यूवी-दृश्य अवशोषण स्पेक्ट्रोस्कोपी

यूवी-दृश्य अवशोषण स्पेक्ट्रोस्कोपी इलेक्ट्रॉनिक संक्रमणों के माध्यम से विश्लेष्यों को मापने के लिए एक नमूने द्वारा पराबैंगनी या दृश्य प्रकाश के क्षीणन को मापती है।

Definition

यूवी-दृश्य अवशोषण स्पेक्ट्रोस्कोपी एक आणविक स्पेक्ट्रोस्कोपिक विधि है जो इलेक्ट्रॉनिक संक्रमणों के दौरान अवशोषित पराबैंगनी या दृश्य विकिरण के अंश से विश्लेष्य सांद्रता निर्धारित करती है।

Scope

यह विषय लगभग 190 और 800 nm के बीच आणविक अवशोषण को मापने के उपकरण और अभ्यास को शामिल करता है: सतत और रेखा स्रोत, मोनोक्रोमेटर और फोटोडायोड सरणियाँ, एकल- और दोहरी-बीम स्पेक्ट्रोफोटोमीटर, और मात्रात्मक निर्धारण के लिए बीयर-लैम्बर्ट नियम का अनुप्रयोग। इसमें रंगमिति विधियाँ शामिल हैं जिनमें एक रंग-बनाने वाली प्रतिक्रिया एक गैर-अवशोषित विश्लेष्य को मापने योग्य बनाती है।

Core questions

• बीयर-लैम्बर्ट नियम के माध्यम से अवशोषण सांद्रता से कैसे संबंधित है?
• कौन से क्रोमोफोर और इलेक्ट्रॉनिक संक्रमण यूवी-दृश्य अवशोषण को जन्म देते हैं?
• गैर-अवशोषित विश्लेष्यों का पता लगाने योग्य बनाने के लिए रंगमिति अभिकर्मकों का उपयोग कैसे किया जाता है?
• त्रुटि के कौन से स्रोत—भटकी हुई रोशनी, बीयर के नियम से विचलन, वाद्य शोर—सटीकता को सीमित करते हैं?

Key theories

बीयर-लैम्बर्ट नियम

अवशोषण मोलर अवशोषण, पथ की लंबाई और सांद्रता का गुणनफल होता है, जो अंशांकन के विरुद्ध एकल माप से प्रत्यक्ष मात्रा निर्धारण की अनुमति देता है; यह नियम एकवर्णी विकिरण, तनु विलयनों और कोई रासायनिक या वाद्य विचलन नहीं मानता है।

Mechanisms

अवशोषण तब उत्पन्न होता है जब एक फोटॉन एक इलेक्ट्रॉन को ग्राउंड-स्टेट आणविक कक्षक से उच्च-ऊर्जा कक्षक में बढ़ावा देता है; ऊर्जा अंतराल अवशोषित तरंग दैर्ध्य को निर्धारित करता है, और मोलर अवशोषण संक्रमण संभावना को दर्शाता है। एक स्पेक्ट्रोफोटोमीटर प्रेषित और आपतित तीव्रता के अनुपात को मापता है, इसे संप्रेषण के रूप में रिपोर्ट करता है, और इसे लघुगणकीय रूप से अवशोषण में परिवर्तित करता है, जो रैखिक सीमा पर सांद्रता के समानुपाती होता है।

Clinical relevance

यूवी-दृश्य स्पेक्ट्रोफोटोमेट्री अनगिनत नियमित परीक्षणों का आधार है: प्रोटीन और न्यूक्लिक-एसिड मात्रा निर्धारण, एंजाइमेटिक क्लिनिकल-केमिस्ट्री परीक्षण, जल विश्लेषण में घुलित-प्रजाति माप, और फार्मास्युटिकल परीक्षण और विघटन परीक्षण।

History

इस विधि का मात्रात्मक आधार 18वीं शताब्दी में प्रकाश क्षीणन पर बूगर और लैम्बर्ट के काम और बीयर के 1852 के प्रदर्शन से मिलता है कि अवशोषण सांद्रता के साथ बढ़ता है। व्यावहारिक फोटोइलेक्ट्रिक स्पेक्ट्रोफोटोमीटर 1940 के दशक में उभरे, और डायोड-सरणी उपकरणों ने बाद में तेजी से पूर्ण-स्पेक्ट्रम अधिग्रहण को सक्षम किया।

Key figures

• August Beer
• Pierre Bouguer
• Johann Heinrich Lambert

Seminal works

• skoog2017
• harris2020

Frequently asked questions

संप्रेषण और अवशोषण में क्या अंतर है?

संप्रेषण आपतित प्रकाश का वह अंश है जो नमूने से होकर गुजरता है; अवशोषण संप्रेषण का ऋणात्मक लघुगणक है और सांद्रता के सीधे समानुपाती होता है, यही कारण है कि मात्रात्मक कार्य अवशोषण का उपयोग करता है।

यूवी-दृश्य स्पेक्ट्रोस्कोपी में एक रिक्त (ब्लैंक) क्यों मापा जाता है?

विश्लेष्य के अलावा सब कुछ युक्त एक रिक्त विलायक, क्यूवेट और अभिकर्मकों द्वारा अवशोषण और परावर्तन के लिए सुधार करता है, ताकि मापा गया अवशोषण केवल विश्लेष्य को दर्शाता है।