İnce Tabaka Kromatografisi
İnce tabaka kromatografisi (TLC), bir bitki ekstraktının bileşenlerini ince bir adsorban tabaka üzerinde ayırarak, kimlik testi için kimyasal bir parmak izi görevi gören bir leke deseni oluşturur. Enstrümantal formu olan yüksek performanslı ince tabaka kromatografisi (HPTLC), tekniği standardize etmekte ve densitometrik tespit ekleyerek, bitkisel materyallerin doğrulanması ve standardize edilmesi için yaygın olarak kullanılan, nispeten basit bir yöntem haline gelmektedir.
Tanım
İnce tabaka kromatografisi, örnek bileşenlerinin hareketli bir çözücünün etkisi altında ince bir sabit faz tabakası üzerinde farklı hızlarda göç ettiği, kimlik ve saflık testi için kimyasal bir parmak izi olarak kullanılan, ayrılmış bölgelerin tekrarlanabilir bir desenini oluşturan düzlemsel bir ayırma tekniğidir.
Kapsam
Bu madde, düzlemsel ayırma prensibini, ham ilaçların kimlik ve tutarlılık testleri için TLC ve HPTLC parmak izlerinin kullanımını ve bunların kromatografik kalite kontrol yöntemleri arasındaki yerini kapsamaktadır. Bu bir metodolojik referanstır, klinik bir rehberlik niteliği taşımamaktadır.
Temel sorular
- Bir numunenin leke deseni, beyan edilen ilaç için referans parmak iziyle eşleşiyor mu?
- Karakteristik işaretleyici bileşenler densitometri ile tespit edilip geçici olarak kantifiye edilebilir mi?
- Parmak izi, tağşişi, ikameyi veya eksik bileşenleri ortaya koyuyor mu?
Anahtar kavramlar
- Sabit bir tabaka üzerinde düzlemsel ayırma
- Gecikme faktörü (Rf)
- Kromatografik parmak izi
- Yüksek performanslı TLC (HPTLC) ve densitometri
- İşaretleyici bileşikler ve referans izler
- Türevlendirme ve görselleştirme reaktifleri
Mekanizmalar
Kaplanmış bir plağa az miktarda ekstrakt uygulanır ve bu plaka bir çözücü sisteminde geliştirilir; böylece bileşenler, gecikme faktörleri (retardation factor) ile karakterize edilen sabit ve hareketli fazlara olan göreceli afinitelerine göre ayrılır. Geliştirme sonrası plaka, ultraviyole ışık altında veya türevlendirme reaktifleri ile görselleştirilerek bölgelerin bir deseni oluşturulur. Örnek izinin referans ve işaretleyici izlerle karşılaştırılması bir kimlik parmak izi sağlarken, HPTLC'de densitometrik tarama yarı-kantitatif ölçüme olanak tanımaktadır. Standartlaştırılmış HPTLC koşulları tekrarlanabilirliği artırarak, TLC parmak izlerini bitkisel materyallerin doğrulanması ve standardize edilmesi için pratik bir araç haline getirmektedir (reich-schibli-2007, who-2011-qc, xie-2006).
Klinik önem
TLC ve HPTLC parmak izleri, bitkisel materyallerin kimliğinin ve parti tutarlılığının doğrulanmasına, ayrıca tağşişin tespit edilmesine katkıda bulunarak ürün kalite güvencesini desteklemektedir. Bu madde analitik bir yöntemi tanımlamakta olup, bireysel tedavi kararları için bir temel oluşturmamaktadır.
Kanıt ve kılavuzlar
DSÖ kalite kontrol rehberleri ve farmakope monografları, bitkisel materyaller için kimlik testleri olarak TLC parmak izlerini kullanmaktadır; tıbbi bitkiler için özel HPTLC metodolojisi ise bu yaklaşımı standardize etmektedir (who-2011-qc, reich-schibli-2007, evans-2009). Kromatografik parmak izi çalışmalarına ilişkin derlemeler, TLC'yi HPLC ve diğer tekniklerle birlikte parmak izi tabanlı bir kalite değerlendirme çerçevesi içinde konumlandırmaktadır (xie-2006).
Tarihçe
İnce tabaka kromatografisi, yirminci yüzyılın ortalarında standart bir laboratuvar ayırma yöntemi haline gelmiş ve bitki analizi için hızla benimsenmiştir. Özellikle tıbbi bitki analizi için geliştirilen, densitometri ile HPTLC olarak enstrümantal iyileştirmesi, onu bitkisel kalite kontrolünde rutin bir parmak izi aracı olarak konumlandırmıştır (reich-schibli-2007, evans-2009).
İlgili konular
Temel eserler
- reich-schibli-2007
- xie-2006
Sıkça sorulan sorular
- TLC parmak izi nedir?
- Bir ekstrakt ince tabaka plaka üzerinde geliştirildiğinde oluşan, ayrılmış bölgelerin tekrarlanabilir desenidir; bu deseni bir referansla karşılaştırmak, bir ilacın kimliğini doğrulamaya ve tağşişi tespit etmeye yardımcı olmaktadır.
- HPTLC, sıradan TLC'den nasıl farklıdır?
- HPTLC, daha ince, standartlaştırılmış plakalar ve densitometrik tarama dahil olmak üzere enstrümantasyon kullanır; bu da tekrarlanabilirliği artırır ve ayrılmış bileşenlerin yarı-kantitatif ölçümüne olanak tanır.