Kalibrasi dan Validasi Metode

Kalibrasi mengaitkan respons instrumen dengan konsentrasi analit, dan validasi metode menunjukkan bahwa prosedur analitis sesuai untuk tujuan yang dimaksudkan.

Definition

Kalibrasi dan validasi metode adalah prosedur analitis yang menetapkan hubungan kuantitatif antara sinyal dan konsentrasi serta yang menunjukkan, melalui karakteristik kinerja yang ditentukan, bahwa suatu metode memberikan hasil yang andal untuk penggunaan yang dimaksudkan.

Scope

Topik ini mencakup strategi yang membuat pengukuran dapat dilacak dan dapat dipercaya: kurva kalibrasi standar eksternal, metode penambahan standar dan standar internal, serta regresi yang digunakan untuk menyesuaikannya, bersama dengan angka-angka kualitas—akurasi, presisi, sensitivitas, selektivitas, batas deteksi dan kuantifikasi, rentang linier, dan ketahanan—yang dievaluasi dalam validasi metode. Ini membahas efek matriks dan peran bahan referensi.

Core questions

• Bagaimana kurva kalibrasi dibangun dan digunakan untuk mengubah sinyal menjadi konsentrasi?
• Kapan metode penambahan standar atau standar internal diperlukan untuk mengatasi efek matriks?
• Bagaimana batas deteksi dan kuantifikasi didefinisikan dan diperkirakan?
• Karakteristik kinerja apa yang harus ditunjukkan oleh metode yang divalidasi?

Key theories

Kalibrasi dan regresi

Kalibrasi mengaitkan respons terukur dengan konsentrasi yang diketahui, biasanya melalui regresi linier yang kemiringannya memberikan sensitivitas dan penyebarannya menetapkan batas deteksi; varian penambahan standar dan standar internal mengoreksi efek matriks dan pergeseran instrumental.

Mechanisms

Dalam kalibrasi, standar dengan konsentrasi yang diketahui diukur dan model—biasanya garis regresi—disesuaikan, kemudian digunakan untuk membaca konsentrasi yang tidak diketahui dari responsnya. Ketika matriks sampel mengubah respons, penambahan standar menambahkan analit ke sampel sehingga matriks umum untuk semua titik, dan standar internal mengoreksi pemulihan atau sinyal yang bervariasi. Validasi kemudian menguji metode terhadap angka-angka kualitas, menggunakan replikat, bahan referensi, dan studi pemulihan untuk menunjukkan akurasi, presisi, selektivitas, dan rentang kerja.

Clinical relevance

Kalibrasi dan validasi adalah tulang punggung kualitas laboratorium: uji farmasi dan klinis yang diatur harus divalidasi sebelum digunakan, laboratorium lingkungan dan makanan memvalidasi metode untuk akreditasi, dan ketertelusuran ke bahan referensi memungkinkan hasil dibandingkan antar laboratorium.

History

Kalibrasi kuantitatif dan penilaian kualitas statistik berkembang sepanjang abad ke-20 bersamaan dengan analisis instrumental. Youden mengembangkan pengujian ketahanan dan desain studi antar-laboratorium, dan karya Lloyd Currie memformalkan batas deteksi dan kuantifikasi, sementara pedoman validasi yang harmonis kemudian mengkodifikasi karakteristik kinerja yang harus ditunjukkan oleh suatu metode.

Key figures

• Walter J. Youden
• Lloyd Currie

Seminal works

• miller2018
• skoog2014fac
• harris2020

Frequently asked questions

Apa itu metode penambahan standar?

Ini adalah pendekatan kalibrasi di mana sejumlah analit yang diketahui ditambahkan langsung ke bagian sampel; karena setiap pengukuran memiliki matriks yang sama, ini mengoreksi efek matriks yang akan membiaskan kalibrasi eksternal biasa.

Apa itu batas deteksi suatu metode?

Ini adalah konsentrasi analit terkecil yang dapat dibedakan secara andal dari blanko, diperkirakan dari variabilitas blanko dan sensitivitas kalibrasi; ini adalah angka kualitas utama yang dilaporkan selama validasi metode.