंथेटिक रंगों में बाद की प्रगति पर निर्भर थी। बीसवीं शताब्दी ने अणु-विशिष्ट विधियों को जोड़ा: फ्लोरोसेंट-एंटीबॉडी लेबलिंग (कून्स, 1941), इलेक्ट्रॉन माइक्रोस्कोपी के लिए एल्डिहाइड स्थिरीकरण (सबातिनी, 1963), और एंटीबॉडी- और एंजाइम-आधारित पहचान प्रणाली जिसने हिस्टोलॉजी को परिभाषित अणुओं के स्थानीयकरण के लिए एक उपकरण में बदल दिया।

Key figures

• Albert Coons
• David Sabatini

Seminal works

• coons-1941
• sabatini-1963

Frequently asked questions

हिस्टोलॉजी और हिस्टोलॉजिकल तकनीक में क्या अंतर है?

हिस्टोलॉजी ऊतक संरचना का अध्ययन है; हिस्टोलॉजिकल तकनीक प्रयोगशाला विधियों — स्थिरीकरण, एम्बेडिंग, सेक्शनिंग, धुंधलापन और लेबलिंग — को संदर्भित करती है जिसका उपयोग ऊतक को तैयार करने के लिए किया जाता है ताकि उसकी संरचना की जांच की जा सके।

फिक्सेटिव का चुनाव इतना महत्वपूर्ण क्यों है?

स्थिरीकरण ऊतक की रासायनिक स्थिति निर्धारित करता है और इसलिए बाद के हर कदम को बाधित करता है; ठीक अल्ट्रास्ट्रक्चर को संरक्षित करने के लिए चुना गया एक फिक्सेटिव एंटीजन को अच्छी तरह से संरक्षित नहीं कर सकता है, इसलिए ऊतक को स्थिर करने से पहले इच्छित विश्लेषण पर विचार किया जाता है।