Kalibrasyon ve Metot Validasyonu
Kalibrasyon, bir enstrümanın yanıtını analit konsantrasyonuyla ilişkilendirmekte; metot validasyonu ise analitik bir prosedürün amaçlanan kullanımına uygun olduğunu göstermektedir.
Tanım
Kalibrasyon ve metot validasyonu, sinyal ile konsantrasyon arasındaki kantitatif ilişkiyi kuran ve tanımlanmış performans karakteristikleri aracılığıyla bir metodun amaçlanan kullanımı için güvenilir sonuçlar verdiğini gösteren analitik prosedürlerdir.
Kapsam
Bu konu, ölçümleri izlenebilir ve güvenilir kılan stratejileri kapsamaktadır: harici standart kalibrasyon eğrileri, standart ekleme ve dahili standart metotları ve bunları uydurmak için kullanılan regresyon ile birlikte metot validasyonunda değerlendirilen doğruluk, kesinlik, hassasiyet, seçicilik, tespit ve tayin limitleri, doğrusal aralık ve sağlamlık gibi performans göstergeleri. Matris etkileri ve referans materyallerin rolü de ele alınmaktadır.
Temel sorular
- Bir kalibrasyon eğrisi nasıl oluşturulur ve sinyali konsantrasyona dönüştürmek için nasıl kullanılır?
- Matris etkilerini aşmak için standart ekleme veya dahili standart metotlarına ne zaman ihtiyaç duyulur?
- Tespit ve tayin limitleri nasıl tanımlanır ve tahmin edilir?
- Valide edilmiş bir metot hangi performans karakteristiklerini göstermelidir?
Temel kuramlar
- Kalibrasyon ve regresyon
- Bir kalibrasyon, ölçülen yanıtı bilinen konsantrasyonlarla ilişkilendirmekte olup, genellikle eğimi hassasiyeti veren ve saçılımı tespit limitini belirleyen doğrusal regresyon aracılığıyla yapılmaktadır; standart ekleme ve dahili standart varyantları matris etkilerini ve enstrümantal kaymayı düzeltmektedir.
Mekanizmalar
Kalibrasyonda, bilinen konsantrasyonlardaki standartlar ölçülmekte ve tipik olarak bir regresyon doğrusu olan bir model uydurulmaktadır; bu model daha sonra bilinmeyen konsantrasyonları yanıtlarından okumak için kullanılmaktadır. Numune matrisi yanıtı değiştirdiğinde, standart ekleme analiti numuneye ekleyerek matrisin tüm noktalarda ortak olmasını sağlamakta ve dahili bir standart değişken geri kazanımı veya sinyali düzeltmektedir. Validasyon daha sonra, doğruluk, kesinlik, seçicilik ve çalışma aralığını göstermek için tekrarlar, referans materyaller ve geri kazanım çalışmaları kullanarak metodu performans göstergelerine göre test etmektedir.
Klinik önem
Kalibrasyon ve validasyon, laboratuvar kalitesinin temelini oluşturmaktadır: düzenlenmiş farmasötik ve klinik analizler kullanılmadan önce valide edilmeli, çevre ve gıda laboratuvarları akreditasyon için metotları valide etmekte ve referans materyallere izlenebilirlik, sonuçların laboratuvarlar arasında karşılaştırılmasına olanak tanımaktadır.
Tarihçe
Kantitatif kalibrasyon ve istatistiksel kalite değerlendirmesi, 20. yüzyıl boyunca enstrümantal analizle birlikte gelişmiştir. Youden, sağlamlık testini ve laboratuvarlar arası çalışma tasarımını geliştirmiş, Lloyd Currie'nin çalışmaları tespit ve tayin limitlerini resmileştirmiş, uyumlaştırılmış validasyon kılavuzları ise daha sonra bir metodun göstermesi gereken performans karakteristiklerini kodlamıştır.
Öne çıkan isimler
- Walter J. Youden
- Lloyd Currie
İlgili konular
Temel eserler
- miller2018
- skoog2014fac
- harris2020
Sıkça sorulan sorular
- Standart ekleme metodu nedir?
- Bu, bilinen miktarlarda analitin doğrudan numunenin belirli kısımlarına eklendiği bir kalibrasyon yaklaşımıdır; her ölçüm aynı matrisi paylaştığı için, sıradan bir harici kalibrasyonu yanlı hale getirebilecek matris etkilerini düzeltmektedir.
- Bir metodun tespit limiti nedir?
- Bu, bir körden güvenilir bir şekilde ayırt edilebilen en küçük analit konsantrasyonudur; körün değişkenliğinden ve kalibrasyon hassasiyetinden tahmin edilmektedir; metot validasyonu sırasında rapor edilen önemli bir performans göstergesidir.