Histochimie et coloration de routine

L'histochimie utilise des réactions chimiques sur une coupe de tissu pour conférer un contraste optique à des structures qui seraient autrement presque transparentes. La coloration de routine — notamment la paire hématoxyline et éosine (H&E) — fournit la carte colorée usuelle des tissus, tandis que les colorations spéciales et les réactions histochimiques révèlent sélectivement des substances particulières telles que les glucides, les lipides, les fibres ou les microorganismes.

Definition

L'histochimie est l'utilisation de réactions chimiques in situ pour localiser et identifier des constituants chimiques spécifiques des cellules et des tissus; la coloration de routine est l'application de combinaisons de colorants standard, principalement l'hématoxyline et l'éosine, pour fournir un contraste structurel général dans les coupes de tissu.

Scope

Ce sujet aborde les principes de la liaison des colorants et des réactions histochimiques, la méthode H&E en tant qu'outil de routine essentiel, et les familles de colorations spéciales utilisées pour mettre en évidence des composants tissulaires spécifiques. Il s'agit d'une référence méthodologique qui ne fournit pas de conseils d'interprétation clinique.

Core questions

• Comment les colorants se lient-ils sélectivement aux composants tissulaires pour créer un contraste ?
• Que colorent respectivement les composants hématoxyline et éosine, et pourquoi ?
• Comment les réactions histochimiques mettent-elles en évidence des substances spécifiques telles que les glucides ou les lipides ?
• Quand une coloration spéciale est-elle préférée à la coloration H&E de routine ?

Key concepts

• Affinité colorant-tissu et interactions de charge
• Basophilie et acidophilie
• Hématoxyline et éosine (H&E)
• Mordants et métachromasie
• Histochimie des glucides (par ex. PAS)
• Colorations des tissus conjonctifs et des lipides
• Histochimie enzymatique

Mechanisms

La coloration dépend d'interactions sélectives entre les colorants et les constituants tissulaires. De nombreux colorants basiques (cationiques) tels que l'hématoxyline se lient aux composants chargés négativement — acides nucléiques et structures acides — les rendant basophiles, tandis que les colorants acides (anioniques) tels que l'éosine se lient aux protéines chargées positivement, les rendant acidophiles; cette logique de charge sous-tend les noyaux bleus et le cytoplasme rose familiers de la coloration H&E. Certains colorants nécessitent un mordant (souvent un ion métallique) pour établir un pont entre le colorant et le tissu, et certains colorants changent de couleur lorsqu'ils sont liés à des substrats particuliers (métachromasie). Les méthodes histochimiques vont plus loin en exploitant des réactions chimiques définies in situ — par exemple, l'oxydation des diols vicinaux en aldéhydes qui sont ensuite révélés par le réactif de Schiff pour mettre en évidence les glucides, ou les réactions enzyme-substrat qui déposent un produit coloré aux sites d'activité enzymatique. La base théorique de ces réactions est traitée dans les ouvrages de référence en histochimie (Pearse, 1980; Lillie & Fullmer, 1976).

Clinical relevance

Les colorations de routine et spéciales produisent les lames interprétées en histologie diagnostique et de recherche, et la reconnaissance de ce que chaque coloration met en évidence fait partie de l'interprétation des preuves tissulaires. Cette entrée explique les méthodes de manière conceptuelle et ne constitue pas une base pour des décisions diagnostiques ou thérapeutiques individuelles.

Evidence & guidelines

Les principes et protocoles de coloration sont consolidés dans des ouvrages de référence de longue date en histotechnologie et histochimie (Suvarna et al., 2018; Kiernan, 2015; Pearse, 1980; Lillie & Fullmer, 1976). Les programmes de qualité en laboratoire définissent en outre les contrôles et les critères d'acceptation pour la performance des colorations, traités dans le sujet de l'évaluation de la qualité.

History

La coloration des tissus s'est développée rapidement après la disponibilité des colorants d'aniline synthétiques dans la seconde moitié du XIXe siècle, et la combinaison hématoxyline-éosine s'est imposée comme la méthode de routine. Tout au long du XXe siècle, l'histochimie est devenue une discipline systématique de réactions chimiques in situ, codifiée dans les ouvrages de référence de Lillie et Fullmer (1976) et Pearse (1980), étendant la coloration du simple contraste structurel à la mise en évidence de groupes chimiques définis et d'activités enzymatiques.

Key figures

• A. G. Everson Pearse
• Ralph Lillie

Seminal works

• pearse-1980
• lillie-1976

Frequently asked questions

Que colorent respectivement l'hématoxyline et l'éosine ?

L'hématoxyline, avec un mordant, colore les structures acides/basophiles telles que les noyaux cellulaires en bleu-violet, tandis que l'éosine colore les composants basiques/acidophiles tels que le cytoplasme et de nombreuses protéines extracellulaires dans des nuances de rose.

En quoi l'histochimie diffère-t-elle de la coloration de routine ?

La coloration de routine confère un contraste structurel général par affinité tinctoriale, tandis que l'histochimie utilise des réactions chimiques définies in situ pour localiser des substances spécifiques, telles que les glucides, les lipides ou les activités enzymatiques.