ग्राम अभिरंजन (Gram Staining) और विभेदक अभिरंजन (Differential Staining)

ग्राम अभिरंजन जीवाणु विज्ञान का मूलभूत विभेदक अभिरंजन है: क्रिस्टल वायलेट, आयोडीन मॉर्डेंट, विरंजन चरण और एक प्रतिअभिरंजक का एक क्रम जो जीवाणुओं को ग्राम-पॉजिटिव (बैंगनी डाई को बनाए रखने वाले) और ग्राम-नेगेटिव (इसे खोने वाले और लाल प्रतिअभिरंजक को ग्रहण करने वाले) में वर्गीकृत करता है। विभेदक अभिरंजन व्यापक रूप से कोशिकाओं के संरचनात्मक गुणों का उपयोग उन्हें नेत्रहीन रूप से अलग-अलग समूहों में विभाजित करने के लिए करते हैं।

Definition

ग्राम अभिरंजन एक विभेदक अभिरंजन विधि है जो जीवाणुओं को ग्राम-पॉजिटिव या ग्राम-नेगेटिव के रूप में वर्गीकृत करती है, इस आधार पर कि उनकी कोशिका भित्ति विरंजन के बाद क्रिस्टल वायलेट-आयोडीन कॉम्प्लेक्स को बरकरार रखती है या नहीं, जो पेप्टिडोग्लाइकन की मोटाई और आवरण संरचना में अंतर को दर्शाता है।

Scope

यह विषय ग्राम अभिरंजन की प्रक्रिया और अंतर्निहित तंत्र, यह कैसे कोशिका-भित्ति संरचना को दर्शाता है, और विभेदक अभिरंजन की व्यापक अवधारणा को शामिल करता है, जिसमें माइकोबैक्टीरिया के लिए एसिड-फास्ट अभिरंजन और एंडोस्पोर अभिरंजन शामिल हैं। यह अभिरंजन विधियों को स्वयं ही मानता है; ग्राम प्रतिक्रिया की व्याख्या करने वाली आवरण संरचना को एक संबंधित विषय द्वारा कवर किया गया है।

Core questions

• ग्राम अभिरंजन के चरण क्या हैं और प्रत्येक क्या करता है?
• ग्राम-पॉजिटिव और ग्राम-नेगेटिव कोशिकाएं प्रक्रिया में अलग तरह से व्यवहार क्यों करती हैं?
• अन्य विभेदक अभिरंजन, जैसे कि एसिड-फास्ट और एंडोस्पोर अभिरंजन, कैसे काम करते हैं?

Key concepts

• प्राथमिक अभिरंजक (क्रिस्टल वायलेट)
• मॉर्डेंट (आयोडीन)
• अल्कोहल या एसीटोन से विरंजन
• प्रतिअभिरंजक (सैफ्रानिन)
• ग्राम-पॉजिटिव बनाम ग्राम-नेगेटिव प्रतिक्रिया
• एसिड-फास्ट अभिरंजन
• एंडोस्पोर अभिरंजन

Mechanisms

ग्राम प्रक्रिया में, क्रिस्टल वायलेट सभी कोशिकाओं को अभिरंजित करता है और आयोडीन उनके भीतर एक बड़ा डाई-आयोडीन कॉम्प्लेक्स बनाता है। विरंजन तब कोशिका-भित्ति संरचना में अंतर का फायदा उठाता है: ग्राम-पॉजिटिव कोशिकाओं का मोटा, निर्जलित पेप्टिडोग्लाइकन कॉम्प्लेक्स को फँसा लेता है, जबकि ग्राम-नेगेटिव कोशिकाओं में पतली पेप्टिडोग्लाइकन परत और विलायक-बाधित बाहरी झिल्ली कॉम्प्लेक्स को धुलने देती है, जिससे कोशिकाएं विरंजित हो जाती हैं और सैफ्रानिन प्रतिअभिरंजक को ग्रहण कर लेती हैं। इसलिए प्रतिक्रिया कोशिका आवरण की संरचना को दर्शाती है। अन्य विभेदक अभिरंजन विशिष्ट गुणों का उपयोग करते हैं: एसिड-फास्ट अभिरंजन माइकोबैक्टीरिया की मोमी, माइकोलिक-एसिड-समृद्ध भित्ति पर निर्भर करता है, और एंडोस्पोर अभिरंजन स्पोर कोट की अभेद्यता पर निर्भर करता है।

Clinical relevance

ग्राम अभिरंजन नैदानिक ​​नमूने पर किए गए सबसे शुरुआती और सबसे व्यापक रूप से उपयोग किए जाने वाले अवलोकनों में से एक है, जो जीवों का एक त्वरित संरचनात्मक वर्गीकरण देता है जो, आकृति विज्ञान के साथ, यह निर्धारित करता है कि प्रयोगशालाएं एक आइसोलेट का वर्णन कैसे करती हैं; एसिड-फास्ट अभिरंजन भी इसी तरह माइकोबैक्टीरिया की पहचान करता है। यह प्रविष्टि अभिरंजन विधियों को संदर्भ सामग्री के रूप में वर्णित करती है और व्यक्तिगत निदान या उपचार निर्णयों का आधार नहीं है।

Evidence & guidelines

प्रक्रिया और कोशिका-भित्ति संरचना में इसका यांत्रिक आधार क्लासिक समीक्षाओं और कोशिका-आवरण साहित्य में स्थापित है और प्रयोगशाला मैनुअल और मानक सूक्ष्म जीव विज्ञान पाठ्यपुस्तकों में मानकीकृत है।

History

हंस क्रिश्चियन ग्राम ने 1884 में ऊतक में जीवाणुओं को अधिक दृश्यमान बनाने की कोशिश करते हुए अभिरंजन विधि की शुरुआत की; उन्होंने जो विभेदक व्यवहार देखा, वह जीवाणुओं के एक मौलिक संरचनात्मक विभाजन को दर्शाता है। बाद के काम ने, बीसवीं शताब्दी के मध्य में समीक्षा की गई, चरणों की रसायन विज्ञान को स्पष्ट किया और प्रतिक्रिया को कोशिका भित्ति और आवरण की वास्तुकला से जोड़ा।

Key figures

• Hans Christian Gram
• James W. Bartholomew
• Terry J. Beveridge

Seminal works

• bartholomew-1952
• beveridge-1999

Frequently asked questions

ग्राम-पॉजिटिव बैक्टीरिया बैंगनी और ग्राम-नेगेटिव बैक्टीरिया गुलाबी क्यों अभिरंजित होते हैं?

ग्राम-पॉजिटिव कोशिकाओं में एक मोटी पेप्टिडोग्लाइकन भित्ति होती है जो विरंजन के दौरान क्रिस्टल वायलेट-आयोडीन कॉम्प्लेक्स को बरकरार रखती है, इसलिए वे बैंगनी रहते हैं, जबकि ग्राम-नेगेटिव कोशिकाओं में एक पतली भित्ति और एक बाहरी झिल्ली होती है जो कॉम्प्लेक्स को धुलने देती है, इसलिए वे गुलाबी प्रतिअभिरंजक को ग्रहण करते हैं।

विभेदक अभिरंजन क्या है?

एक विभेदक अभिरंजन कोशिकाओं के बीच संरचनात्मक या रासायनिक अंतर का उपयोग उन्हें नेत्रहीन रूप से पहचानने योग्य समूहों में विभाजित करने के लिए करता है; ग्राम अभिरंजन, एसिड-फास्ट अभिरंजन और एंडोस्पोर अभिरंजन सामान्य उदाहरण हैं।