کالیبراسیون و اعتبارسنجی روش
کالیبراسیون، پاسخ یک ابزار را به غلظت آنالیت مرتبط میسازد و اعتبارسنجی روش نشان میدهد که یک روش تحلیلی برای هدف مورد نظر خود مناسب است.
Definition
کالیبراسیون و اعتبارسنجی روش، رویههای تحلیلی هستند که رابطه کمی بین سیگنال و غلظت را برقرار میکنند و از طریق ویژگیهای عملکردی تعریفشده، نشان میدهند که یک روش نتایج قابل اعتمادی را برای استفاده مورد نظر خود ارائه میدهد.
Scope
این موضوع راهبردهایی را پوشش میدهد که اندازهگیریها را قابل ردیابی و قابل اعتماد میسازند: منحنیهای کالیبراسیون استاندارد خارجی، روشهای افزودن استاندارد و استاندارد داخلی، و رگرسیون مورد استفاده برای برازش آنها، همراه با معیارهای شایستگی—دقت، صحت، حساسیت، گزینشپذیری، حدود تشخیص و کمیسازی، دامنه خطی، و استحکام—که در اعتبارسنجی روش ارزیابی میشوند. این موضوع به اثرات ماتریس و نقش مواد مرجع میپردازد.
Core questions
- چگونه یک منحنی کالیبراسیون ساخته میشود و برای تبدیل سیگنال به غلظت استفاده میگردد؟
- چه زمانی برای غلبه بر اثرات ماتریس به روشهای افزودن استاندارد یا استاندارد داخلی نیاز است؟
- حدود تشخیص و کمیسازی چگونه تعریف و تخمین زده میشوند؟
- یک روش اعتبارسنجیشده چه ویژگیهای عملکردی را باید نشان دهد؟
Key theories
- کالیبراسیون و رگرسیون
- کالیبراسیون، پاسخ اندازهگیریشده را به غلظتهای معلوم مرتبط میسازد، معمولاً از طریق رگرسیون خطی که شیب آن حساسیت را نشان میدهد و پراکندگی آن حد تشخیص را تعیین میکند؛ واریانتهای افزودن استاندارد و استاندارد داخلی برای اثرات ماتریس و رانش ابزاری تصحیح میکنند.
Mechanisms
در کالیبراسیون، استانداردهای با غلظت معلوم اندازهگیری میشوند و یک مدل—معمولاً یک خط رگرسیون—برازش میشود، سپس برای خواندن غلظتهای نامعلوم از پاسخهای آنها استفاده میشود. هنگامی که ماتریس نمونه پاسخ را تغییر میدهد، افزودن استاندارد، نمونه را با آنالیت اسپایک میکند تا ماتریس برای همه نقاط مشترک باشد، و یک استاندارد داخلی برای بازیابی یا سیگنال متغیر تصحیح میکند. سپس اعتبارسنجی، روش را در برابر معیارهای شایستگی، با استفاده از تکرارها، مواد مرجع، و مطالعات بازیابی برای نشان دادن دقت، صحت، گزینشپذیری، و دامنه کاری آزمایش میکند.
Clinical relevance
کالیبراسیون و اعتبارسنجی ستون فقرات کیفیت آزمایشگاهی هستند: سنجشهای دارویی و بالینی تنظیمشده باید قبل از استفاده اعتبارسنجی شوند، آزمایشگاههای محیط زیست و مواد غذایی روشها را برای اعتباربخشی اعتبارسنجی میکنند، و قابلیت ردیابی به مواد مرجع امکان مقایسه نتایج را در بین آزمایشگاهها فراهم میآورد.
History
کالیبراسیون کمی و ارزیابی آماری کیفیت در طول قرن بیستم در کنار تحلیل ابزاری توسعه یافتند. یودن (Youden) آزمایش استحکام و طراحی مطالعه بین آزمایشگاهی را پیش برد، و کار لوید کوری (Lloyd Currie) حدود تشخیص و کمیسازی را رسمی کرد، در حالی که دستورالعملهای اعتبارسنجی هماهنگشده بعداً ویژگیهای عملکردی را که یک روش باید نشان دهد، کدگذاری کردند.
Key figures
- Walter J. Youden
- Lloyd Currie
Related topics
Seminal works
- miller2018
- skoog2014fac
- harris2020
Frequently asked questions
- روش افزودن استاندارد چیست؟
- این یک رویکرد کالیبراسیون است که در آن مقادیر معلومی از آنالیت مستقیماً به بخشهایی از نمونه اضافه میشوند؛ از آنجا که هر اندازهگیری ماتریس یکسانی را به اشتراک میگذارد، اثرات ماتریس را که یک کالیبراسیون خارجی معمولی را مغرضانه میکرد، تصحیح میکند.
- حد تشخیص یک روش چیست؟
- این کوچکترین غلظت آنالیت است که میتواند به طور قابل اعتماد از یک بلانک متمایز شود، که از تغییرپذیری بلانک و حساسیت کالیبراسیون تخمین زده میشود؛ این یک معیار شایستگی کلیدی است که در طول اعتبارسنجی روش گزارش میشود.