كروماتوغرافيا السائل عالية الأداء

تقوم كروماتوغرافيا السائل عالية الأداء (HPLC) بفصل مكونات المستخلص النباتي على عمود معبأ تحت ضغط عالٍ، باستخدام كاشفات تسمح بإنشاء بصمات تعريفية مميزة وتحديد كمي دقيق للمركبات الدالة. إنها الطريقة الأساسية في التحليل الآلي للمعايرة الكمية للمواد العشبية وأداة مركزية في مراقبة الجودة الدوائية النباتية الحديثة.

Definition

كروماتوغرافيا السائل عالية الأداء هي تقنية فصل عمودية يحمل فيها طور متحرك سائل مكونات العينة عبر طور ثابت معبأ تحت ضغط عالٍ، مما يؤدي إلى فصلها للكشف عنها بحيث يمكن تحديدها عن طريق الاستبقاء والنمط وتقدير كميتها مقابل المعايير المرجعية.

Scope

يغطي المدخل مبدأ كروماتوغرافيا العمود السائل، واستخدام كروماتوغرافيا السائل عالية الأداء (HPLC) للبصمات التعريفية وللتحليل الكمي للمكونات الدالة في العقاقير الخام والمستخلصات، ومكانتها بين طرق مراقبة الجودة الكروماتوغرافية. إنه مرجع منهجي وليس إرشادات سريرية.

Core questions

• هل يتطابق ملف كروماتوغرافيا السائل عالية الأداء (HPLC) للعينة مع البصمة المرجعية للمادة المعلنة؟
• ما هو المحتوى الكمي للمكونات الدالة أو النشطة بالنسبة للمواصفات؟
• هل يكشف الكروماتوغرام عن الغش أو الاستبدال أو المكونات خارج الحدود المسموح بها؟

Key concepts

• كروماتوغرافيا العمود السائل تحت ضغط عالٍ
• الأطوار الثابتة والمتحركة؛ الفصل بالطور العكسي
• وقت الاستبقاء والفصل
• الكاشفات (UV/DAD, MS, ELSD)
• التحليل الكمي مقابل المعايير المرجعية
• بصمات كروماتوغرافيا السائل عالية الأداء (HPLC) والمركبات الدالة
• التحليل الكيميائي القياسي للبصمات

Mechanisms

تدفع مضخة طورًا متحركًا سائلًا يحمل العينة المذابة عبر عمود معبأ بجزيئات دقيقة من الطور الثابت؛ تنفصل المكونات وفقًا لاختلاف توزيعها بين الأطوار وتُستخلص في أوقات استبقاء مميزة. تسجل الكاشفات مثل الأشعة فوق البنفسجية أو مصفوفة الصمامات الثنائية، أو مطياف الكتلة، أو أجهزة تشتت الضوء التبخيري، القمم المستخلصة، مما ينتج بصمة تعريفية، وعن طريق المعايرة مقابل المعايير المرجعية، محتوى كمي للمكونات الدالة. يمنح الجمع بين البصمة التعريفية النوعية والتحليل الكمي — الذي غالبًا ما يُفسر بتقنيات الكيمياء القياسية (chemometrics) — أساسًا قويًا للتحكم في هوية المواد العشبية واتساقها ومحتواها (xie-2006, liang-2010, who-2011-qc).

Clinical relevance

تدعم كروماتوغرافيا السائل عالية الأداء (HPLC) التحقق من الهوية والقياس الدقيق للمكونات الدالة أو النشطة في المواد العشبية، وهو أمر أساسي لتوثيق اتساق الدفعة وجودتها. يصف هذا المدخل طريقة تحليلية وليس أساسًا لقرارات العلاج الفردية.

Evidence & guidelines

تستخدم إرشادات منظمة الصحة العالمية لمراقبة الجودة ودساتير الأدوية كروماتوغرافيا السائل عالية الأداء (HPLC) لتحديد الهوية والتحليل الكمي للمواد العشبية، وتثبت مراجعات البصمات الكروماتوغرافية أن كروماتوغرافيا السائل عالية الأداء (HPLC)، غالبًا مع الكيمياء القياسية، هي نهج رائد لتقييم جودة الأعشاب (who-2011-qc, xie-2006, liang-2010, evans-2009).

History

تطورت كروماتوغرافيا السائل عالية الأداء من كروماتوغرافيا العمود الكلاسيكية في أواخر القرن العشرين وأصبحت طريقة الفصل الكمي المهيمنة في التحليل الصيدلاني؛ وقد جعلها تطبيقها على البصمات التعريفية والتقدير الكمي للمركبات الدالة حجر الزاوية في توحيد الأدوية العشبية، وتقترن بشكل متزايد بمطياف الكتلة وتحليل البيانات الكيميائية القياسية (xie-2006, liang-2010, evans-2009).

Seminal works

• xie-2006
• liang-2010

Frequently asked questions

لماذا تُفضل كروماتوغرافيا السائل عالية الأداء (HPLC) للمعايرة الكمية؟

لأنها تفصل المكونات على عمود باستخدام كاشفات حساسة ويمكن معايرتها مقابل المعايير المرجعية، فإنها تقيس محتوى المركبات الدالة أو النشطة بدقة، وهو ما لا تستطيع الطرق النوعية الأبسط فعله.

ما هي بصمة كروماتوغرافيا السائل عالية الأداء (HPLC)؟

هي النمط المميز للقمم في أوقات استبقاء محددة ينتجها المستخلص؛ تساعد مقارنة هذا الملف بمرجع في تأكيد الهوية والاتساق ويمكن تحليلها بتقنيات الكيمياء القياسية.